Анализ фосфоаминокислот , или PAA, представляет собой экспериментальный метод, используемый в молекулярной биологии для определения того, какая аминокислота или кислоты фосфорилируются в белке.
Белок сначала фосфорилируется с использованием 32 P-меченного АТФ, обычно с помощью киназного анализа in vitro . Затем большая часть аминокислот в белке гидролизуется, обычно с использованием сильной кислоты, такой как соляная кислота . Эти аминокислоты затем разделяются с помощью двумерной тонкослойной хроматографии вместе со стандартами аминокислот для трех аминокислот, которые фосфорилируются у эукариот: серина , треонина и тирозина . Эти стандарты аминокислот можно визуализировать на подложке для ТСХ путем воздействия нингидрина , который окрашивает аминокислоты в видимый фиолетовый цвет при нагревании до ~ 100 ° C. Радиоактивные аминокислоты можно обнаружить с помощью авторадиографии, а наложение двух изображений покажет, какие аминокислоты фосфорилируются.