Артур Дейл Риггс (8 августа 1939 г. – 23 марта 2022 г.) [1] был американским генетиком , который работал с Genentech над экспрессией первого искусственного гена в бактериях . Его работа имела решающее значение для современной биотехнологической отрасли, поскольку это было первое использование молекулярных методов в коммерческом производстве лекарств [2] и позволило осуществить крупномасштабное производство белковых препаратов , включая инсулин . Он также сыграл важную роль в зарождении эпигенетики .
Риггс был профессором биологии, а в 2014 году — директором-основателем Научно-исследовательского института диабета и метаболизма Национального медицинского центра города Хоуп . [3] Он был деканом-основателем аспирантуры города Хоуп, Высшей школы биологических наук Айрелла и Манеллы . Он также был почетным директором Научно-исследовательского института Бекмана Национального медицинского центра города Хоуп, который он возглавлял с 2000 по 2007 год . [4] Риггс входил в совет попечителей Высшего института прикладных наук о жизни Кека . [5] [6] В 2006 году Риггс был избран в Национальную академию наук . [7] [8]
Риггс родился в Модесто, Калифорния , недалеко от дома его семьи в Сересе, Калифорния , [2] [9] 8 августа 1939 года. [10] После того, как семья потеряла свою ферму во время Великой депрессии , они переехали в Сан-Бернардино, Калифорния , где Риггс учился в средней школе Сан-Бернардино . Он помогал своему отцу, который управлял трейлерным парком , строить и ремонтировать вещи. Его мать, медсестра, подарила ему набор для химии, чтобы поощрить его интерес к химии и биологии. [9] [10]
Риггс получил степень бакалавра по химии в Калифорнийском университете в Риверсайде в 1961 году. [10] Он защитил докторскую диссертацию в Калифорнийском технологическом институте вместе с Гершелем К. Митчеллом , [9] [11] получив степень доктора философии по биохимии в 1966 году. [12] [13]
Будучи аспирантами в Калтехе, он и Джоэл А. Хуберман сотрудничали в работе, которая позже привела к классической статье о репликации ДНК млекопитающих , которая была опубликована в 1966 году. [14] [15] Они хотели использовать радиоактивные нуклеотиды для маркировки реплицирующейся ДНК, а затем использовать фотопленку для получения физических изображений, которые запечатлели бы то, что происходит во время репликации. Их руководители не были заинтересованы в эксперименте, когда Хуберман и Риггс предложили его, и студенты продолжили работу самостоятельно. Используя свой метод, они смогли измерить скорость репликации ДНК. Результаты показали, что хромосомная ДНК содержала много участков, которые реплицировались независимо, и что репликация происходила в обоих направлениях в начале каждого участка. Результаты были важны и помогли расширить понимание учеными репликации ДНК млекопитающих. Гершель Митчелл и Джузеппе Аттарди , их руководители, считали, что статьи должны быть опубликованы под именами Хубермана и Риггса, без имен их руководителей, поскольку они выполнили работу независимо. [9]
Риггс перешел в Институт Солка, чтобы изучать взаимодействия белок-ДНК с Мелвином Коном в качестве постдокторанта с 1966 по 1969 год. В то время были идентифицированы два белка, связывающиеся с ДНК и контролирующие экспрессию генов: лямбда-репрессор и lac-репрессор . Риггс работал над выделением lac-репрессора с помощью аффинной хроматографии . Уолтер Гилберт и Бенно Мюллер-Хилл были первыми, кто успешно идентифицировал его, используя другую технику. [2] Однако Артур Риггс был первым, кто очистил пригодные для использования количества белка фактора транскрипции, lac-репрессора. [9] Он и Сюзанна Буржуа [2] разработали метод анализа связывания с нитроцеллюлозным фильтром , который был намного быстрее существующих методов анализа. [16] Их работа привела к появлению еще одной известной серии статей о lac-репрессоре и регуляции бактериальных генов , [9] [16] [17] [18] открыв новые области исследований и теории. [16] : 109
В результате своего интереса к регуляции генов в клетках млекопитающих, Риггс заинтересовался инактивацией Х-хромосомы , при которой одна из двух копий Х-хромосомы, присутствующая у самки млекопитающего, инактивируется. Один из ее соавторов, Сусуму Оно , работал в Национальном медицинском центре города Хоуп. [9] В 1969 году Риггс присоединился к отделу молекулярной биологии в Национальном медицинском центре города Хоуп в качестве ассоциированного научного сотрудника. Он стал старшим научным сотрудником в 1974 году, ассоциированным председателем отделения биологии в 1979 году и председателем отделения биологии в 1981 году. [4]
Риггс продолжил изучать lac-репрессор и исследовал регуляцию генов в бактериях с Ричардом Э. Дикерсоном , Джоном Розенбергом и Кейити Итакурой . Они надеялись смешать lac-репрессор E. coli с lac-оператором , кристаллизовать его и изучить связывание белка с ДНК кристаллов с помощью анализа метилирования ДНК высокого разрешения. Им удалось клонировать lac-оператор Итакуры и подтвердить, что он будет работать в живых бактериях, что является важным результатом. Они также разработали метод, в котором исследователи добавляют короткие «линкеры» к последовательностям ДНК и вставляют их в бактериальный геном. [9] [19]
Риггс и Итакура сотрудничали с Гербертом Бойером в Genentech и использовали технологию рекомбинантной ДНК , чтобы стать первыми, кто произвел человеческий белок в E. coli . [2] [20] Следуя совету Риггса и Итакуры, группа успешно произвела гормон соматостатин в 1977 году в качестве доказательства концепции, прежде чем они попытались работать с более сложной молекулой инсулина . [21] Им удалось связать соматостатин с более крупным белком, бета-галактозидазой , произвести его в E. coli , изолировать его, а затем отделить соматостатин от галактозидазы. Соматостатин был первым гормоном млекопитающих, который был произведен в бактерии. [9]
Затем группа создала синтетический ген, кодирующий человеческий инсулин, который был примерно в десять раз больше, чем кодирующий соматостатин. [9] Им удалось создать искусственный инсулин в 1978 году. В 1979 году Риггс получил за эту работу исследовательскую премию Фонда детского диабета . [2] [22]
В 1973 году Риггс выдвинул гипотезу, что инактивация Х-хромосомы может действовать аналогично комплексам рестриктаз, таким как E. coli . В конце концов он опубликовал теоретическую работу по этой теме, в которой правильно предсказал ключевой механизм эпигенетики метилирования ДНК . [9] Благодаря продолжающимся исследованиям он помог понять механизмы метилирования ДНК и регуляции генов. [23] [24]
В 1980-х годах Риггс убедился, что тип подхода сплайсинга, используемый с рекомбинантной ДНК, также может быть использован для производства антител. Риггс работал со Шмуэлем Кабилли над «фундаментальной технологией, необходимой для искусственного синтеза молекул антител». [25] И снова Риггс и его группа охарактеризовали гены антител и клонировали их в бактерии. Они смогли описать и запатентовать метод создания гуманизированных моноклональных антител с использованием мышиных антител. [26] Они создали последовательность генов, которая «обманывала» или побуждала бактерии производить гуманизированные антитела, а не мышиные антитела. Эта технология была использована для производства «умных» лекарств от рака, таких как Герцептин , Ритуксан и Авастин . [27] [28] [29]
В 2009 году Риггс опубликовал результаты исследований, проведенных совместно с Гердом Пфейфером по «метилому» генома человеческой В-клетки, изучая паттерн метилирования ДНК всего генома в попытке найти паттерны эпигенетической метки 5-метилцитозина. Считается, что метилирование ДНК передает информацию от родительских клеток к дочерним клеткам, функционируя как вторичная, высокоточная система кодирования информации. Кровь, сданная для изоляции В-клеток, принадлежала самому Риггсу. «Это могла быть ДНК кого угодно, но как пионер в области эпигенетики метилирования ДНК, для меня есть что-то особенное в том, что это мой метилом». [9] Риггс продолжил работать над эпигенетическим программированием клетки, проектируя белки, которые могут связываться с ДНК строго определенными способами, где бы это ни было необходимо. [30]
Риггс принимал непосредственное участие в институциональном расширении City of Hope . В 1990-х годах он помог основать City of Hope Graduate School of Biological Sciences (переименованную в Irell & Manella Graduate School of Biological Sciences с 15 мая 2009 года) [31] и был ее деканом-основателем с 1994 по 1998 год. [4]
Во время работы Риггса на посту председателя Отдела биологии (1981–2000) Город Надежды был реструктурирован в ответ на грант в размере 10 миллионов долларов от Фонда Арнольда и Мейбл Бекман и создал Научно-исследовательский институт Бекмана Города Надежды. С момента его основания в 1983 году Риггс был председателем Отдела биологии Научно-исследовательского института Бекмана. С 2000 по 2007 год он занимал должность директора Научно-исследовательского института Бекмана. [4]
В 2014 году в City of Hope открылся новый Научно-исследовательский институт диабета и метаболизма, основанный на существующей программе исследований диабета, а Риггс стал первым директором института. [3]
Риггс женился на Джейн Риггс в 1960 году. У них было трое детей. [10]
Риггс умер 23 марта 2022 года в больнице в Дуарте, Калифорния . Ему было 82 года, и перед смертью он страдал лимфомой . [1] [10]
Команда City of Hope-Genentech одержала победу летом 1978 г. — за что в 1979 г. мы вручили премию Дэвида Рамбо Артуру Риггсу, доктору философии, Дэвиду Гёдделю, доктору философии, Кейичи Итакуре, доктору философии, Роберто Креа, доктору философии, и Деннису Клейду, доктору философии.....
В честь этой новаторской работы JDRF в 1979 г. вручил свою знаменитую премию Дэвида Рамбо Риггсу и еще четырем людям за то, что они сделали человеческий инсулин реальностью для диабетического сообщества...