Индикаторная пробирка для роста микобактерий

Образцы в пробирке с индикатором роста микобактерий (MGIT) в ультрафиолетовом свете. Излучение оранжевой флуоресценции указывает на присутствие микобактерий. Образцы без флуоресценции на этом изображении все еще отражают часть света от других.

Индикаторная пробирка для роста микобактерий (MGIT) предназначена для культивирования, обнаружения и восстановления микобактерий . Индикаторная пробирка для роста микобактерий MGIT содержит 7 мл модифицированной основы бульона Миддлбрука 7H9 . Полная среда с обогащением OADC и смесью антибиотиков PANTA является одной из наиболее часто используемых жидких сред для культивирования микобактерий.

Все типы клинических образцов, как легочных, так и внелегочных (кроме крови и мочи ), могут быть обработаны для первичной изоляции в пробирке MGIT с использованием обычных методов. После инокуляции обработанного образца пробирка MGIT должна непрерывно контролироваться вручную или с помощью автоматизированных инструментов до получения положительного результата или окончания протокола тестирования.

Принципы процедуры

Флуоресцентное соединение вмонтировано в силикон на дне круглодонных пробирок размером 16 × 100 мм. Флуоресцентное соединение чувствительно к присутствию кислорода , растворенного в бульоне. Первоначально большое количество растворенного кислорода гасит выбросы соединения, и можно обнаружить небольшую флуоресценцию. Позже активно дышащие микроорганизмы потребляют кислород и позволяют обнаружить флуоресценцию. ^{[ необходима цитата ]}

Пробирки заполняются образцами в бульоне и непрерывно инкубируются при температуре 37 °C. Пробирки контролируются на предмет увеличения флуоресценции, чтобы определить, является ли пробирка положительной по инструменту; т. е. содержит ли тестовый образец жизнеспособные организмы. Флуоресценцию можно регистрировать с помощью автоматизированных приборов, таких как система BACTEC MGIT 960 от Becton Dickinson , или вручную с помощью флуоресцентного ридера BD BACTEC microMGIT или лампы Вуда или другого длинноволнового источника УФ-света . ^[1]

Инструменты

Система BACTEC MGIT 960

Этот прибор произведен компанией Becton Dickinson (BD). Он специально разработан для размещения пробирки с индикатором роста микобактерий (MGIT) и их инкубации при температуре 37 °C. Прибор сканирует MGIT каждые 60 минут на предмет повышенной флуоресценции. Анализ флуоресценции используется для определения того, является ли пробирка положительной по инструменту; т. е. содержит ли тестовый образец жизнеспособные организмы. Положительная по инструменту пробирка содержит приблизительно от 10 ⁵ до 10 ⁶ колониеобразующих единиц на миллилитр (КОЕ/мл). Пробирки с культурой, которые остаются отрицательными в течение как минимум 42 дней (до 56 дней) и которые не показывают видимых признаков положительности, удаляются из прибора как отрицательные и выбрасываются. ^[1] Его полезность была оценена в научной литературе . ^{[2] [3] [4]}

Ссылки

1. Siddiqi, Salman H.; Sabine Rüsch-Gerdes (2006). Руководство по процедурам для системы BACTEC MGIT 960 TB .
2. «Использование BACTEC MGIT 960 для восстановления микобактерий из клинических образцов: многоцентровое исследование» Энрико Тортоли, Паола Чичеро, Клаудио Пьерсимони, М. Туллия Симонетти, Джампьетро Джезу и Доменико Ниста Журнал клинической микробиологии , ноябрь 1999 г., стр. 3578-3582, том 37, № 11 [1]
3. "Оценка автоматизированной системы BACTEC MGIT 960 для тестирования чувствительности Mycobacterium tuberculosis к четырем основным противотуберкулезным препаратам: сравнение с радиометрическим методом BACTEC 460TB и методом пропорции на агаровой пластине" Энрико Тортоли, Марта Бенедетти, Алессандра Фонтанелли и М. Туллия Симонетти Журнал клинической микробиологии , февраль 2002 г., стр. 607-610, том 40, № 2 doi :10.1128/JCM.40.2.607-610.2002
4. «Оценка полностью автоматизированной системы Bactec MGIT 960 для тестирования чувствительности Mycobacterium tuberculosis к препаратам первой линии: многоцентровое исследование» Фануриос Контоса, Мария Маниатия, Христос Костопулосb, Зои Гиттик, Ставрула Николауб, Эфимия Петинакия, Спиридула Анагностуб, Иоаннис Целентисc и Антониос Н. Маниатис Журнал микробиологических методов Том 56, выпуск 2, февраль 2004 г., страницы 291–294 doi :10.1016/j.mimet.2003.10.015