Сейпин — это гомоолигомерный интегральный мембранный белок в эндоплазматическом ретикулуме (ЭР), который концентрируется в местах соединения с цитоплазматическими липидными каплями (ЛК). С другой стороны, сейпин можно назвать белком врожденной липодистрофии Берардинелли-Сейпа типа 2 (BSCL2), и он кодируется соответствующим геном с тем же названием, то есть BSCL2 . На уровне белка сейпин экспрессируется в корковых нейронах лобных долей, а также в двигательных нейронах спинного мозга. Он высоко экспрессируется в таких областях, как мозг, яички и жировая ткань. [1] Функция сейпина до сих пор неясна, но он локализуется близко к липидным каплям, и клетки, выведенные из сейпина, имеют аномальные капли. [2] Таким образом, последние данные свидетельствуют о том, что сейпин играет решающую роль в биогенезе липидных капель. [3]
Хотя изначально его называли «таинственным белком», [4] недавние эмпирические исследования постепенно начинают раскрывать некоторые из наиболее важных физиологических функций сейпина. [2] [5] [6] [7] [8] Среди них были выявлены следующие: центральная регуляция энергетического гомеостаза, катаболизм липидов (необходим для дифференциации адипоцитов ), хранение липидов и поддержание липидных капель, а также предотвращение эктопического образования липидных капель в нежировых тканях. [9] Кроме того, мутации BSCL2 недавно были связаны с синдромом Сильвера [10] (наследственная спастическая периплегия типа 17 [11] ) и энцефалопатией Селии. [12] [13]
Ген сейпина BSCL2 был первоначально идентифицирован у млекопитающих и плодовой мушки, а затем распространен на грибы и растения. [14] Ген сейпина человека расположен на хромосоме 11q 13, с кодированием белка на цепи Крика. [15]
В GenBank есть три проверенных кодирующих транскрипта. Первоначально описанный первичный транскрипт содержал 11 экзонов с кодированием белка, начинающимся на экзоне 2 и заканчивающимся на экзоне 11 (вариант транскрипта 2), что привело к образованию белка из 398 аминокислот с двумя строго предсказанными трансмембранными доменами (TMD) , закодированными в экзонах 2 и 7 (изоформа 2).
Однако более длинный транскрипт (вариант 1) генерируется с альтернативным первым экзоном, содержащим сайт начала трансляции, что приводит к появлению дополнительных 64 аминокислот на N-концевом участке , всего 462 аминокислоты (изоформа 1).
Третий кодирующий транскрипт (вариант 3) расщепляет экзон 7 и производит укороченный и измененный карбоксильный конец в экзоне 10, генерируя белок из 287 аминокислот (изоформа 3). [3] Энцефалопатия Селии связана с мутацией в BSCL2 , которая приводит к увеличению альтернативного сплайсинга пре-мРНК в мРНК, в которой отсутствует седьмой экзон, соответствующий второму трансмембранному домену белкового продукта. [16]
Вторичная структура сейпина включает в себя консервативный центральный домен ядра и разнообразные цитозольные N- и C-концы. [17]
Белок имеет короткую цитоплазматическую область, трансмембранную альфа-спираль, водорастворимый бета-сэндвич-домен, расположенный в эндоплазматическом ретикулуме, и вторую спираль ТМ. [ необходима цитата ]
Существует три различных варианта аминокислотной последовательности сейпина: [18]
Все мутации сейпина происходят в его петлевом домене. Между некоторыми из них можно найти четыре большие делеции, которые указывают на то, что по крайней мере экзоны 4 и 5 необходимы для функционирования сейпина у людей. Кроме того, в петлевом домене были идентифицированы другие шесть мутаций. Большинство из них кластеризуются в единственном сайте гликозилирования, связанном с аспарагином (NVS) в сейпине. [3] Две мутации, вызывающие нейрональную сейпинопатию, N88S и S90L, расположены непосредственно в этом сайте. [19] Помимо приостановки процесса гликозилирования, эти мутации вызывают агрегацию сейпина и, следовательно, инициацию реакции на стресс ЭР. Белок сейпина также может иметь остаток модификации, который может трансформировать серин 289' и 372' в фосфосерин , эфир серина и фосфорной кислоты .
Сверхэкспрессия мутантных белков сейпина N88S или S90L также может активировать аутофагию и существенно изменять субклеточное распределение маркера аутофагосомы GFP-LC3, что приводит к появлению в цитоплазме ряда крупных вакуолей . Субклеточное расположение GFP-LC3 и мутантных белков сейпина в значительной степени перекрывается. Более того, эти белки сейпина могут диффундировать из небольших липидных капель в более крупные липиды.
Мутации сейпина связаны с врожденной генерализованной липодистрофией (см. ниже), а мутации в мотиве N-гликозилирования связывают сейпин с двумя другими расстройствами, а именно синдромом Сильвера и аутосомно-доминантной дистальной наследственной моторной невропатией типа V. [20]
CGL ( врожденная генерализованная липодистрофия ) — гетерогенное генетическое заболевание, характеризующееся почти полной потерей жировой ткани (как метаболических, так и механических жировых депо) и увеличением эктопического накопления жира в печени и мышцах. Из четырех типов CGL BSCL2 (врожденная липодистрофия Берардинелли-Сейпа типа 2), возникающая в результате мутаций в гене BSCL2/сейпина, демонстрирует наиболее тяжелый липодистрофический фенотип. [21]
Кроме того, эти пациенты могут страдать дислипидемией , стеатозом печени , резистентностью к инсулину и гипертрофической кардиомиопатией из-за клеточно-автономного дефекта кардиомиоцитов. [3]
В течение многих лет мутации гена сейпина ассоциировались с потерей функции, например, при CGL (см. выше). Однако недавние исследования показывают, что мутации, такие как N88S и S90L, по-видимому, имеют усиление токсической функции, что может привести к аутосомно-доминантным заболеваниям двигательных нейронов и дистальной наследственной двигательной невропатии , например, синдрому Сильвера и дистальной наследственной двигательной невропатии типа V. [22]
В связи с широким клиническим спектром этих мутаций было предложено называть заболевания двигательных нейронов, связанные с сейпином, сейпинопатиями. [23]
Симптомы могут различаться и включают: регресс развития двигательных и когнитивных навыков в первые годы жизни, приводящий к смерти ( энцефалопатия ), мышечная слабость и спастичность нижних конечностей ( спастическая параплегия типа XVII), слабость дистальных мышц верхних конечностей (дистальная наследственная моторная невропатия типа V), а также истощение мышц рук (в обоих случаях). Сложные формы сейпинопатий могут включать глухоту, слабоумие или умственную отсталость. [3]
Сейпин, полученный из ткани яичек, необходим для мужской фертильности, модулируя гомеостаз фосфолипидов яичек. Отсутствие сейпина в половых клетках приводит к полному мужскому бесплодию и тератозооспермии . Сперматиды , лишенные сейпина в половых клетках, морфологически ненормальны с большими эктопическими липидными каплями и собираются в дисфункциональные кластеры. Повышенные уровни фосфатидной кислоты , сопровождающиеся измененным соотношением полиненасыщенных к мононенасыщенным и насыщенным жирным кислотам, показывают нарушенный гомеостаз фосфолипидов во время спермиогенеза . [24]