stringtranslate.com

Снятие кровли с клеток

Наиболее распространенные процессы отделения клеток друг от друга. (слева) Сэндвич из двух клеток между двумя покровными стеклами. (справа) Боковой поток среды позволяет разрушить клетки.

Удаление клеточной оболочки представляет собой любой из различных методов изоляции и обнажения клеточной мембраны клеток . В отличие от более распространенных протоколов экстракции мембран , выполняемых с несколькими этапами центрифугирования (целью которого является отделение мембранной фракции от клеточного лизата ), при удалении клеточной оболочки целью является разрыв и сохранение участков плазматической мембраны для проведения экспериментов in situ с использованием (микроскопии и биомедицинской спектроскопии ).

История

Первое наблюдение за двухслойной клеточной мембраной было сделано в 1959 году [1] на срезе клетки с использованием электронного микроскопа. Но первая микрофотография внутренней стороны клетки датируется 1977 годом [2] М. В. Нермутом. Профессор Джон Хойзер внес значительный вклад в эту область, визуализируя детальную внутреннюю структуру мембраны и цитоскелета, связанного с ней, с помощью широкого использования электронного микроскопа.

Только после разработки атомно-силового микроскопа, работающего в жидкости, стало возможным получение изображений клеточных мембран в условиях, приближенных к физиологическим [3], и проверка их механических свойств. [4]

Методы

Смотрите также

Ссылки

  1. ^ Робертсон, Дж. Д. (1959). «Ультраструктура клеточных мембран и их производных». Biochem. Soc. Symp .
  2. ^ Нермут, М. В.; Уильямс, Линн Д. (1977). «Замораживание-разрушение монослоев (капиллярных слоев) клеток, мембран и вирусов: некоторые технические соображения». Журнал микроскопии . 110 (2): 121–132. doi :10.1111/j.1365-2818.1977.tb00023.x. ISSN  1365-2818. PMID  335072. S2CID  8682569.
  3. ^ Чо, Сан-Джун; Ан, Чонхун; Юн, Дэхван; Минаката, Шихо; Ёсимура, Азуми; Усукура, Дзиро (2012-10-01). «Использование техники снятия крыши для получения изображений внутриклеточного цитоскелета с помощью атомно-силового микроскопа в водных условиях». Журнал электронной микроскопии . 61 (5): 321–326. doi : 10.1093/jmicro/dfs055 . ISSN  0022-0744. PMID  22872282.
  4. ^ ab Galvanetto, Nicola (2018-12-01). «Открытие одиночных клеток: топология зондирования и наномеханика нативных мембран». Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Биомембраны . 1860 (12): 2532–2538. arXiv : 1810.01643 . doi : 10.1016/j.bbamem.2018.09.019. ISSN  0005-2736. PMID  30273580. S2CID  52897823.
  5. ^ Нермут, М. В.; Уильямс, Линн Д. (1977). «Замораживание-разрушение монослоев (капиллярных слоев) клеток, мембран и вирусов: некоторые технические соображения». Журнал микроскопии . 110 (2): 121–132. doi :10.1111/j.1365-2818.1977.tb00023.x. ISSN  1365-2818. PMID  335072. S2CID  8682569.
  6. ^ Хойзер, Джон (2000). «Производство „клеточных кортикальных слоев“ для световой и электронной микроскопии». Traffic . 1 (7): 545–552. doi : 10.1034/j.1600-0854.2000.010704.x . ISSN  1600-0854. PMID  11208142.
  7. ^ Усукура, Дзиро; Ито, Шуичи; Яги, Акира; Нарита, Акихиро; Усукура, Эйдзи (07.06.2016). «Метод снятия крыши для наблюдения за цитоскелетом непосредственно с молекулярным разрешением с использованием атомно-силовой микроскопии». Научные отчеты . 6 : 27472. дои : 10.1038/srep27472. ISSN  2045-2322. ПМЦ 4895337 . ПМИД  27273367.