stringtranslate.com

ТетТаг

Мышь TetTag, молекулярный механизм
Использование мыши TetTag для исследования памяти. Во время формирования страха доксициклин удаляется из пищи, чтобы обеспечить взаимодействие между tTA и системой маркировки LacZ. Более позднее восстановление памяти активирует другой ранний ген непосредственного действия (Zif). В этом примере два нейрона имеют красную и зеленую ядерную метку, что указывает на то, что эти нейроны были активны во время хранения в памяти (красный) и снова во время извлечения информации (зеленый). [1]

Мышь TetTag представляет собой битрансгенный мутант , используемый в нейробиологических исследованиях, который экспрессирует постоянный маркер (например, бета-галактозидазу ) под контролем непосредственного раннего гена fos . Этот штамм мышей позволяет стабильно маркировать активированные нейроны у мышей в течение определенного временного окна в несколько часов. [2] [3]

Описание

Два независимо созданных трансгенных штамма скрестили для получения штамма TetTag. В первой трансгенной конструкции белок-трансактиватор, контролируемый тетрациклином (tTA), и зеленый флуоресцентный белок с двухчасовым периодом полураспада (shEGFP) экспрессируются под руководством минимального промотора fos . Вторая трансгенная конструкция экспрессирует локализующийся в ядре ген бета-галактозидазы и трансактиватор, регулируемый тетрациклином (tTA), под контролем регуляторного элемента TetO , реагирующего на тетрациклин. [2]

Исследование памяти

Мышь TetTag позволяет исследователям помечать активированные нейроны во время эксперимента по обучению (например, обучение страху , [4] обучение водному лабиринту [5] ). Когда через несколько дней воспоминания восстанавливаются, остро активированные нейроны можно пометить с помощью иммуногистохимии против непосредственных ранних генов . Эти эксперименты проверяют, отвечают ли одни и те же нейроны за хранение и воспроизведение воспоминаний, что является ключевым вопросом для понимания клеточного механизма памяти. [ нужна цитата ]

Ограничения

Удаление доксициклина из рациона открывает возможности для маркировки в зависимости от активности, но для выведения препарата из мозга требуется несколько часов. Таким образом, окно маркировки не очень точное по времени. Кроме того, не совсем ясно, какие модели активности приводят к активации Fos в нейронах. [6]

Рекомендации

  1. ^ Реймерс, Леон; Мэйфорд, Марк (2009). «Генетический контроль активных нейронных цепей». Границы молекулярной нейронауки . 2:27 . doi : 10.3389/neuro.02.02.2009 . ПМК  2802553 . ПМИД  20057936.
  2. ^ Аб Реймерс, Леон Г.; Перкинс, Брайан Л.; Мацуо, Наоки; Мэйфорд, Марк (31 августа 2007 г.). «Локализация стабильного нейронного коррелята ассоциативной памяти». Наука . 317 (5842): 1230–1233. Бибкод : 2007Sci...317.1230R. дои : 10.1126/science.1143839. ISSN  1095-9203. PMID  17761885. S2CID  37837129.
  3. ^ Навабпур, Шагайег; Квапис, Джанин Л.; Джаром, Тимоти Дж. (1 января 2020 г.). «Руководство нейробиолога по трансгенным мышам и другим генетическим инструментам». Неврологические и биоповеденческие обзоры . 108 : 732–748. doi :10.1016/j.neubiorev.2019.12.013. ISSN  0149-7634. ПМК 8049509 . ПМИД  31843544. 
  4. ^ Лю, Сюй; Рамирес, Стив; Панг, Петти Т.; Пурье, Кори Б.; Говиндараджан, Арвинд; Дейсерот, Карл; Тонегава, Сусуму (2012). «Оптогенетическая стимуляция энграммы гиппокампа активирует вызов воспоминаний о страхе». Природа . 484 (7394): 381–385. Бибкод : 2012Natur.484..381L. дои : 10.1038/nature11028. ISSN  0028-0836. ПМК 3331914 . ПМИД  22441246. 
  5. ^ Ламот-Молина, Пол Дж.; Франзелин, Андреас; Бек, Леннарт; Ли, Донг; Ауксутат, Леа; Фиблингер, Тим; Лапрелл, Лаура; Альбек, Иоахим; Ну и дела, Кристин Э.; Кнессель, Матиас; Энгель, Андреас К.; Хильгетаг, Клаус К.; Мореллини, Фабио; Эртнер, Томас Г. (26 октября 2022 г.). «Накопление ΔFosB в гранулярных клетках гиппокампа приводит к разделению паттернов cFos во время пространственного обучения». Природные коммуникации . 13 (1): 6376. Бибкод : 2022NatCo..13.6376L. doi : 10.1038/s41467-022-33947-w. ISSN  2041-1723. ПМЦ 9606265 . ПМИД  36289226. 
  6. ^ Анисимова, Маргарита; Ламот-Молина, Пол Дж.; Франзелин, Андреас; Аберра, Аман С.; Хоппа, Майкл Б.; Ну и дела, Кристин Э.; Эртнер, Томас Г. (05 сентября 2023 г.). Нейрональный ФОС сообщает о синхронизированной активности пресинаптических нейронов (Отчет). БиоРxiv. дои : 10.1101/2023.09.04.556168.