Трипсинизация — это процесс диссоциации клеток с использованием трипсина , протеолитического фермента, который расщепляет белки, для отделения адгезивных клеток от сосуда, в котором они культивируются. При добавлении к клеточной культуре трипсин расщепляет белки, которые позволяют клеткам прилипать к сосуду. Трипсинизация часто используется для переноса клеток в новый сосуд. Когда процесс трипсинизации завершен, клетки будут находиться во взвешенном состоянии и выглядеть округлыми.
В экспериментальных целях клетки часто выращивают в контейнерах, которые имеют форму пластиковых колб или пластин. В таких колбах клетки снабжаются средой роста , содержащей необходимые питательные вещества для пролиферации, и клетки прилипают к контейнеру и друг к другу по мере роста.
Этот процесс культивирования клеток или тканей требует метода отделения клеток от контейнера и друг от друга. Трипсин, фермент , обычно встречающийся в пищеварительном тракте , может быть использован для «переваривания» белков , которые облегчают адгезию к контейнеру и между клетками.
После того, как клетки отделились от своего контейнера, необходимо дезактивировать трипсин, если только трипсин не синтетический, поскольку белки клеточной поверхности также будут со временем расщепляться, и это повлияет на функционирование клеток. [1] Для инактивации трипсина можно использовать сыворотку, так как она содержит ингибиторы протеазы. [2] Из-за присутствия этих ингибиторов сыворотку необходимо удалить перед обработкой сосуда для роста трипсином и не добавлять ее снова в сосуд для роста, пока клетки не отделятся от своей поверхности роста — это отсоединение можно подтвердить визуальным наблюдением с помощью микроскопа.
Трипсинизация часто используется для перемещения адгезивных клеток в новый контейнер, наблюдения в целях эксперимента или снижения степени слияния в культуральной колбе путем удаления определенного процента клеток.