TBE или Трис/Борат/ЭДТА — это буферный раствор, содержащий смесь основания Трис , борной кислоты и ЭДТА .
В молекулярной биологии буферы TBE и TAE часто используются в процедурах, связанных с нуклеиновыми кислотами , наиболее распространенным из которых является электрофорез . Растворы трис -кислот являются эффективными буферами для слабощелочных условий, которые поддерживают депротонированную и растворимую в воде ДНК. ЭДТА является хелатором двухвалентных катионов , в частности магния (Mg2 + ). Поскольку эти ионы являются необходимыми кофакторами для многих ферментов, включая загрязняющие нуклеазы , роль ЭДТА заключается в защите нуклеиновых кислот от ферментативной деградации. Но поскольку Mg2 + также является кофактором для многих полезных ферментов, модифицирующих ДНК, таких как рестрикционные ферменты и ДНК-полимеразы , его концентрация в буферах TBE или TAE обычно поддерживается на низком уровне (обычно около 1 мМ ).
Недавно были обнаружены заменители буферов TBE и TAE для электрофореза. [1]
Отрегулируйте pH до 8,3 с помощью HCl. [2]
TBE можно разбавить до 1X перед использованием в электрофорезе, 0,5x также приемлемо. Более высокие концентрации приведут к плохим результатам из-за чрезмерного выделения тепла.