Первая сеяная Маргарет Смит была пятикратной действующей чемпионкой и успешно защитила свой титул, победив Марию Буэно со счетом 5–7, 6–4, 5–2 в финале и завоевав титул чемпионки по теннису в женском одиночном разряде на чемпионате Австралии 1965 года .
Ниже перечислены сеяные игроки. Маргарет Смит — чемпионка; остальные показывают раунд, в котором они выбыли.
.svg/1280px-Flag_of_Australia_(converted).svg.png){kind=small}
Маргарет Смит ( чемпионка )
Мария Буэно (финалистка) Лесли Тернер (третий раунд)
Билли Джин Моффитт (полуфинал) Джуди Тегарт (четвертьфинал) Кэрол Гребнер (четвертьфинал) Робин Эбберн (четвертьфинал)
Энн Джонс (второй раунд) Мадонна Шахт (второй тур) Гейл Шериф (второй раунд) Джилл Блэкман (третий раунд) Хелен Гурли (третий раунд)
Норма Бэйлон (третий раунд) Дейдре Келлер (второй тур).svg/1280px-Flag_of_South_Africa_(1928-1982).svg.png){kind=small}
Аннет Ван Зил (полуфинал) Кристин Трумэн (третий раунд)