Фруктозо-бисфосфат-альдолаза ( EC 4.1.2.13), часто просто альдолаза , является ферментом, катализирующим обратимую реакцию , которая расщепляет альдоль , фруктозо-1,6-бисфосфат , на триозофосфаты дигидроксиацетонфосфат (DHAP) и глицеральдегид-3-фосфат (G3P). Альдолаза также может производить DHAP из других (3S,4R) -кетозо -1-фосфатов, таких как фруктозо-1-фосфат и седогептулозо-1,7-бисфосфат . Глюконеогенез и цикл Кальвина , которые являются анаболическими путями , используют обратную реакцию. Гликолиз , катаболический путь , использует прямую реакцию. Альдолаза делится на два класса по механизму.
Слово альдолаза также относится, в более общем смысле, к ферменту, который выполняет альдольную реакцию (создание альдоля ) или ее обратную (расщепление альдоля), например, альдолаза сиаловой кислоты , которая образует сиаловую кислоту . См. список альдолаз .
Белки класса I образуют протонированное промежуточное основание Шиффа , связывающее высококонсервативный лизин активного центра с карбонильным углеродом DHAP . Кроме того, остатки тирозина имеют решающее значение для этого механизма, выступая в качестве стабилизирующих акцепторов водорода. Белки класса II используют другой механизм, который поляризует карбонильную группу с помощью двухвалентного катиона , такого как Zn 2+ . Белок оперона галактитола Escherichia coli , gatY, и белок оперона N-ацетилгалактозамина , agaY, которые являются тагатозо-бисфосфатальдолазой , являются гомологами фруктозо-бисфосфатальдолазы класса II. Было показано, что два остатка гистидина в первой половине последовательности этих гомологов участвуют в связывании цинка. [1]
Белковые субъединицы обоих классов имеют домен α/β, свернутый в бочку TIM, содержащую активный сайт. Несколько субъединиц собираются в полный белок . Два класса имеют небольшую идентичность последовательностей .
За немногими исключениями, только белки класса I были обнаружены у животных , растений и зеленых водорослей . [2] За немногими исключениями, только белки класса II были обнаружены у грибов . Оба класса были широко обнаружены у других эукариот и у бактерий . [3] Оба класса часто присутствуют вместе в одном организме. Растения и водоросли имеют пластидную альдолазу, иногда реликт эндосимбиоза , в дополнение к обычной цитозольной альдолазе. Бифункциональная фруктозо-бисфосфатальдолаза/фосфатаза с механизмом класса I была широко обнаружена у архей и некоторых бактерий. [4] Активный центр этой архейной альдолазы также находится в стволе TIM.
Глюконеогенез и гликолиз разделяют серию из шести обратимых реакций. В глюконеогенезе глицеральдегид-3-фосфат восстанавливается до фруктозо-1,6-бисфосфата с помощью альдолазы. В гликолизе фруктозо-1,6-бисфосфат превращается в глицеральдегид-3-фосфат и дигидроксиацетонфосфат с помощью альдолазы. Альдолаза, используемая в глюконеогенезе и гликолизе, является цитоплазматическим белком.
У позвоночных обнаружено три формы белка класса I. Альдолаза A преимущественно экспрессируется в мышцах и мозге; альдолаза B в печени, почках и энтероцитах ; и альдолаза C в мозге. Альдолазы A и C в основном участвуют в гликолизе , тогда как альдолаза B участвует как в гликолизе, так и в глюконеогенезе. [5] Некоторые дефекты альдолазы B вызывают наследственную непереносимость фруктозы . Метаболизм свободной фруктозы в печени использует способность альдолазы B использовать фруктозо-1-фосфат в качестве субстрата . [6] Архейная фруктозо-бисфосфатальдолаза/фосфатаза предположительно участвует в глюконеогенезе, поскольку ее продуктом является фруктозо-6-фосфат. [7]
Цикл Кальвина — это путь фиксации углерода ; он является частью фотосинтеза, который преобразует углекислый газ и другие соединения в глюкозу. Он и глюконеогенез разделяют серию из четырех обратимых реакций. В обоих путях 3-фосфоглицерат (3-PGA или 3-PG) восстанавливается до фруктозо-1,6-бисфосфата с альдолазой, катализирующей последнюю реакцию. Пятая реакция, катализируемая в обоих путях фруктозо-1,6-бисфосфатазой , гидролизует фруктозо-1,6-бисфосфат до фруктозо-6-фосфата и неорганического фосфата. Значительное снижение свободной энергии делает эту реакцию необратимой. В цикле Кальвина альдолаза также катализирует образование седогептулозо-1,7-бисфосфата из DHAP и эритрозо-4-фосфата . Главными продуктами цикла Кальвина являются триозофосфат (TP), представляющий собой смесь DHAP и G3P, и фруктозо-6-фосфат. Оба они также необходимы для регенерации RuBP . Альдолаза, используемая растениями и водорослями в цикле Кальвина, обычно представляет собой пластидно-ориентированный белок, кодируемый ядерным геном.
Альдолаза катализирует
а также
Альдолаза используется в обратимом пути глюконеогенеза/гликолиза.
Альдолаза также используется в части цикла Кальвина, общей с глюконеогенезом, с необратимым гидролизом фосфата в конце, катализируемым фруктозо-1,6-бисфосфатазой.
В глюконеогенезе 3-ПГ образуется под действием енолазы и фосфоглицератмутазы, действующих последовательно.
В цикле Кальвина 3-PG производится RuBisCO
G3P вырабатывается фосфоглицераткиназой, действующей последовательно с глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназой (GAPDH) в глюконеогенезе и последовательно с глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназой (NADP+) (фосфорилирование) в цикле Кальвина.
Триозофосфатизомераза поддерживает DHAP и G3P в состоянии, близком к равновесию, образуя смесь, называемую триозофосфатом (TP).
Таким образом, как DHAP, так и G3P доступны для альдолазы.
Альдолаза также была вовлечена во многие «подрабатывающие» или некаталитические функции, основанные на ее связывающей аффинности ко многим другим белкам, включая F-актин , α-тубулин , легкую цепь динеина , WASP , анионообменник Band 3 , фосфолипазу D ( PLD2 ), транспортер глюкозы GLUT4 , инозитолтрифосфат , V-АТФазу и ARNO ( фактор обмена гуаниновых нуклеотидов ARF6 ). Считается, что эти ассоциации в основном вовлечены в клеточную структуру, однако, были исследованы участие в эндоцитозе, инвазии паразитов, перестройке цитоскелета, подвижности клеток, транспортировке и рециркуляции мембранных белков, передаче сигнала и тканевой компартментализации. [8] [9] [10]