Аннексин — общее название группы клеточных белков . Они в основном встречаются в эукариотических организмах (животных, растениях и грибах).
У людей аннексины находятся внутри клетки . Однако некоторые аннексины (аннексин А1, аннексин А2 и аннексин А5) могут секретироваться из цитоплазмы во внеклеточную среду, например, в кровь.
Аннексин также известен как липокортин . [1] Липокортины подавляют фосфолипазу А2 . [2] Повышенная экспрессия гена, кодирующего аннексин-1, является одним из механизмов, посредством которых глюкокортикоиды (такие как кортизол ) подавляют воспаление .
Семейство белков аннексинов продолжало расти с тех пор, как в 1977 году впервые было сообщено об их связи с внутриклеточными мембранами. [3] Признание того, что эти белки являются членами большого семейства, впервые пришло из сравнения последовательностей белков и их перекрестной реактивности с антителами. [4] Один из этих исследователей (Гейзов) вскоре после этого придумал название Аннексины . [5]
По состоянию на 2002 год было идентифицировано 160 белков аннексина у 65 различных видов. [6] Критерии, которым должен соответствовать белок, чтобы его можно было классифицировать как аннексин, следующие: он должен быть способен связывать отрицательно заряженные фосфолипиды в зависимости от кальция и должен содержать последовательность из 70 аминокислот, называемую повтором аннексина. Несколько белков состоят из аннексина с другими доменами, такими как гельсолин. [7]
Базовая структура аннексина состоит из двух основных доменов. Первый расположен на конце COOH и называется областью «ядра». Второй расположен на конце NH2 и называется областью «головы». [6] Область ядра состоит из альфа-спирального диска. Выпуклая сторона этого диска имеет сайты связывания кальция типа 2. Они важны для обеспечения взаимодействия с фосфолипидами на плазматической мембране . [8] N-концевая область расположена на вогнутой стороне области ядра и важна для предоставления сайта связывания для цитоплазматических белков. В некоторых аннексинах она может стать фосфорилированной и может вызвать изменения сродства к кальцию в области ядра или изменить взаимодействие цитоплазматических белков.
Аннексины играют важную роль в различных клеточных и физиологических процессах, таких как обеспечение мембранного каркаса, что имеет отношение к изменениям формы клетки. Также было показано, что аннексины участвуют в транспортировке и организации везикул , экзоцитозе , эндоцитозе , а также в образовании кальциевых ионных каналов . [9] Аннексины также были обнаружены вне клетки во внеклеточном пространстве и были связаны с фибринолизом , коагуляцией , воспалением и апоптозом . [10]
Первое исследование по идентификации аннексинов было опубликовано Крейтцем и др. (1978). [11] Эти авторы использовали надпочечники быка и идентифицировали кальций-зависимый белок, который отвечал за агрегацию гранул друг с другом и плазматической мембраной. Этот белок получил название синексин, которое происходит от греческого слова «synexis», означающего «встреча».
Несколько подсемейств аннексинов были идентифицированы на основе структурных и функциональных различий. Однако все аннексины имеют общую организационную тему, которая включает в себя две различные области, ядро аннексина и амино (N)-конец. [9] Ядро аннексина высоко консервативно во всем семействе аннексинов, а N-конец сильно варьируется. [6] Изменчивость N-конца является физической конструкцией для вариаций между подсемействами аннексинов.
Ядро аннексина из 310 аминокислот имеет четыре повтора аннексина, каждый из которых состоит из 5 альфа-спиралей. [9] Исключением является аннексин A-VI, который имеет два домена ядра аннексина, соединенных гибким линкером. [9] A-VI был получен путем дупликации и слияния генов AV и AX и поэтому не будет обсуждаться подробно. Четыре повтора аннексина производят изогнутый белок и допускают функциональные различия на основе структуры кривой. [6] Вогнутая сторона ядра аннексина взаимодействует с N-концом и цитозольными вторичными мессенджерами , в то время как выпуклая сторона аннексина содержит сайты связывания кальция. [12] Каждое ядро аннексина содержит один тип II, также известный как тип аннексина, сайт связывания кальция; эти сайты связывания являются типичным местом ионных мембранных взаимодействий. [6] Однако возможны и другие методы мембранных соединений. Например, AV выставляет остаток триптофана при связывании кальция, который может взаимодействовать с углеводородными цепями липидного бислоя . [12]
Разнообразная структура N-конца придает специфичность внутриклеточной сигнализации аннексина. Во всех аннексинах N-конец, как полагают, находится внутри вогнутой стороны ядра аннексина и сворачивается отдельно от остальной части белка. [6] Структуру этой области можно разделить на две большие категории: короткие и длинные N-концы. Короткий N-конец, как показано в A-III, может состоять из 16 или менее аминокислот и перемещается вдоль вогнутого ядра белка, взаимодействуя посредством водородных связей . [9] Считается, что короткие N-концы стабилизируют комплекс аннексина, чтобы увеличить связывание кальция, и могут быть участками для посттрансляционных модификаций. [9] Длинные N-концы могут содержать до 40 остатков и играть более сложную роль в сигнализации аннексина. [6] Например, в AI N-конец сворачивается в амфипатическую альфа-спираль и вставляется в ядро белка, вытесняя спираль D повтора аннексина III. [6] Однако, когда кальций связывается, N-конец выталкивается из ядра аннексина из-за конформационных изменений внутри белка. [9] Таким образом, N-конец может взаимодействовать с другими белками, в частности, с семейством белков S-100 , и включает участки фосфорилирования , которые обеспечивают дальнейшую передачу сигналов. [9] A-II также может использовать свой длинный N-конец для образования гетеротримера между белком S100 и двумя периферическими аннексинами. [9] Структурное разнообразие аннексинов является основой функционального диапазона этих сложных внутриклеточных мессенджеров.
Аннексины характеризуются своей кальций-зависимой способностью связываться с отрицательно заряженными фосфолипидами (т.е. стенками мембран). [13] Они расположены на некоторых, но не на всех мембранных поверхностях внутри клетки, что может быть свидетельством гетерогенного распределения Ca 2+ внутри клетки. [9]
Виды аннексина (II, V, XI) были обнаружены внутри мембран. [9] Было показано, что активность тирозинкиназы увеличивает концентрацию аннексинов II, V внутри ядра. [9] Аннексин XI преимущественно находится внутри ядра и отсутствует в ядрышках. [14] Во время профазы аннексин XI будет перемещаться в ядерную оболочку. [14]
Аннексины в изобилии присутствуют в везикулах матрикса кости и, как предполагается, играют роль во входе Ca 2+ в везикулы во время образования гидроксиапатита . [15] Эта тема не была тщательно изучена, однако предполагалось, что аннексины могут участвовать в закрытии шейки матриксной везикулы, когда она эндоцитируется. [9]
Было обнаружено, что аннексины играют роль в экзоцитозном пути, особенно на поздних стадиях, вблизи или на плазматической мембране. [13] Доказательства того, что аннексины или аннексиноподобные белки участвуют в экзоцитозе, были обнаружены у низших организмов, таких как Paramecium . [13] Благодаря распознаванию антителами, есть доказательства того, что аннексиноподобные белки участвуют в позиционировании и прикреплении секреторных органелл в организме Paramecium . [13]
Аннексин VII был первым аннексином, который был обнаружен при поиске белков, способствующих контакту и слиянию хромаффинных гранул . [9] Однако исследования in vitro показали, что аннексин VII не способствует слиянию мембран, а только их тесному прикреплению друг к другу. [11]
Было обнаружено, что аннексины участвуют в транспортировке, а также в сортировке эндоцитозных событий. Аннексин один является субстратом тирозинкиназы EGF ( эпидермального фактора роста ) , которая фосфорилируется на своем N-конце, когда рецептор интернализуется. [13] Уникальные последовательности нацеливания эндосом были обнаружены на N-конце аннексинов I и II, что может быть полезно при сортировке эндоцитозных везикул. [9] Аннексин присутствует в нескольких различных эндоцитозных процессах. Считается, что аннексин VI участвует в событиях почкования, покрытых клатрином , в то время как аннексин II участвует как в интернализации эфира холестерина , так и в биогенезе многовезикулярных эндосом. [9]
Аннексины могут функционировать как белки-подложки для закрепления других белков на клеточной мембране. Аннексины собираются в тримеры, [8] где этому образованию тримера способствует приток кальция и эффективное связывание с мембраной. Эта сборка тримера часто стабилизируется другими связанными с мембраной ядрами аннексина поблизости. В конце концов, достаточное количество тримеров аннексина соберется и свяжется с клеточной мембраной. Это вызовет образование связанных с мембраной сетей аннексина. Эти сети могут вызывать вдавливание и почкование везикул во время события экзоцитоза. [16]
В то время как различные типы аннексинов могут функционировать как мембранные каркасы, аннексин AV является наиболее распространенным мембранно-связанным аннексиновым каркасом. Аннексин AV может образовывать двумерные сети при связывании с фосфатидилсериновой единицей мембраны. [17] Аннексин AV эффективен в стабилизации изменений формы клеток во время эндоцитоза и экзоцитоза, а также других процессов клеточной мембраны. Альтернативно, аннексины AI и A-II связывают фосфатидилсериновые и фосфатидилхолиновые единицы в клеточной мембране и часто образуют однослойные кластеры, не имеющие определенной формы. [18]
Кроме того, было показано, что аннексины AI и A-II связывают PIP2 (фосфатидилинозитол-4,5-бисфосфат) в клеточной мембране и облегчают сборку актина вблизи мембраны. [9] Совсем недавно функции каркаса аннексина были связаны с медицинским применением. Эти медицинские последствия были обнаружены в исследованиях in vivo, где путь оплодотворенной яйцеклетки отслеживался до матки. После оплодотворения яйцеклетка должна войти в канал, отверстие которого в пять раз меньше диаметра яйца. Как только оплодотворенная яйцеклетка прошла через отверстие, считается, что аннексины способствуют складыванию мембраны в виде гармошки, чтобы вернуть растянутую мембрану в ее первоначальную форму. Хотя это было обнаружено в аннексине нематоды NEX-1, считается, что аналогичный механизм имеет место у людей и других млекопитающих. [19]
Было показано, что несколько аннексинов играют активную роль в организации мембраны. Аннексин A-II был широко изучен в этом аспекте функции аннексина и, как отмечено, активно участвует в организации липидов в бислое вблизи участков сборки актинового цитоскелета . Аннексин A-II может связывать PIP2 в клеточной мембране in vivo с относительно высокой аффинностью связывания. [20]
Кроме того, Аннексин A-II может связывать другие мембранные липиды, такие как холестерин , где это связывание становится возможным благодаря притоку ионов кальция. [21] Связывание Аннексина A-II с липидами в бислое организует организацию липидных рафтов в бислое в местах сборки актина . Фактически, Аннексин A-II сам по себе является актин-связывающим белком, и поэтому он может образовывать область взаимодействия с актином посредством своих нитевидных свойств актина. В свою очередь, это обеспечивает дальнейшие взаимодействия между клетками между монослоями клеток, таких как эпителиальные и эндотелиальные клетки . [22] В дополнение к Аннексину A-II, также было показано, что Аннексин A-XI организует свойства клеточной мембраны. Считается, что Аннексин A-XI принимает активное участие в последней стадии митоза : цитокинезе . Именно на этой стадии дочерние клетки отделяются друг от друга, потому что Аннексин A-XI вставляет новую мембрану, которая, как полагают, необходима для отделения. Без аннексина A-XI считается, что дочерние клетки не полностью разделяются и могут подвергаться апоптозу . [23]
Аннексин AI, по-видимому, является одним из наиболее активно участвующих аннексинов в противовоспалительных реакциях. При инфекции или повреждении тканей аннексин AI, как полагают, уменьшает воспаление тканей, взаимодействуя с рецепторами аннексина AI на лейкоцитах . В свою очередь, активация этих рецепторов функционирует, чтобы направить лейкоциты к месту инфекции и нацелить их непосредственно на источник воспаления. [24] В результате это ингибирует экстравазацию лейкоцитов (в частности, нейтрофилов ) и снижает регуляцию величины воспалительной реакции. Без аннексина AI в качестве посредника этой реакции экстравазация нейтрофилов является высокоактивной и ухудшает воспалительную реакцию в поврежденных или инфицированных тканях. [25]
Аннексин AI также участвует в апоптотических механизмах в клетке. При экспрессии на поверхности нейтрофилов аннексин AI стимулирует проапоптотические механизмы. С другой стороны, при экспрессии на поверхности клетки аннексин AI способствует удалению клеток, подвергшихся апоптозу. [26] [27]
Более того, аннексин AI имеет дополнительные медицинские применения в лечении рака . Аннексин AI может быть использован в качестве белка клеточной поверхности для маркировки некоторых форм опухолей , на которые могут быть направлены различные виды иммунотерапии с использованием антител против аннексина AI. [28]
Аннексин AV является основным игроком, когда речь заходит о механизмах коагуляции . Как и другие типы аннексинов, аннексин AV также может быть выражен на поверхности клетки и может функционировать для формирования 2-мерных кристаллов для защиты липидов клеточной мембраны от участия в механизмах коагуляции. [9] С медицинской точки зрения, фосфолипиды часто могут быть задействованы в аутоиммунных реакциях, чаще всего наблюдаемых в случаях потери плода во время беременности. В таких случаях антитела против аннексина AV разрушают его 2-мерную кристаллическую структуру и раскрывают фосфолипиды в мембране, делая их доступными для участия в различных механизмах коагуляции. [29]
Хотя несколько аннексинов могут быть вовлечены в механизмы фибринолиза , аннексин A-II является наиболее заметным в опосредовании этих реакций. Считается, что экспрессия аннексина A-II на поверхности клетки служит рецептором для плазминогена , который функционирует для производства плазмина . Плазмин инициирует фибринолиз, разрушая фибрин . Разрушение фибрина является естественной профилактической мерой, поскольку оно предотвращает образование тромбов фибриновыми сетями. [30]
Аннексин А-II имеет медицинское значение, поскольку его можно использовать при лечении различных сердечно-сосудистых заболеваний , которые развиваются за счет свертывания крови через фибриновые сети.
ANXA1 ; ANXA10; ANXA11 ; ANXA13 ; ANXA2 ; ANXA3 ; ANXA4 ; ANXA5 ; ANXA6 ; ANXA7 ; ANXA8; ANXA8L1; ANXA8L2 ; ANXA9 ;