У бактерий и архей есть один ITS, расположенный между генами рРНК 16S и 23S . Напротив, у эукариот есть два ITS : ITS1 расположен между генами рРНК 18S и 5.8S , а ITS2 — между генами рРНК 5.8S и 28S (у опистоконтов или 25S у растений). ITS1 соответствует ITS у бактерий и архей, а ITS2 возник как вставка, которая прервала предковый ген рРНК 23S. [1] [2]
Организация
У бактерий и архей ITS встречается в одной или нескольких копиях, как и фланкирующие гены 16S и 23S . Когда есть несколько копий, они не встречаются рядом друг с другом. Скорее, они встречаются в отдельных местах в кольцевой хромосоме. У бактерий не редкость переносить гены тРНК в ITS. [3] [4]
У эукариот гены, кодирующие рибосомальную РНК и спейсеры, встречаются в тандемных повторах , длина которых составляет тысячи копий, каждая из которых разделена областями нетранскрибируемой ДНК, называемыми межгенным спейсером (IGS) или нетранскрибируемым спейсером (NTS).
В процессе созревания рРНК, части ETS и ITS вырезаются. Как нефункциональные побочные продукты этого созревания, они быстро деградируют. [6]
Использование в филогенетическом выводе
Сравнение последовательностей эукариотических ITS-регионов широко используется в таксономии и молекулярной филогении из-за нескольких благоприятных свойств: [7]
Он обычно амплифицируется благодаря своему небольшому размеру, связанному с наличием высококонсервативных фланкирующих последовательностей.
Его легко обнаружить даже в небольших количествах ДНК из-за большого числа копий кластеров рРНК.
Он претерпевает быструю согласованную эволюцию посредством неравного кроссинговера и генной конверсии. Это способствует внутригеномной однородности повторяющихся единиц, хотя высокопроизводительное секвенирование показало наличие частых вариаций внутри видов растений. [8]
Он имеет высокую степень вариации даже между близкородственными видами. Это можно объяснить относительно низким эволюционным давлением, действующим на такие некодирующие спейсерные последовательности.
Например, маркеры ITS оказались особенно полезными для выяснения филогенетических связей среди следующих таксонов.
Известно, что ITS2 более консервативен, чем ITS1. Все последовательности ITS2 имеют общее ядро вторичной структуры, [26] тогда как структуры ITS1 сохраняются только в гораздо меньших таксономических единицах. Независимо от области сохранения, сравнение с помощью структуры может обеспечить более высокое разрешение и надежность. [27]
Микологическое штрихкодирование
Регион ITS является наиболее широко секвенированным регионом ДНК в молекулярной экологии грибов [28] и был рекомендован в качестве универсальной последовательности грибкового штрихкода . [29] Обычно он был наиболее полезен для молекулярной систематики на уровне вида и рода, и даже внутри вида (например, для идентификации географических рас). Из-за его более высокой степени вариации, чем другие генные регионы рДНК (например, малая и большая субъединица рРНК), вариации среди отдельных повторов рДНК иногда можно наблюдать как в регионах ITS, так и в регионах IGS. В дополнение к универсальным праймерам ITS1+ITS4 [30] [31], используемым многими лабораториями, было описано несколько таксон-специфичных праймеров, которые позволяют селективно амплифицировать грибковые последовательности (например, см. статью Gardes & Bruns 1993 года, описывающую амплификацию последовательностей ITS базидиомицетов из образцов микоризы ). [32] Несмотря на то, что методы дробового секвенирования все чаще используются в микробном секвенировании, низкая биомасса грибов в клинических образцах делает амплификацию ITS-региона областью текущих исследований. [33] [34]
Ссылки
^ Лафонтен, DLJ; Толлерви, Д. (2001). «Функция и синтез рибосом». Nature Reviews Molecular Cell Biology . 2 (7): 514–520. doi : 10.1038/35080045. hdl : 1842/729 . PMID 11433365. S2CID 2637106.
^ Скотт Орланд Роджерс (27 июля 2011 г.). Интегрированная молекулярная эволюция. CRC Press. стр. 65–66. ISBN978-1-4398-1995-1. Получено 9 марта 2015 г.
^ Такада, Хираку; Симада, Томохиро; Дей, Дебашиш; Куйюм, М. Зухаиб; Накано, Масахиро; Исигуро, Акира; Ёсида, Хидеджи; Ямамото, Канеоши; Сен, Ранджан; Исихама, Акира (22 декабря 2016 г.). «Дифференциальная регуляция транскрипции рРНК и тРНК из составного оперона рРНК-тРНК в Escherichia coli». ПЛОС ОДИН . 11 (12): e0163057. Бибкод : 2016PLoSO..1163057T. дои : 10.1371/journal.pone.0163057 . ПМК 5179076 . ПМИД 28005933.
^ Стюарт, Фрэнк Дж.; Кавано, Колин М. (июль 2007 г.). «Внутригеномная изменчивость и эволюция внутреннего транскрибируемого спейсера оперона рРНК у бактерий». Журнал молекулярной эволюции . 65 (1): 44–67. Bibcode : 2007JMolE..65...44S. CiteSeerX 10.1.1.456.2659 . doi : 10.1007/s00239-006-0235-3. PMID 17568983. S2CID 13536182.
^ ab Бена, Жиль; Жюбье, Мари-Франс; Оливьери, Изабель; Лежен, Бернар (1998). «Внешние и внутренние транскрибируемые спейсеры рибосом: комбинированное использование в филогенетическом анализе Medicago (Leguminosae)». Журнал молекулярной эволюции . 46 (3): 299–306. Bibcode : 1998JMolE..46..299B. doi : 10.1007/PL00006306. ISSN 0022-2844. PMID 9502673. S2CID 38838013.
^ Мишо, Бернар; Башеллери, Жан-Пьер; Рейналь, Франсуаза (1983-05-25). «Структура предшественников рРНК мыши. Полная последовательность и потенциальное сворачивание областей спейсера между 18S и 28S рРНК». Nucleic Acids Research . 11 (10): 3375–3391. doi :10.1093/nar/11.10.3375. ISSN 0305-1048. PMC 325970. PMID 6304630 .
^ Болдуин, Брюс Г.; Сандерсон, Майкл Дж.; Портер, Дж. Марк; Войцеховски, Мартин Ф.; Кэмпбелл, Кристофер С.; Донохью, Майкл Дж. (1995-01-01). «ITS-регион ядерной рибосомальной ДНК: ценный источник доказательств филогении покрытосеменных». Annals of the Missouri Botanical Garden . 82 (2): 247–277. doi :10.2307/2399880. JSTOR 2399880.
^ Болдуин, Б. Г. (1992). «Филогенетическая полезность внутренних транскрибируемых спейсеров ядерной рибосомальной ДНК у растений: пример из Compositae». Молекулярная филогенетика и эволюция . 1 (1): 3–16. doi :10.1016/1055-7903(92)90030-K. PMID 1342921.
^ Никрент, Дэниел Л.; Шютте, Кевин П.; Старр, Эллен М. (1994-01-01). «Молекулярная филогения Arceuthobium (Viscaceae) на основе последовательностей внутренних транскрибированных спейсеров ядерной рибосомной ДНК». Американский журнал ботаники . 81 (9): 1149–1160. doi :10.2307/2445477. JSTOR 2445477.
^ Баклер, ES; Холтсфорд, TP (1996-04-01). " Систематика Zea : доказательства рибосомального ITS". Молекулярная биология и эволюция . 13 (4): 612–622. doi :10.1093/oxfordjournals.molbev.a025621. ISSN 0737-4038. PMID 8882504.
^ Douzery, Emmanuel JP; Pridgeon, Alec M.; Kores, Paul; Linder, HP; Kurzweil, Hubert; Chase, Mark W. (1999-06-01). «Молекулярная филогенетика Diseae (Orchidaceae): вклад ядерных рибосомальных последовательностей ITS». American Journal of Botany . 86 (6): 887–899. doi :10.2307/2656709. ISSN 0002-9122. JSTOR 2656709. PMID 10371730.(требуется подписка)
^ Weekers, Peter HH; De Jonckheere, Johan F.; Dumont, Henri J. (2001-07-01). «Филогенетические связи, выведенные из последовательностей рибосомного ITS и биогеографических закономерностей у представителей рода Calopteryx (Insecta: Odonata) Западного Средиземноморья и прилегающей западноевропейской зоны». Молекулярная филогенетика и эволюция . 20 (1): 89–99. doi :10.1006/mpev.2001.0947. PMID 11421650.
^ Chen, YC, JD Eisner, MM Kattar, SL Rassoulian-Barrett, K. Lafe, AP Limaye и BT Cookson (2001). «Последовательности ДНК полиморфного внутреннего транскрибируемого спейсерного региона 1 идентифицируют важные с медицинской точки зрения дрожжи». J. Clin. Microbiol . 39 (11): 4042–4051. doi :10.1128/JCM.39.11.4042-4051.2001. PMC 88485. PMID 11682528 .{{cite journal}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
^ Hodkinson, Trevor R.; Chase, Mark W.; Lledó, Dolores M.; Salamin, Nicolas; Renvoize, Stephen A. (2002). «Филогенетика Miscanthus , Saccharum и родственных родов (Saccharinae, Andropogoneae, Poaceae) на основе последовательностей ДНК из ITS ядерной рибосомальной ДНК и пластидных trnL интрона и trnL-F межгенных спейсеров». Journal of Plant Research . 115 (5): 381–392. Bibcode : 2002JPlR..115..381H. doi : 10.1007/s10265-002-0049-3. ISSN 0918-9440. PMID 12579363. S2CID 22971617.
^ Ронстед, Нина; Чейз, Марк В.; Альбах, Дирк К.; Белло, Мария Анджелика (2002-08-01). «Филогенетические отношения внутри Plantago (Plantaginaceae): доказательства из ядерных рибосомальных ITS и данных последовательности пластидного trnL-F». Ботанический журнал Линнеевского общества . 139 (4): 323–338. doi : 10.1046/j.1095-8339.2002.00070.x . ISSN 1095-8339.
^ Feldberg, K.; Groth, H.; Wilson, R.; Schäfer-Verwimp, A.; Heinrichs, J. (2004-11-04). "Криптическое видообразование у Herbertus (Herbertaceae, Jungermanniopsida): диапазон и морфология Herbertus sendtneri, выведенные из последовательностей nrITS". Plant Systematics and Evolution . 249 (3–4): 247–261. Bibcode : 2004PSyEv.249..247F. doi : 10.1007/s00606-004-0221-4. ISSN 0378-2697. S2CID 21538862.
^ Havill, Nathan P. ; Campbell, Christopher S.; Vining, Thomas F.; LePage, Ben; Bayer, Randall J.; Donoghue, Michael J. (2008-07-01). "Филогения и биогеография Tsuga (Pinaceae) выведены из данных о ядерной рибосомальной ITS и последовательности ДНК хлоропласта". Systematic Botany . 33 (3): 478–489. doi :10.1600/036364408785679770. S2CID 26668467.
^ Ruhl, Michael W.; Wolf, Matthias; Jenkins, Tracie M. (2010). «Компенсаторные изменения оснований освещают морфологически сложную таксономию». Молекулярная филогенетика и эволюция . 54 (2): 664–669. doi :10.1016/j.ympev.2009.07.036. PMID 19660561.
^ Стат, Майкл; Почон, Ксавье (2008-07-02). «Специфичность сообществ Symbiodinium в кораллах с атолла Джонстон» (PDF) . Серия «Прогресс морской экологии» . 386 : 83–96. doi : 10.3354/meps08080 .
^ Уорик, Сюзанна И.; Мумменхофф, Клаус; Саудер, Конни А.; Кох, Маркус А.; Аль-Шехбаз, Ихсан А. (2010-04-13). «Закрытие пробелов: филогенетические отношения в семействе капустных на основе данных о последовательности ДНК ядерного рибосомального региона ITS». Систематика и эволюция растений . 285 (3–4): 209–232. Bibcode : 2010PSyEv.285..209W. doi : 10.1007/s00606-010-0271-8. ISSN 0378-2697. S2CID 28199415.
^ Пири, Майкл Д.; Оливер, EGH; Беллстедт, Дирк У. (2011-11-01). «Плотно отобранная филогения ITS флагманского рода Капской низменности Erica L. предполагает многочисленные сдвиги в макроморфологии цветков». Молекулярная филогенетика и эволюция . 61 (2): 593–601. doi :10.1016/j.ympev.2011.06.007. PMID 21722743.
^ Boykin, LM; Schutze, MK; Krosch, MN; Chomič, A.; Chapman, TA; Englezou, A.; Armstrong, KF; Clarke, AR; Hailstones, D. (2014-05-01). "Мультигенный филогенетический анализ представителей юго-восточноазиатских вредителей комплекса видов Bactrocera dorsalis (Diptera: Tephritidae) не поддерживает текущую таксономию". Journal of Applied Entomology . 138 (4): 235–253. doi :10.1111/jen.12047. ISSN 1439-0418. S2CID 82003038.
^ Scheunert, Agnes; Heubl, Günther (2014-01-01). «Диверсификация Scrophularia (Scrophulariaceae) в Западном Средиземноморье и Макаронезии – филогенетические связи, ретикулярная эволюция и биогеографические закономерности». Молекулярная филогенетика и эволюция . 70 : 296–313. doi :10.1016/j.ympev.2013.09.023. PMID 24096055.
^ Ян, Тао; Чжан, Тянь-лэй; Го, Ю-хао; Лю, Син (17.11.2016). «Идентификация гибридов в Potamogeton: несоответствие между пластидными и ITS-областями, решенное с помощью нового штрихкодирующего маркера PHYB». PLOS ONE . 11 (11): e0166177. Bibcode : 2016PLoSO..1166177Y. doi : 10.1371/journal.pone.0166177 . ISSN 1932-6203. PMC 5113904. PMID 27855191 .
^ Шульц, Дж.; Майзель, С.; Герлах, Д.; Мюллер, Т.; Вольф, М. (апрель 2005 г.). «Общее ядро вторичной структуры внутреннего транскрибируемого спейсера 2 (ITS2) у всех эукариот». РНК . 11 (4): 361–4. doi :10.1261/rna.7204505. PMC 1370725. PMID 15769870 .
^ Koetschan, C; Kittelmann, S; Lu, J; Al-Halbouni, D; Jarvis, GN; Müller, T; Wolf, M; Janssen, PH (2014). "Анализ вторичной структуры внутреннего транскрибированного спейсера 1 выявляет общее ядро среди анаэробных грибов (Neocallimastigomycota)". PLOS ONE . 9 (3): e91928. Bibcode :2014PLoSO...991928K. doi : 10.1371/journal.pone.0091928 . PMC 3963862 . PMID 24663345.
^ Schoch, CL, Seifert, KA, Huhndorf, S., Robert, V., Spouge, JL, Levesque, CA, Chen, W., Bolchacova, E., Voigt, K., Crous, PW; и др. (2012). «Ядерный рибосомальный внутренний транскрибируемый спейсер (ITS) как универсальный маркер штрихкода ДНК для грибов». PNAS . 109 (16): 6241–6246. doi : 10.1073/pnas.1117018109 . PMC 3341068. PMID 22454494 .{{cite journal}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
^ Уайт, Т.Дж., Брунс, Т., Ли, С. и Тейлор, Дж. (1990). Амплификация и прямое секвенирование генов рибосомальной РНК грибов для филогенетики. Протоколы ПЦР: руководство по методам и приложениям 18, 315–322.
^ Праймер ITS1 покрывает ITS1-5.8S-ITS2 с 5'-конца, а ITS4 покрывает ту же область с 3'-конца.
^ Гардес, М.; Брунс, Т.Д. (1993). «ITS-праймеры с повышенной специфичностью для базидиомицетов: применение для идентификации микоризы и ржавчины». Молекулярная экология . 2 (2): 113–118. doi :10.1111/j.1365-294X.1993.tb00005.x. PMID 8180733. S2CID 24316407.
^ Usyk, Mykhaylo; Zolnik, Christine P.; Patel, Hitesh; Levi, Michael H.; Burk, Robert D. (13.12.2017). Mitchell, Aaron P. (ред.). «Novel ITS1 Fungal Primers for Characterization of the Mycobiome». mSphere . 2 (6): e00488–17, /msphere/2/6/mSphere0488–17.atom. doi :10.1128/mSphere.00488-17. ISSN 2379-5042. PMC 5729218 . PMID 29242834.
^ Нильссон, Р. Хенрик; Анслан, Стен; Бахрам, Мохаммад; Вюрцбахер, Кристиан; Балдриан, Петр; Тедерсоо, Лехо (февраль 2019 г.). «Разнообразие микобиомов: высокопроизводительное секвенирование и идентификация грибов». Nature Reviews Microbiology . 17 (2): 95–109. doi :10.1038/s41579-018-0116-y. ISSN 1740-1534. PMID 30442909. S2CID 53438777.
Внешние ссылки
Лабораторная медицина Вашингтонского университета: молекулярная диагностика | Секвенирование дрожжей