Гефирин — это белок , который у людей кодируется геном GPHN . [ 5] [6] [7] [8] [9]
Этот ген кодирует белок нейронной сборки , который прикрепляет ингибирующие нейротрансмиттерные рецепторы к постсинаптическому цитоскелету посредством высокоаффинного связывания с доменом субъединицы рецептора и димерами тубулина . В ненейрональных тканях кодируемый белок также необходим для биосинтеза кофактора молибдена . Мутации в этом гене могут быть связаны с неврологическим состоянием гиперэкплексия , а также приводить к дефициту кофактора молибдена .
Ген
Было описано множество альтернативно сплайсированных вариантов транскриптов, кодирующих различные изоформы; однако, полная природа всех вариантов транскриптов в настоящее время неизвестна. [8] На производство альтернативно сплайсированных вариантов влияют некодирующие области внутри гена. Была идентифицирована некодирующая пара последовательностей «инь-ян», охватывающая гефирин . [10] Эти последовательности являются противоположностями друг друга - состоят из сотен расходящихся нуклеотидных состояний. Оба эти шаблона являются уникальными для человека и быстро эволюционировали после отделения от их предкового шаблона ДНК. Последовательности инь и ян гефирина сегодня распространены в популяциях, представляющих все основные человеческие предки.
Функция
Гефирин — это многофункциональный белок массой 93 кДа , который является компонентом постсинаптической белковой сети ингибирующих синапсов . Он состоит из 3 доменов : N-концевого домена G, C-концевого домена E и большого неструктурированного линкерного домена, который их соединяет. Хотя существуют структуры для тримерных доменов G и димерных доменов E, для полноразмерного белка структуры не существует, что может быть связано с большой неструктурированной областью, из-за которой белок трудно кристаллизовать. Но недавнее исследование полноразмерного гефирина методом малоуглового рентгеновского рассеяния показывает, что он преимущественно образует тримеры, и что из-за своей длинной линкерной области он может существовать либо в компактном состоянии, либо в одном из двух расширенных состояний. [11]
Положительное окрашивание антителами гефирина в синапсе в большинстве случаев соответствует присутствию рецепторов глицина и/или ГАМК А. Тем не менее, могут иметь место некоторые исключения, как в нейронах ганглиев задних корешков , где гефирин отсутствует, несмотря на присутствие рецепторов ГАМК А. [9] Гефирин считается основным белком-подложкой в ингибирующих синапсах, аналогичным по своей функции PSD-95 в глутаматергических синапсах . [12] [13] Гефирин был идентифицирован по его взаимодействию с рецептором глицина , основным рецепторным белком ингибирующих синапсов в спинном мозге и стволе мозга. В дополнение к его взаимодействию с рецептором глицина недавние публикации показали , что гефирин также взаимодействует с внутриклеточной петлей между трансмембранными спиралями TM3 и TM4 альфа- и бета-субъединиц рецептора ГАМК А. [ 14]
Гефирин вытесняет рецепторы ГАМК из комплекса GABARAP / P130 , а затем переносит рецепторы в синапс. [15] Попав в синапс, белок связывается с коллибистином [16] и нейролигином 2. [ 17] В клетках гефирин, по-видимому, образует олигомеры, состоящие по крайней мере из трех субъединиц. Было описано несколько вариантов сплайсинга , которые предотвращают эту олигомеризацию, не влияя на сродство к рецепторам. Тем не менее, они влияют на состав ингибирующих синапсов и даже могут играть роль в таких заболеваниях, как эпилепсия. [18]
Как уже упоминалось, гефирин также катализирует два терминальных этапа биосинтеза Moco. На предпоследнем этапе N-терминальный домен G аденилирует апо-форму молибдоптерина, образуя промежуточный аденилированный молибдоптерин. На терминальном этапе C-терминальный домен E катализирует деаденилирование, а также механизм вставки металла.
Клиническое значение
У людей с височной эпилепсией были обнаружены аномально низкие уровни гефирина в височных долях. [20] В животных моделях полное отсутствие гефирина приводит к ригидности мышц и смерти сразу после рождения. Ригидность мышц также является симптомом болезни испуга , которая может быть вызвана мутацией в гене гефирина. И если у человека вырабатываются аутоантитела против гефирина, это может даже привести к синдрому ригидного человека . [18]
Последовательности Инь-Ян
В какой-то момент истории человечества существовала последовательность ДНК, охватывающая гефирин , которая разделилась и последовала за двумя расходящимися эволюционными путями. [10] Эти типы расщеплений могут происходить, когда две популяции становятся изолированными друг от друга или когда хромосомный регион не испытывает событий рекомбинации . Две последовательности, которые отделились от предковой последовательности, приобрели более сотни мутаций, которые впоследствии стали общими. Это произошло за относительно короткое время в эволюционном масштабе, поскольку сотни мутаций были зафиксированы в отдельных последовательностях «инь» и «ян» до миграции человека в Азию. Сообщалось, что в настоящее время азиаты несут почти равное количество последовательностей инь и ян, а мировые популяции, представляющие каждую основную человеческую родословную, обладают как последовательностями инь, так и ян. [10] Существование этого массивного паттерна инь-ян предполагает, что два полностью расходящихся эволюционных пути быстро прогрессировали в течение истории человечества, предположительно достигая общей цели усиления регуляции гефирина .
^ abc GRCh38: Ensembl выпуск 89: ENSG00000171723 – Ensembl , май 2017 г.
^ abc GRCm38: Ensembl выпуск 89: ENSMUSG00000047454 – Ensembl , май 2017 г.
^ "Human PubMed Reference:". Национальный центр биотехнологической информации, Национальная медицинская библиотека США .
^ "Mouse PubMed Reference:". Национальный центр биотехнологической информации, Национальная медицинская библиотека США .
^ Prior P, Schmitt B, Grenningloh G, Pribilla I, Multhaup G, Beyreuther K, Maulet Y, Werner P, Langosch D, Kirsch J (июль 1992 г.). «Первичная структура и альтернативные варианты сплайсинга гефирина, предполагаемого белка-линкера глицинового рецептора-тубулина». Neuron . 8 (6): 1161–70. doi : 10.1016/0896-6273(92)90136-2 . PMID 1319186.
^ ab Sabatini DM, Barrow RK, Blackshaw S, Burnett PE, Lai MM, Field ME, Bahr BA, Kirsch J, Betz H, Snyder SH (июнь 1999 г.). «Взаимодействие RAFT1 с гефирином, необходимое для чувствительной к рапамицину сигнализации». Science . 284 (5417): 1161–4. Bibcode :1999Sci...284.1161S. doi :10.1126/science.284.5417.1161. PMID 10325225.
^ Fritschy JM, Harvey RJ, Schwarz G (май 2008 г.). «Гефирин: где мы находимся, куда мы идем?». Trends Neurosci . 31 (5): 257–64. doi :10.1016/j.tins.2008.02.006. PMID 18403029. S2CID 6885626.
^ ab "Ген Энтреза: GPHN гефирин".
^ ab Lorenzo LE, Godin AG, Wang F, St-Louis M, Carbonetto S, Wiseman PW, Ribeiro-da-Silva A, De Koninck Y (июнь 2014 г.). «Кластеры гефирина отсутствуют в первичных афферентных терминалах малого диаметра, несмотря на наличие рецепторов ГАМКA». J. Neurosci . 34 (24): 8300–17. doi :10.1523/JNEUROSCI.0159-14.2014. PMC 6608243 . PMID 24920633.
^ abc Climer S, Templeton AR, Zhang W (2015). «Человеческий гефирин заключен в гигантских функциональных некодирующих последовательностях инь-ян». Nature Communications . 6 : 6534. Bibcode :2015NatCo...6.6534C. doi :10.1038/ncomms7534. PMC 4380243 . PMID 25813846. *Резюме можно найти в статье: «Большие данные позволяют компьютерным инженерам находить генетические подсказки у людей». ScienceDaily . 27 марта 2015 г.
^ Sander B, Tria G, Shkumatov AV, Kim EY, Grossmann JG, Tessmer I, Svergun DI, Schindelin H (октябрь 2013 г.). «Структурная характеристика гефирина с помощью АСМ и SAXS выявляет смесь компактных и протяженных состояний». Acta Crystallographica Section D. 69 ( Pt 10): 2050–60. doi :10.1107/S0907444913018714. PMID 24100323.
^ Giesemann T, Schwarz G, Nawrotzki R, Berhörster K, Rothkegel M, Schlüter K, Schrader N, Schindelin H, Mendel RR, Kirsch J, Jockusch BM (сентябрь 2003 г.). «Образование комплекса между постсинаптическим белком каркаса gephyrin, profilin и Mena: возможная связь с системой микрофиламентов». J. Neurosci . 23 (23): 8330–9. doi :10.1523/JNEUROSCI.23-23-08330.2003. PMC 6740687 . PMID 12967995.
^ Ehrensperger MV, Hanus C, Vannier C, Triller A, Dahan M (май 2007 г.). «Множественные состояния ассоциации между рецепторами глицина и гефирином, выявленные с помощью анализа SPT». Biophys. J . 92 (10): 3706–18. Bibcode :2007BpJ....92.3706E. doi :10.1529/biophysj.106.095596. PMC 1853151 . PMID 17293395.
^ Maric HM, Mukherjee J, Tretter V, Moss SJ, Schindelin H (декабрь 2011 г.). «Кластеризация рецепторов γ-аминомасляной кислоты типа A и глицина, опосредованная гефирином, опирается на общий сайт связывания». J. Biol. Chem . 286 (49): 42105–14. doi : 10.1074/jbc.M111.303412 . PMC 3234978. PMID 22006921 .
^ Thiriet M (2013). Внутриклеточные сигнальные медиаторы в кровеносной и дыхательной системах . Нью-Йорк, Нью-Йорк: Springer New York. стр. 605. ISBN978-1-4614-4370-4.
^ ab Kins S, Betz H, Kirsch J (январь 2000 г.). «Коллибистин, недавно идентифицированный специфический для мозга GEF, индуцирует субмембранную кластеризацию гефирина». Nat. Neurosci . 3 (1): 22–9. doi :10.1038/71096. PMID 10607391. S2CID 24878249.
^ Poulopoulos A, Aramuni G, Meyer G, Soykan T, Hoon M, Papadopoulos T, Zhang M, Paarmann I, Fuchs C, Harvey K, Jedlicka P, Schwarzacher SW, Betz H, Harvey RJ, Brose N, Zhang W, Varoqueaux F (сентябрь 2009 г.). «Нейролигин 2 управляет постсинаптической сборкой в перисоматических ингибирующих синапсах через гефирин и коллибостин». Neuron . 63 (5): 628–42. doi : 10.1016/j.neuron.2009.08.023 . PMID 19755106. S2CID 15911502.
^ Рейсс Дж., Джонсон Дж. Л. (июнь 2003 г.). «Мутации в генах биосинтеза кофактора молибдена MOCS1, MOCS2 и GEPH». Hum. Mutat . 21 (6): 569–76. doi : 10.1002/humu.10223 . PMID 12754701. S2CID 41013043.
^ Fang M, Shen L, Yin H, Pan YM, Wang L, Chen D, Xi ZQ, Xiao Z, Wang XF, Zhou SN (октябрь 2011 г.). «Понижение регуляции гефирина в нейронах височной эпилепсии у людей и крысиной модели». Synapse . 65 (10): 1006–14. doi :10.1002/syn.20928. PMID 21404332. S2CID 12025675.
Дальнейшее чтение
Sassoè-Pognetto M, Fritschy JM (2000). "Мини-обзор: гефирин, основной постсинаптический белок ГАМКергических синапсов". Eur. J. Neurosci . 12 (7): 2205–10. doi :10.1046/j.1460-9568.2000.00106.x. PMID 10947798. S2CID 46305641.
Рейсс Дж., Джонсон Дж. Л. (2003). «Мутации в генах биосинтеза кофактора молибдена MOCS1, MOCS2 и GEPH». Hum. Mutat . 21 (6): 569–76. doi : 10.1002/humu.10223 . PMID 12754701. S2CID 41013043.
Kirsch J, Langosch D, Prior P, Littauer UZ, Schmitt B, Betz H (1991). «Белок, ассоциированный с рецептором глицина 93 кДа, связывается с тубулином». J. Biol. Chem . 266 (33): 22242–5. doi : 10.1016/S0021-9258(18)54560-9 . PMID 1657993.
Lorenzo LE, Barbe A, Bras H (март 2004 г.). «Картирование и количественный анализ путей цитоплазматического транспорта гефирина в мотонейронах с использованием оптимизированной процедуры цветной визуализации с помощью трансмиссионной электронной микроскопии (TEMCI)». Журнал нейроцитологии . 33 (2): 241–9. doi :10.1023/B:NEUR.0000030699.74642.7d. PMID 15322382. S2CID 24964320.
Мейер Г., Кирш Дж., Бетц Х., Лангош Д. (1995). «Идентификация мотива связывания гефирина на бета-субъединице рецептора глицина». Neuron . 15 (3): 563–72. doi : 10.1016/0896-6273(95)90145-0 . PMID 7546736.
Маммото А., Сасаки Т., Асакура Т., Хотта И., Имамура Х., Такахаши К., Мацуура Ю., Ширао Т., Такай Ю. (1998). «Взаимодействие дребрина и гефирина с профилином». Биохим. Биофиз. Рез. Коммун . 243 (1): 86–9. дои : 10.1006/bbrc.1997.8068. ПМИД 9473484.
Kneussel M, Hermann A, Kirsch J, Betz H (1999). «Гидрофобные взаимодействия опосредуют связывание бета-субъединицы рецептора глицина с гефирином». J. Neurochem . 72 (3): 1323–6. doi : 10.1046/j.1471-4159.1999.0721323.x . PMID 10037506.
Kins S, Betz H, Kirsch J (2000). «Коллибистин, недавно идентифицированный специфический для мозга GEF, вызывает субмембранную кластеризацию гефирина». Nat. Neurosci . 3 (1): 22–9. doi :10.1038/71096. PMID 10607391. S2CID 24878249.
Nagase T, Kikuno R, Ishikawa KI, Hirosawa M, Ohara O (2000). «Предсказание кодирующих последовательностей неидентифицированных человеческих генов. XVI. Полные последовательности 150 новых клонов кДНК из мозга, которые кодируют большие белки in vitro». DNA Res . 7 (1): 65–73. doi : 10.1093/dnares/7.1.65 . PMID 10718198.
Батлер М.Х., Хаяши А., Окоши Н., Виллманн С., Беккер С.М., Фэн Г., Де Камилли П., Солимена М. (2000). «Аутоиммунитет к гефирину при синдроме Стифф-Мэна». Нейрон . 26 (2): 307–12. дои : 10.1016/S0896-6273(00)81165-4 . ПМИД 10839351.
Kneussel M, Haverkamp S, Fuhrmann JC, Wang H, Wässle H, Olsen RW, Betz H (2000). «Белок GABARAP, ассоциированный с рецептором γ-аминомасляной кислоты типа A (GABAAR), взаимодействует с гефирином, но не участвует в закреплении рецептора в синапсе». Proc. Natl. Acad. Sci. USA . 97 (15): 8594–9. doi : 10.1073/pnas.97.15.8594 . PMC 26993 . PMID 10900017.
Reiss J, Gross-Hardt S, Christensen E, Schmidt P, Mendel RR, Schwarz G (2001). «Мутация в гене рецептора нейротрансмиттера – кластеризующего белка Gephyrin вызывает новую форму дефицита кофактора молибдена». Am. J. Hum. Genet . 68 (1): 208–13. doi :10.1086/316941. PMC 1234914 . PMID 11095995.
Дэвид-Уатин Б. (2001). «Ген человеческого гефирина (GPHN): структура, локализация хромосом и экспрессия в ненейрональных клетках». Gene . 271 (2): 239–45. doi :10.1016/S0378-1119(01)00511-X. PMID 11418245.
Schwarz G, Schrader N, Mendel RR, Hecht HJ, Schindelin H (2001). «Кристаллические структуры доменов человеческого гефирина и растительного Cnx1 G: сравнительный анализ и функциональные последствия». J. Mol. Biol . 312 (2): 405–18. doi :10.1006/jmbi.2001.4952. PMID 11554796.
Grosskreutz Y, Hermann A, Kins S, Fuhrmann JC, Betz H, Kneussel M (2002). «Идентификация мотива связывания гефирина в факторе обмена GDP/GTP коллибостине». Biol. Chem . 382 (10): 1455–62. doi :10.1515/BC.2001.179. PMID 11727829. S2CID 2415901.
Fuhrmann JC, Kins S, Rostaing P, El Far O, Kirsch J, Sheng M, Triller A, Betz H, Kneussel M (2002). «Gephyrin взаимодействует с легкими цепями Dynein 1 и 2, компонентами комплексов моторных белков». J. Neurosci . 22 (13): 5393–402. doi :10.1523/JNEUROSCI.22-13-05393.2002. PMC 6758200 . PMID 12097491.
Штраусберг Р.Л., Фейнгольд Э.А., Граус Л.Х., Дерге Дж.Г., Клаузнер Р.Д., Коллинз Ф.С., Вагнер Л., Шенмен К.М., Шулер Г.Д., Альтшул С.Ф., Зееберг Б., Бютов К.Х., Шефер К.Ф., Бхат Н.К., Хопкинс РФ, Джордан Х., Мур Т. , Макс С.И., Ван Дж., Се Ф., Дьяченко Л., Марусина К., Фармер А.А., Рубин Г.М., Хонг Л., Стэплтон М., Соарес М.Б., Бональдо М.Ф., Казавант Т.Л., Шитц Т.Э., Браунштейн М.Дж., Усдин Т.Б., Тошиюки С., Карнинчи. П., Пранге С., Раха С.С., Локельяно Н.А., Питерс Г.Дж., Абрамсон Р.Д., Муллахи С.Дж., Босак С.А., Макьюэн П.Дж., МакКернан К.Дж., Малек Дж.А., Гунаратне PH, Richards S, Worley KC, Hale S, Garcia AM, Gay LJ, Hulyk SW, Villalon DK, Muzny DM, Sodergren EJ, Lu X, Gibbs RA, Fahey J, Helton E, Ketteman M, Madan A, Rodrigues S, Санчес А., Уайтинг М., Мадан А., Янг А.С., Шевченко Ю., Буффар Г.Г., Блейксли Р.В., Тачман Дж.В., Грин Э.Д., Диксон М.С., Родригес А.С., Гримвуд Дж., Шмутц Дж., Майерс Р.М., Баттерфилд Ю.С., Крживинский М.И., Скальска У. , Smailus DE, Schnerch A, Schein JE, Jones SJ, Marra MA (2003). «Создание и начальный анализ более 15 000 полноразмерных последовательностей ДНК человека и мыши». Proc. Natl. Acad. Sci. USA . 99 (26): 16899–903. Bibcode : 2002PNAS...9916899M. doi : 10.1073/pnas.242603899 . PMC 139241. PMID 12477932 .
Waldvogel HJ, Baer K, Snell RG, During MJ, Faull RL, Rees MI (2003). «Распределение гефирина в человеческом мозге: иммуногистохимический анализ». Neuroscience . 116 (1): 145–56. doi :10.1016/S0306-4522(02)00550-X. PMID 12535948. S2CID 32101833.