Врожденный дискератоз ( DKC ), также известный как синдром Цинссера-Энгмана-Коула , является редким прогрессирующим врожденным заболеванием с сильно изменчивым фенотипом . [3] Классически это заболевание определялось триадой: аномальная пигментация кожи, дистрофия ногтей и лейкоплакия слизистой оболочки полости рта , а также миелодиспластический синдром (MDS) или острый миелоидный лейкоз (AML), но эти компоненты встречаются не всегда. [3] DKC характеризуется короткими теломерами . Первоначально заболевание может поражать кожу , но основным последствием является прогрессирующая недостаточность костного мозга , которая встречается более чем в 80%, вызывая раннюю смертность. [3]
DKC может характеризоваться кожной пигментацией, преждевременным поседением, дистрофией ногтей , лейкоплакией слизистой оболочки полости рта, постоянным слезотечением из-за атрезии слезных протоков , часто тромбоцитопенией , анемией , атрофией яичек у мужчин-носителей и предрасположенностью к раку . [4] [5] Кроме того, с этим синдромом связаны аномалии печени, узловая регенеративная гипоплазия печени, хотя и редкая, но одно из многих проявлений заболеваний печени, которые могут быть вызваны короткими теломерами. [6]
Считается [7] , что без функциональной теломеразы хромосомы, скорее всего, будут соединяться вместе на своих концах через негомологичный путь соединения концов. Если это окажется достаточно распространенным явлением, то злокачественность возможна даже без присутствия теломеразы. Миелодиспластический синдром связан с этим синдромом, обычно проявляющимся как гипоплазия костного мозга, которая может напоминать апластическую анемию, но может быть дифференцирован с >10% дисплазией в пораженных клеточных линиях, хотя иногда это невозможно из-за гипоплазии костного мозга, уменьшающей количество наблюдаемых клеток крови, генетические клоны обычно не присутствуют чаще, чем нет, при гипопластическом миелодиспластическом расстройстве, связанном с врожденным дискератозом.
Из компонентов компонента теломеразной РНК (TERC) одним из ключевых является домен H/ACA . Этот домен H/ACA отвечает за созревание и стабильность TERC и, следовательно, теломеразы в целом. Рибонуклеопротеин млекопитающих H/ACA содержит четыре белковые субъединицы: дискерин, Gar1, Nop10 и Nhp2. Было показано, что мутации в Nop10, [8] Nhp2 [9] и дискерине1 [10] приводят к симптомам, подобным DKC.
Наиболее охарактеризованная форма врожденного дискератоза является результатом одной или нескольких мутаций в длинном плече Х-хромосомы в гене DKC1. [7] [10] Это приводит к рецессивной форме заболевания, сцепленной с Х-хромосомой, при которой основным затронутым белком является дискерин. Из пяти мутаций, описанных Хейссом и коллегами в Nature Genetics , [10] четыре были однонуклеотидными полиморфизмами, все из которых приводили к изменению высококонсервативных аминокислот . Один случай был внутрирамочной делецией, приведшей к потере остатка лейцина , также сохраняющегося у млекопитающих. В трех случаях конкретные затронутые аминокислоты ( фенилаланин , пролин , глицин ) находятся в том же локусе у людей, что и у дрожжей ( S. Cerevisiae ) и серой крысы ( R. Norvegicus ). [10] Это устанавливает консервацию последовательности и важность дискерина внутри эукариот. Соответствующая природа дискерина у большинства видов заключается в катализе посттранскрипционного псевдоуридилирования определенных уридинов, обнаруженных в некодирующих РНК, таких как рибосомальная РНК (рРНК). Cbf5, дрожжевой аналог человеческого дискерина, действительно известен своей связью с обработкой и созреванием рРНК. [7] У людей эта роль может быть приписана дискерину. [10] Таким образом, Х-сцепленная форма этого заболевания может приводить к специфическим проблемам, связанным с дисфункциональной РНК и, возможно, более серьезному фенотипу. У позвоночных, в отличие от одноклеточных эукариот, дискерин является ключевым компонентом компонента теломеразной РНК (TERC) в форме мотива H/ACA. [11] Эта Х-сцепленная разновидность, как и мутации Nop10 и Nhp2, демонстрирует укороченные теломеры в результате более низких концентраций TERC. [12]
3 гена: TERC, TERT, TINF2 Доказательства, подтверждающие важность домена H/ACA в человеческой теломеразе, многочисленны. По крайней мере одно исследование [13] показало, что эти мутации влияют на активность теломеразы, отрицательно влияя на сборку pre-RNP и созревание человеческой теломеразной РНК. Тем не менее, мутации, которые напрямую влияют на компоненты теломеразной РНК, предположительно существуют и также должны вызывать преждевременное старение или симптомы, подобные DKC. Действительно, три семьи с мутациями в гене TERC человека были изучены с интригующими результатами. [7] В двух из этих семей присутствовали два семейно-специфических однонуклеотидных полиморфизма, в то время как в другой сохранялась крупномасштабная делеция (821 пара оснований ДНК) на хромосоме 3 , которая включает 74 основания, кодирующих часть домена H/ACA. Эти три различные мутации приводят к легкой форме врожденного дискератоза, который однозначно следует аутосомно-доминантному типу наследования. Преждевременное поседение, ранняя потеря зубов, предрасположенность к раку кожи, а также укорочение длины теломер продолжают оставаться характерными для этого заболевания. [14]
6 генов: истинный фенотип людей с DKC может зависеть от того, какой белок подвергся мутации. Одна задокументированная аутосомно-рецессивная мутация [8] в семье, которая является носителем DKC, была обнаружена в NOP10. В частности, мутация представляет собой изменение основания с цитозина на тимин в высококонсервативной области последовательности NOP10. Эта мутация на хромосоме 15 приводит к изменению аминокислоты с аргинина на триптофан . Гомозиготные рецессивные люди демонстрируют симптомы врожденного дискератоза в полном объеме. По сравнению с нормальными людьми того же возраста, страдающие DKC имеют теломеры гораздо более короткой длины. Кроме того, гетерозиготы, те, у кого есть один нормальный аллель и один, кодирующий заболевание, также демонстрируют относительно укороченные теломеры. Было установлено, что причиной этого является снижение уровней TERC у людей с мутацией Nop10. При снижении уровня TERC, поддержание теломер, особенно в процессе развития, как предполагается, соответственно страдает. Это приводит к описанному укорочению теломер. [8]
Мутации NHP2 по характеристике схожи с мутациями NOP10. Эти мутации также являются аутосомно-рецессивными с тремя специфическими однонуклеотидными полиморфизмами , которые распознаются, что приводит к врожденному дискератозу. Также, как и при NOP10, у людей с этими мутациями NHP2 наблюдается снижение количества компонента теломеразной РНК (TERC), присутствующего в клетке. Опять же, можно предположить, что снижение TERC приводит к аберрантному поддержанию теломер и, таким образом, к укорочению теломер. Те гомозиготные рецессивные мутации в NHP2 действительно демонстрируют более короткие теломеры по сравнению с нормальными людьми того же возраста. [9]
Врожденный дискератоз — это расстройство, связанное с плохим поддержанием теломер [7], в основном из-за ряда генных мутаций , которые приводят к аномальной функции рибосом, называемой рибосомопатией . В частности, заболевание связано с одной или несколькими мутациями, которые напрямую или косвенно влияют на компонент РНК теломеразы позвоночных (TERC). [15]
Теломераза — это обратная транскриптаза , которая поддерживает определенную повторяющуюся последовательность ДНК , теломеры, во время развития. Теломеры размещаются теломеразой на обоих концах линейных хромосом как способ защиты линейной ДНК от общих форм химического повреждения и для коррекции укорочения концов хромосом, которое происходит во время нормальной репликации ДНК . [16] Это укорочение концов является результатом того, что у эукариотических ДНК-полимераз нет механизма синтеза конечных нуклеотидов, присутствующих на конце «отстающей цепи» двухцепочечной ДНК. ДНК-полимераза может синтезировать новую ДНК только из старой цепи ДНК в направлении 5'→3'. Учитывая, что ДНК имеет две цепи, которые являются комплементарными, одна цепь должна быть 5'→3', а другая 3'→5'. Эта неспособность синтезировать в направлении 3'→5' компенсируется использованием фрагментов Оказаки , коротких фрагментов ДНК, которые синтезируются 5'→3' из 3'→5' по мере движения репликационной вилки. Поскольку ДНК-полимеразе требуются РНК-праймеры для связывания ДНК, чтобы начать репликацию, каждому фрагменту Оказаки, таким образом, предшествует РНК-праймер на синтезируемой цепи. Когда достигается конец хромосомы, последний РНК-праймер помещается на этот нуклеотидный участок, и он неизбежно удаляется. К сожалению, как только праймер удаляется, ДНК-полимераза не может синтезировать оставшиеся основания. [16] [17]
Было показано, что у страдающих DKC наблюдается снижение уровня TERC, что неизменно влияет на нормальную функцию теломеразы, которая поддерживает эти теломеры. [7] [8] [10] При снижении уровня TERC соответственно страдает поддержание теломер в процессе развития. У людей теломераза неактивна в большинстве типов клеток после раннего развития (за исключением крайних случаев, таких как рак). [11] Таким образом, если теломераза не способна эффективно влиять на ДНК в начале жизни, хромосомная нестабильность становится серьезной возможностью у людей гораздо раньше, чем можно было бы ожидать. [18]
Исследование показывает, что пролиферативные дефекты в кератиноцитах кожи DC корректируются экспрессией обратной транскриптазы теломеразы , TERT, или активацией эндогенной теломеразы посредством экспрессии компонента РНК теломеразы вируса папилломы E6/E7 , TERC. [19]
Поскольку заболевание имеет широкий спектр симптомов из-за вовлечения нескольких систем организма, диагностическое тестирование зависит от клинических результатов у каждого отдельного пациента. Обычно используемые тесты включают общий анализ крови (ОАК), исследование костного мозга, тест длины теломеры лейкоцитов (например, Flow FISH), тест функции легких и генетическое тестирование . [20] [21]
Основой лечения врожденного дискератоза является трансплантация гемопоэтических стволовых клеток , наилучший результат достигается при использовании донора-брата. Краткосрочная терапия на начальных стадиях проводится с использованием анаболических стероидов [оксиметолона, даназола] или эритропоэтиноподобных гормонов или фактора, стимулирующего колонии гранулоцитов [филграстима]. Все эти методы лечения направлены на устранение последствий недостаточности костного мозга, которая проявляется в виде низкого количества красных и белых кровяных телец. Эти препараты помогают увеличить количество компонентов крови и восполнить дефицит, вызванный недостаточностью костного мозга. Врожденный дискератоз в отношении трансплантации стволовых клеток необходимо лечить очень осторожно с помощью низкоинтенсивного облучения/химиотерапии, чтобы избежать потенциально катастрофических последствий реакции «хозяин против трансплантата» и токсичности для других органов, пораженных короткими теломерами, что делает их очень чувствительными к любому облучению, особенно легких и печени. [22]
DC ассоциируется с более короткой продолжительностью жизни, но многие доживают по крайней мере до 60 лет . [23] Основная причина смертности у этих пациентов связана с недостаточностью костного мозга. Почти у 80% пациентов с врожденным дискератозом развивается недостаточность костного мозга. [24]
Недавние исследования использовали индуцированные плюрипотентные стволовые клетки для изучения механизмов заболевания у людей и обнаружили, что перепрограммирование соматических клеток восстанавливает удлинение теломер в клетках с врожденным дискератозом (DKC), несмотря на генетические повреждения, которые влияют на теломеразу. Перепрограммированные клетки DKC смогли преодолеть критическое ограничение в уровнях TERC и восстановить функцию (поддержание теломер и самообновление). Терапевтически, методы, направленные на увеличение экспрессии TERC, могут оказаться полезными при DKC. [25]