Инфекция стрептококка группы B , также известная как заболевание стрептококком группы B или просто инфекция стрептококком группы B , является инфекционным заболеванием, вызываемым бактерией Streptococcus agalactiae . Streptococcus agalactiae является наиболее распространенным человеческим патогеном, относящимся к группе B по классификации стрептококков Лэнсфилда — отсюда и название стрептококк группы B (GBS). Инфекция GBS может вызвать серьезное заболевание, а иногда и смерть, особенно у новорожденных, пожилых людей и людей с ослабленной иммунной системой . Наиболее тяжелой формой заболевания стрептококком группы B является неонатальный менингит у младенцев, который часто оказывается смертельным и может вызвать постоянное нейрокогнитивное нарушение .
S. agalactiae был признан патогеном крупного рогатого скота Эдмоном Нокаром и Молло в конце 1880-х годов. Он может вызывать мастит ( воспаление вымени ) у молочных коров. Название вида «agalactiae», означающее «нет молока», намекает на это. Его значение как человеческого патогена было впервые описано в 1938 году, [ 1] а в начале 1960-х годов GBS был признан основной причиной инфекций у новорожденных. [2] У большинства людей Streptococcus agalactiae является безвредной комменсальной бактерией , которая является частью нормальной человеческой микробиоты, колонизирующей желудочно-кишечный и мочеполовой тракты. До 30% здоровых взрослых людей являются бессимптомными носителями GBS. [3] [4]
Как уже упоминалось, S. agalactiae — это грамположительный кокк с тенденцией к образованию цепей, бета-гемолитический, каталазоотрицательный и факультативный анаэроб ( анаэробный организм ). GBS легко растет на чашках с кровяным агаром в виде микробных колоний, окруженных узкой зоной β- гемолиза .
GBS характеризуется наличием в клеточной стенке антигена группы B классификации Лэнсфилда ( группировка Лэнсфилда ), который может быть обнаружен непосредственно в интактных бактериях с помощью тестов латексной агглютинации . [5] [6] [7] [8] Тест CAMP также является еще одним важным тестом для идентификации GBS. Фактор CAMP действует синергически со стафилококковым β-гемолизином, вызывая усиленный гемолиз эритроцитов овец или быков . [5] GBS также способен гидролизовать гиппурат , и этот тест также можно использовать для идентификации GBS. [6] Гемолитические штаммы GBS при культивировании на среде гранада через 24-48 ч при 35-37 °C продуцируют ( гранаден ) и развиваются в виде колоний оранжево-кирпичного или красного цвета, что позволяет провести его прямую и однозначную идентификацию. [9] Идентификацию GBS можно также легко осуществить с помощью масс-спектрометрии с лазерной десорбцией и ионизацией во время пролета ( MALDI-TOF ) [10] [11] и тестов на нуклеиновые кислоты (NAAT). [ 6] Кроме того, колонии GBS можно предварительно идентифицировать после их появления в хромогенной агаровой среде. [6] [12] [13] Тем не менее, колонии, подобные GBS, которые развиваются в хромогенной среде, следует подтверждать как GBS с помощью дополнительных надежных тестов (например, агглютинации латекса или теста CAMP), чтобы избежать потенциальной ошибочной идентификации. [6] [8] Краткое изложение лабораторных методов идентификации GBS приведено в ссылке [6] .
GBS обнаруживается в желудочно-кишечном, мочеполовом тракте и ротоглотке человека. GBS также является нормальным компонентом кишечной и вагинальной микробиоты у некоторых женщин. [3] [14] [15] В различных исследованиях частота колонизации влагалища GBS колеблется от 4 до 36%, при этом большинство исследований сообщают о частоте более 20%, при этом оценка материнской колонизации GBS во всем мире составляет 18% с большими вариациями между странами (11%–35%). [16] Вагинальная или ректальная колонизация GBS может быть прерывистой, транзиторной или постоянной. [14] Эти вариации в зарегистрированной распространенности бессимптомной (не проявляющей симптомов заболевания) колонизации могут быть связаны с различными используемыми методами обнаружения и различиями в изучаемых популяциях. [12] [17] [18] Хотя GBS является бессимптомным и безвредным колонизатором желудочно-кишечного тракта человека у до 30% в остальном здоровых взрослых, включая беременных женщин. [4] [17] Эта условно-патогенная безвредная бактерия может при некоторых обстоятельствах вызывать тяжелые инвазивные инфекции ( оппортунистические инфекции ). [3]
Хотя колонизация GBS протекает бессимптомно и, в целом, не вызывает проблем, иногда она может вызывать серьезные заболевания у матери и ребенка во время беременности и после родов. Инфекции GBS у матери могут вызывать хориоамнионит (внутриамниотическую инфекцию или тяжелую инфекцию плацентарных тканей), нечасто — послеродовые инфекции (после родов), и это было связано с недоношенностью и гибелью плода. [19] Инфекции мочевыводящих путей GBS , более 100 000 КОЕ ( колониеобразующих единиц )/мл, могут вызывать роды у беременных женщин и вызывать преждевременные роды ( преждевременные роды ) и выкидыш и требуют лечения антибиотиками. Наличие GBS в моче при любом количестве колоний является маркером тяжелой колонизации GBS и показанием для интранатальной антибиотикопрофилактики. [4] [14] [20]
В западном мире GBS (при отсутствии эффективных мер профилактики) является основной причиной бактериальных инфекций у новорожденных, таких как сепсис , пневмония и менингит , которые могут привести к смерти или долгосрочным последствиям . [4] [21] [22] [23] Инфекции GBS у новорожденных делятся на два клинических типа: заболевание с ранним началом (GBS-EOD) и заболевание с поздним началом (GBS-LOD). GBS-EOD проявляется от 0 до 7 дней жизни у новорожденного, причем большинство случаев EOD проявляются в течение 24 часов после рождения. GBS-LOD начинается между 7 и 90 днями после рождения. [4] [12] [14] [22] Примерно 50% новорожденных от матерей, колонизированных GBS, также колонизированы GBS, и (без мер профилактики) у 1-2% этих новорожденных разовьется GBS-EOD. [14] [24] Наиболее распространенными клиническими синдромами GBS-EOD являются сепсис, пневмония и (реже) менингит. Пневмония и сепсис часто наблюдаются вместе или последовательно. У новорожденных с менингитом часто наблюдаются симптомы, схожие с симптомами других синдромов, прежде чем прогрессировать до симптомов менингита. Исследование спинномозговой жидкости младенца часто необходимо для исключения менингита. [4] [22] [25] [26] У небольшого числа младенцев с сепсисом S. agalactiae имеется коинфекция , при которой один или несколько других видов бактерий также способствуют септическому заболеванию. Наиболее распространенным из этих организмов является Staphylococcus aureus . [23] Колонизация GBS во время родов является основным фактором риска развития GBS-EOD. GBS-EOD приобретается вертикально ( вертикальная передача ), через воздействие GBS на плод или ребенка из влагалища колонизированной женщины, либо внутриутробно (из-за восходящей инфекции), либо во время родов, после разрыва плодных оболочек. Младенцы также могут быть инфицированы во время прохождения через родовые пути; однако новорожденные, которые приобретают GBS таким путем, могут только стать колонизированными, и эти колонизированные младенцы обычно не развивают GBS-EOD. [14] [27]
Хотя материнская колонизация GBS является ключевым фактором для GBS-EOD, другие факторы также увеличивают риск. Эти факторы: [4] [12] [14]
Тем не менее, большинство детей, у которых развивается GBS-EOD, рождаются от колонизированных матерей без каких-либо из этих факторов риска. [12] Тяжелая вагинальная колонизация GBS может быть связана с более высоким риском GBS-EOD. Женщины, у которых был один из этих факторов риска, но которые не были колонизированы GBS во время родов, имеют низкий риск GBS-EOD по сравнению с женщинами, которые были колонизированы пренатально, но не имели ни одного из вышеупомянутых факторов риска. [24] Наличие низких уровней антикапсулярных антител против GBS у матери также имеет большое значение для развития GBS-EOD. [29] [30] Из-за этого предыдущий брат или сестра с GBS-EOD также является важным фактором риска развития инфекции при последующих родах, вероятно, отражая отсутствие защитных антител у матери. [12] [22] В целом, летальность от GBS-EOD снизилась с 50%, наблюдавшихся в исследованиях 1970-х годов, до 2–10% в последние годы, в основном вследствие улучшений в терапии и лечении. Смертельные неонатальные инфекции GBS чаще встречаются среди недоношенных детей. [4] [12] [31] Сегодня смертность, связанная с GBS EOD в США, составляет 2,1% среди доношенных новорожденных и 19,2% среди недоношенных новорожденных. [22] [32]
GBS-LOD поражает младенцев в возрасте от 7 дней до 3 месяцев и имеет более низкий уровень летальности (1%-6%), чем GBS-EOD. Клиническими синдромами GBS-LOD являются бактериемия без очага (65%), менингит (25%), целлюлит , остеоартрит и пневмония. Сообщается, что недоношенность является основным фактором риска. Каждая неделя снижения гестации увеличивает риск развития GBS-LOD в 1,34 раза. [33]
Повышенный риск GBS-LOD также связан с недоношенностью, низким весом при рождении, материнской колонизацией и многоплодной беременностью. [34] GBS-LOD может быть приобретен не только путем вертикальной передачи во время родов; он также может быть приобретен позже от матери через грудное молоко или горло или из экологических, нозокомиальных и общественных источников. GBS-LOD обычно показывает неспецифические признаки, и диагноз должен быть поставлен путем получения культур крови у лихорадящих новорожденных. Неонатальный менингит S.agalactiae не проявляется характерным признаком менингита у взрослых — ригидностью затылочных мышц. Вместо этого он проявляется неспецифическими симптомами, такими как лихорадка, рвота и раздражительность, и, следовательно, может привести к поздней диагностике. Потеря слуха и умственные нарушения могут быть долгосрочным следствием менингита GBS. [4] [21]
В настоящее время единственным надежным способом профилактики GBS-EOD является внутривенное (IV) введение антибиотиков до родов. То есть, интранатальная антибиотикопрофилактика (IAP). IAP прерывает вертикальную передачу GBS от матери к новорожденному и снижает частоту GBS-EOD. [35] Введение внутривенных (IV) антибиотиков во время родов. Внутривенное введение пенициллина или ампициллина женщинам, колонизированным GBS, в начале родов, а затем каждые четыре часа до родов, как было доказано, очень эффективно для предотвращения вертикальной передачи GBS от матери к ребенку и GBS-EOD. Пенициллин G, 5 миллионов единиц внутривенно начальная доза, затем 3 миллиона единиц каждые 4 часа до родов или ампициллин, 2 г внутривенно начальная доза, затем 1 г внутривенно каждые 4 часа до родов. [4] [12] [14] Соответствующий IAP у женщин, колонизированных GBS, должен начинаться как можно скорее после начала родов или отхождения вод. Если первая доза вводится не менее чем за 4 часа до родов, риск неонатальной инфекции очень мал; более того, если вводится за 2–4 часа до родов, риск снижается лишь частично. [36] [37] [38]
Женщины с аллергией на пенициллин без анамнеза анафилаксии ( ангионевротический отек , респираторный дистресс или крапивница ) после введения пенициллина или цефалоспорина (низкий риск анафилаксии) могут получать цефазолин (начальная доза 2 г внутривенно, затем 1 г внутривенно каждые 8 часов до родов) вместо пенициллина или ампициллина. [12] [14] Если у женщины тяжелая аллергия на бета-лактамы, а изолированный GBS чувствителен к клиндамицину, то рекомендуемой альтернативой является клиндамицин. [14] Для женщин с аллергией на пенициллин высокого риска, у которых изолят GBS не чувствителен к клиндамицину, внутривенное введение ванкомицина (20 мг/кг внутривенно каждые 8 часов, максимум 2 г на одну дозу) является единственным допустимым вариантом. [14] [39] Женщинам с высоким риском анафилаксии на пенициллин сегодня не рекомендуется использовать эритромицин из-за высокой доли устойчивости GBS к эритромицину (до 44,8%). [12] [14] Тестирование на аллергию на пенициллин может быть полезным для всех беременных женщин, являющихся носителями GBS, и отменит частое использование других антибиотиков при IAP. [14] Тестирование на чувствительность к антибиотикам изолятов GBS имеет решающее значение для надлежащего выбора антибиотиков при IAP у женщин с аллергией на пенициллин, поскольку резистентность к клиндамицину, наиболее распространенному препарату, используемому (у женщин с аллергией на пенициллин), растет среди изолятов GBS. Соответствующие методологии (включая индуцируемую резистентность к клиндамицину) для тестирования чувствительности к антибиотикам важны, поскольку резистентность к клиндамицину ( резистентность к антимикробным препаратам ) может возникать у некоторых штаммов GBS, которые кажутся восприимчивыми ( чувствительность к антибиотикам ) к клиндамицину в определенных тестах на чувствительность. [8] [12] Для женщин, которые подвержены риску аллергии на пенициллин, в лабораторных заявках должно быть четко указано это обстоятельство, чтобы гарантировать, что лаборатория осведомлена о необходимости тестирования изолятов GBS на чувствительность к клиндамицину. Истинная аллергия на пенициллин встречается редко, предполагаемая частота анафилаксии составляет от одного до пяти эпизодов на 10 000 случаев терапии пенициллином. [40] [41] Пенициллин, введенный женщине без истории аллергии на β-лактамы, имеет риск анафилаксии от 0,04 до 4 на 100 000. Возникает материнская анафилаксия, связанная с синдромом Гийена-Барре, но любая заболеваемость, связанная с анафилаксией, в значительной степени компенсируется снижением частоты случаев синдрома Гийена-Барре-ЭОД. [12]
Считается, что IAP связан с появлением резистентных штаммов бактерий и с увеличением частоты ранних инфекций, вызванных другими патогенами, в основном грамотрицательными бактериями, такими как Escherichia coli . Тем не менее, большинство исследований не обнаружили увеличения частоты раннего сепсиса, не связанного с GBS, связанного с широким использованием IAP. [12] [42] [43] [44] Ни пероральные, ни внутримышечные антибиотики не эффективны для снижения риска GBS-EOD. [14]
Были изучены другие стратегии профилактики синдрома Гийена-Барре-ЭОД, и было предложено интранатальное очищение влагалища хлоргексидином для профилактики синдрома Гийена-Барре-ЭОД, тем не менее, никаких доказательств эффективности этого подхода не было представлено. [12] [14] [45] [46] Тем не менее, в настоящее время не существует подходящего подхода для профилактики позднего неонатального заболевания, вызванного синдромом Гийена-Барре.
Для отбора женщин-кандидатов на IAP используются два способа: подход скрининга на основе культуры и подход, основанный на риске. [47] Подход скрининга на основе культуры определяет кандидатов с использованием нижних вагинальных и ректальных культур, полученных между 35 и 37 неделями беременности (или 36–37), [14] и IAP вводится всем женщинам, колонизированным GBS. Стратегия, основанная на риске, определяет кандидатов на получение IAP по вышеупомянутым факторам риска, которые, как известно, увеличивают вероятность GBS-EOD, без учета того, является ли мать носителем GBS или нет. [4] [12] [48] IAP также рекомендуется женщинам с интранатальными факторами риска, если их статус носительства GBS неизвестен на момент родов, женщинам с бактериурией GBS (при любом количестве колоний) во время беременности и женщинам, у которых ранее был ребенок с GBS-EOD. Подход, основанный на оценке риска, в целом менее эффективен, чем подход, основанный на культуре, [49], поскольку в большинстве случаев синдром Гийена-Барре-Эод развивается среди новорожденных, рожденных от матерей без факторов риска. [12] [24] [50]
IAP не требуется для женщин, перенесших плановое кесарево сечение без родов и с неповрежденными плодными оболочками, независимо от известного статуса носительства GBS. Рекомендации ACOG гласят: [14] «Женщины с положительным результатом пренатальной культуры GBS, перенесшие кесарево сечение до начала родов и с неповрежденными плодными оболочками, не нуждаются в IAP». Эта рекомендация основана на том факте, что дети, рожденные с помощью кесарева сечения до родов, меньше подвержены воздействию GBS во влагалище и имеют более низкие показатели инфицирования GBS. Таким образом, несмотря на рекомендуемый всеобщий ректовагинальный скрининг всех беременных женщин в возрасте от 36 0/7 до 37 6/7 недель, женщины, перенесшие кесарево сечение до родов, не нуждаются в IAP, независимо от результатов скринингового теста. [12] [14] [51]
Регулярный скрининг беременных женщин проводится в большинстве развитых стран, таких как США, Франция, Испания, Бельгия и Канада, и данные показывают снижение случаев GBS-EOD после введения мер скрининга для профилактики GBS-EOD. [18] [52] [53]
Стратегия, основанная на оценке риска, пропагандируется, в частности, в Великобритании и Нидерландах. [18]
Вопрос экономической эффективности обеих стратегий выявления кандидатов на IAP менее ясен, и некоторые исследования показали, что тестирование женщин с низким риском, а также IAP, назначаемый женщинам с высоким риском, и тем, у кого был обнаружен GBS, более экономически эффективен, чем текущая практика в Великобритании (подход, основанный на оценке риска). [54] Другие оценки также показали, что подход, основанный на культуре, более экономически эффективен, чем подход, основанный на оценке риска, для профилактики GBS-EOD. [55] [56]
Сообщалось, что IAP не предотвращает все случаи GBS-EOD; его эффективность оценивается в 80%. Стратегия профилактики, основанная на оценке риска, не предотвращает около 33% случаев без факторов риска. [57] До 90% случаев GBS-EOD можно было бы предотвратить, если бы IAP предлагался всем носителям GBS, выявленным с помощью всеобщего скрининга на поздних сроках беременности, а также матерям в ситуациях с более высоким риском. [58] Если до родов вводится недостаточное количество внутривенных антибиотиков, ребенку можно вводить антибиотики сразу после рождения, хотя данные о том, эффективна ли эта практика, не являются окончательными. [12] [59] [60] [61]
Примерно 10–30% женщин колонизируются GBS во время беременности. Тем не менее, во время беременности колонизация может быть временной, прерывистой или постоянной. [12] Из-за этого статус колонизации GBS у женщин может меняться во время беременности, только посевы, проведенные за ≤5 недель до родов, довольно точно предсказывают статус носительства GBS при родах. [62]
Напротив, если пренатальная культура проводится более чем за 5 недель до родов, она ненадежна для точного прогнозирования статуса носителя GBS при родах. Из-за этого тестирование на колонизацию GBS у беременных женщин сегодня рекомендуется ACOG на 36–37 неделе беременности. [12] [63] Важно отметить, что ACOG теперь рекомендует проводить универсальный скрининг GBS между 36 и 37 неделями беременности, а не на 35–37, как ранее рекомендовал CDC. Эта новая рекомендация предусматривает 5-недельное окно для действительных результатов культуры, которое включает роды, происходящие до гестационного возраста не менее 41 недели. [14]
Клинические образцы, рекомендуемые для культивирования GBS, представляют собой мазки, собранные из нижней части влагалища и прямой кишки через наружный анальный сфинктер . Вагинально-ректальные образцы следует собирать предпочтительно с помощью флокированных тампонов. По сравнению с волокнистыми тампонами эти тампоны высвобождают образцы и микроорганизмы более эффективно, чем обычные волокнистые тампоны. [7] Образец следует собирать, мазая нижнюю часть влагалища (вход влагалища), а затем прямую кишку (т. е. вводя тампон через анальный сфинктер) с использованием того же тампона или двух разных тампонов. Цервикальные, перианальные, периректальные или промежностные образцы неприемлемы, и для сбора образцов не следует использовать зеркало . [12] Образцы (мазки) могут быть взяты медицинскими работниками или собраны матерью самостоятельно после соответствующего обучения. [64] [65] [66] [67]
Эти тампоны следует поместить в непитательную транспортную среду. [7] [12] Если это возможно, образцы следует охладить и отправить в лабораторию как можно скорее. [7] [12] Соответствующие транспортные системы имеются в продаже, и в этих транспортных средах GBS может оставаться жизнеспособным в течение нескольких дней при комнатной температуре. Однако восстановление GBS снижается в течение одного-четырех дней, особенно при повышенных температурах, что может привести к ложноотрицательным результатам. [7] [12] [68]
Образцы (вагинальные, ректальные или вагиноректальные мазки) следует инокулировать в селективный обогащенный бульон (бульон Тодда Хьюитта с селективными антибиотиками), обогащенную культуру. Это включает выращивание образцов в селективной обогащенной бульонной среде для повышения жизнеспособности GBS и одновременного ухудшения роста других встречающихся в природе бактерий. Соответствующие обогащенные бульоны, имеющиеся в продаже, — это бульон Тодда-Хьюитта с гентамицином и налидиксовой кислотой (бульон Бейкера) или с колистином и налидиксовой кислотой (бульон Лима). [6] [7] После инкубации (18–24 часа, 35–37 °C) обогащенный бульон субкультивируют в течение ночи на чашках с кровяным агаром, и колонии, подобные GBS (большие колонии диаметром 3–4 миллиметра, окруженные узкой зоной гемолиза) [6] [7], идентифицируют с помощью теста CAMP или с помощью латексной агглютинации с антисывороткой GBS или MALDI-TOF. [6] [7] [12] [14]
В Великобритании этот метод описан в Стандартах Великобритании по микробиологическим исследованиям Министерства здравоохранения Англии [69].
После инкубации обогатительный бульон также можно пересеять на агаровую среду Гранада , где GBS растет в виде розовато-красных колоний, и дальнейшие идентификационные тесты не требуются [6] [9] [70] [71] После инкубации обогатительный бульон также можно пересеять на хромогенные агары, где GBS растет в виде окрашенных колоний. [12] Тем не менее, колонии, подобные GBS, которые развиваются в хромогенных средах, следует подтверждать как GBS с помощью дополнительных надежных тестов, чтобы избежать неправильной идентификации. [6]
Возможна прямая инокуляция вагинальных и ректальных мазков или вагиноректального мазка в чашку с подходящей питательной средой (кровяной агар, среда Гранада или хромогенная среда). Однако этот метод (минуя этап селективного обогащения бульона) может привести к некоторым ложноотрицательным результатам, и этот подход следует применять только в дополнение к, а не вместо, инокуляции в селективный бульон. [12]
Сегодня в Великобритании обнаружение колонизации GBS с использованием метода обогащенного бульона не предлагается большинством лабораторий, обслуживающих NHS. Тем не менее, внедрение этого теста, по-видимому, является жизнеспособным вариантом. В настоящее время посев на GBS (с использованием обогащенной питательной среды) на 35–37 неделе для определения группы риска у женщин, по-видимому, является наиболее экономически эффективной стратегией. [55] [56] Благотворительная организация Group B Strep Support опубликовала список больниц в Великобритании, которые предлагают обнаружение GBS с использованием метода обогащенного бульона (питательной среды обогащения, ECM). [72] Этот тест также доступен в частном порядке по цене около 35 фунтов стерлингов за тест для домашнего тестирования, и он предлагается частными клиниками. [72] Тест также доступен в частном порядке для почтовой службы по всей Великобритании. [73] [74]
Ни один из существующих тестов на основе культуры не является достаточно точным и быстрым, чтобы его можно было рекомендовать для выявления синдрома Гийена-Барре после начала родов. Посев образцов мазков требует времени для роста бактерий, что означает, что этот тест непригоден для использования в качестве интранатального теста в месте оказания помощи (POCT или прикроватного тестирования). [14]
Альтернативные методы обнаружения GBS в клинических образцах (в виде вагиноректальных мазков) были быстро разработаны, такие как методы, основанные на тестах амплификации нуклеиновых кислот (NAAT), таких как тесты полимеразной цепной реакции (ПЦР) и зонды гибридизации ДНК . Эти тесты также можно использовать для обнаружения GBS непосредственно из бульонной среды после этапа обогащения, избегая субкультуры инкубированного обогащенного бульона на соответствующей агаровой пластине. [6] [12] [75]
Тестирование женщин на колонизацию GBS с использованием вагинальных или ректальных мазков и культивирование их в обогащенной среде не такое быстрое, как тест ПЦР, который проверяет, является ли беременная женщина носителем GBS при родах. Тесты NAAT позволят начать IAP при поступлении в родильное отделение у тех женщин, о которых неизвестно, являются ли они носителями GBS. [12] NAAT для обнаружения носительства GBS, возможно, в будущем станет достаточно точным для руководства IAP. Тем не менее, эта технология обнаружения GBS должна быть улучшена и упрощена, чтобы сделать метод экономически эффективным и полностью полезным в качестве теста по месту оказания медицинской помощи .
Из-за этого эти тесты все еще не могут заменить дородовую культуру для точного определения GBS. [12] [14] [76] [77] POCT для обнаружения носителей GBS дополнительно требует, чтобы родильные отделения предоставляли круглосуточные лабораторные средства, необходимые для проведения быстрого тестирования. Тем не менее, тестирование в месте оказания помощи может использоваться для женщин, которые приходят в роды с неизвестным статусом GBS и без факторов риска для подтверждения использования IAP. [14]
Рабочая группа по профилактическим услугам США и ACOG рекомендуют проводить рутинный скрининг мочи для всех беременных женщин на ранних сроках беременности, даже при отсутствии симптомов со стороны мочевыводящих путей, с целью выявления бессимптомной бактериурии. Как и в случае с ИМП, любые бессимптомные случаи бактериурии (не только СГБ) с высокими показателями КОЕ/мл также, как было показано, вызывают пиелонефрит, низкий вес при рождении и преждевременные роды. [78] Поэтому лечение этих бессимптомных случаев бактериурии антибиотиками во время постановки диагноза так же важно, как и лечение симптоматических ИМП во время беременности, с целью снижения этих рисков. Помимо случаев ИМП СГБ и бессимптомной бактериурии СГБ с высокими показателями КОЕ/мл, беременные женщины с бессимптомной бактериурией СГБ, даже с низкими показателями КОЕ/мл на любом сроке беременности, должны получать ИАП для защиты новорожденного; независимо от результатов ректовагинального скрининга на поздних сроках беременности. Это связано с тем, что бактериурия СГБ, даже бессимптомная, при любом КОЕ/мл является признаком тяжелой аногенитальной колонизации. [14] [79]
Важными факторами успешной профилактики синдрома Гийена-Барре-ЭОД с использованием ИАП и универсального подхода к скринингу являются: [80]
Большинство случаев GBS-EOD происходит у доношенных детей, рожденных от матерей, у которых скрининг показал отрицательный результат на колонизацию GBS, и у недоношенных детей, рожденных от матерей, которые не прошли скрининг, хотя некоторые ложноотрицательные результаты, наблюдаемые в скрининговых тестах GBS, могут быть связаны с ограничениями теста и приобретением GBS между временем скрининга и родами. Это показывает, что в некоторых ситуациях по-прежнему необходимы улучшения в методах сбора и обработки образцов для выявления GBS. Ложноотрицательный скрининговый тест, наряду с отсутствием IAP у женщин, рожающих недоношенных с неизвестным статусом колонизации GBS, и назначением неподходящих агентов IAP женщинам с аллергией на пенициллин, являются причиной большинства упущенных возможностей для профилактики случаев GBS-EOD. [80] Инфекции GBS-EOD, представленные у младенцев, чьи матери прошли скрининг как отрицательные по культуре GBS, вызывают особую тревогу и могут быть вызваны неправильным сбором образцов, задержкой в обработке образцов, неправильными лабораторными методами, недавним применением антибиотиков или колонизацией GBS после проведения скрининга. [50] [80] [81] [82] [83]
Домашние роды становятся все более популярными в Великобритании и других странах. [84] [85] Рекомендации по профилактике инфекций GBS у новорожденных одинаковы как для домашних родов, так и для родов в больнице. Около 25% женщин, рожающих дома, вероятно, переносят GBS во влагалище во время родов, не зная об этом, и может быть сложно правильно следовать рекомендациям IAP и справиться с риском тяжелой аллергической реакции на антибиотики вне больницы. [86] Руководства RCOG и ACOG предполагают, что роды в бассейне не противопоказаны для носителей GBS, которым была предложена соответствующая IAP, если нет других противопоказаний к погружению в воду [14] [87]
По оценкам, в 2020 году у 19,7 миллионов беременных женщин во всем мире была ректовагинальная колонизация GBS. У 400 000 детей наблюдалось неонатальное заболевание GBS, что привело к 232 000 случаев GBS-EOD, 162 000 случаев GBS-LOD и у 37 100 детей развились нарушения нейроразвития. Было подсчитано, что произойдет 90 000 случаев смерти новорожденных, большинство из которых в странах к югу от Сахары [88] [89]
В 2000–2001 годах сообщаемая общая заболеваемость инфекцией GBS у новорожденных в Великобритании составляла 0,72 на 1000 живорождений, 0,47 на 1000 для GBS-EOD и 0,25 на 1000 для GBS-LOD. Наблюдались очень выраженные колебания, заболеваемость в Шотландии составляла 0,42 на 1000, в то время как в Северной Ирландии она составляла 0,9 на 1000 живорождений. [90] [91] Тем не менее, это может быть серьезной недооценкой реальной заболеваемости инфекциями GBS у новорожденных. Правдоподобным объяснением этого является то, что значительное количество младенцев с вероятной GBS-EOD имели отрицательные культуры в результате предыдущего лечения матери антибиотиками, которые подавляют рост GBS в культурах крови и спинномозговой жидкости, но не маскируют клинические симптомы. [92] [93] Данные, собранные проспективно для новорожденных, которым требовался септический скрининг в первые 72 часа жизни в Великобритании в 2003 году, показали объединенный уровень определенной и вероятной инфекции GBS-EOD в 3,6 на 1000 живорождений. [94] Другое исследование эпидемиологии инвазивных инфекций GBS в Англии и Уэльсе сообщило о росте заболеваемости GBS-EOD между 2000 и 2010 годами с 0,28 до 0,41 на 1000 живорождений. Показатели GBS-LOD также увеличились между 1991 и 2010 годами с 0,11 до 0,29 на 1000 живорождений в Англии и Уэльсе. [95]
В прошлом частота GBS-EOD составляла от 0,7 до 3,7 на тысячу живорождений в США [4] и от 0,2 до 3,25 на тысячу в Европе [18] . В 2008 году после широкого использования дородового скрининга и интранатальной антибиотикопрофилактики Центры по контролю и профилактике заболеваний в США сообщили о частоте 0,28 случаев GBS-EOD на тысячу живорождений в США. С 2006 по 2015 год частота GBS EOD снизилась с 0,37 до 0,23 на тысячу живорождений в США. [32] [96] В отличие от GBS-EOD, заболеваемость GBS-LOD оставалась стабильной в США на уровне 0,31 на 1000 живорождений с 2006 по 2015 год. [32] В 2021 году в Соединенных Штатах CDC сообщил о заболеваемости GBS-EOD 0,21 на 1000 живорождений и 0,23 на тысячу живорождений GBS-LOD. В 2021 году было оценено в общей сложности 1970 случаев смерти ((0,59/100 000 населения) в США, вызванных неонатальными инфекциями GBS. [97] В 2021 году было оценено, что 226 младенцев (49 на 100 000) в Соединенных Штатах имели клинически значимую инфекцию GBS, и что примерно 11 (2,4%) из этих случаев закончились смертью. [97]
В Испании заболеваемость вертикальным сепсисом GBS снизилась на 73,6%, с 1,25/1000 живорождений в 1996 году до 0,33/1000 в 2008 году. [98] В Испании в районе Барселоны в период с 2004 по 2010 год заболеваемость GBS-EOD составляла 0,29 на тысячу живых новорожденных, без существенных различий по годам. Уровень смертности составил 8,16%. [50] [99] «Grupo de Hospitales Fundación Castrillo» также сообщила в 2018 году в Испании о заболеваемости GBS-EOD 0,17/1000 живорождений и 0,05/1000 GBS LOD. [100]
Во Франции с 2001 года также было отмечено быстрое снижение заболеваемости неонатальными инфекциями GBS после широкого использования IAP с 0,7 до 0,2 на 1000 рождений в период с 1997 по 2006 год. Заболеваемость инфекциями GBS-EOD в 2011 году составила 0,2 на 1000 живорождений. [101] [102]
С 2012 года частота неонатальной инфекции GBS оценивалась в 0,53 на 1000 рождений в Европейском регионе, 0,67 в Америке и 0,15 в Австралазии. Страны, сообщившие об отсутствии использования IAP, имели в 2,2 раза более высокую заболеваемость GBS-EOD по сравнению с теми, кто сообщил об использовании IAP. [31] [91]
Оценки заболеваемости GBS-EOD на 1000 рождений различаются между странами: Япония 0,09, Панама 0,58, Гонконг 0,76 и 2,35 в Доминиканской Республике. В целом, самые высокие показатели в Африке и самые низкие в Азии. Оценка глобальной заболеваемости GBS LOD составляет 0,26 случаев на 1000 живорождений. [103]
Было подсчитано, что инфекции GBS ежегодно вызывают по меньшей мере 409 000 случаев заболеваний у матерей, плода и младенцев, а также 147 000 случаев мертворождения и смерти младенцев во всем мире. [104]
Ниже приведены оценки вероятности того, что ребенок будет инфицирован неонатальной инфекцией СГБ, если не будут приняты профилактические меры и не будет никаких других факторов риска: [105]
Если женщине, являющейся носителем СГБ, назначают ИАП во время родов, риск для ребенка значительно снижается:
Королевский колледж акушеров и гинекологов (RCOG) впервые выпустил свое руководство Green Top № 36 «Профилактика раннего неонатального стрептококкового заболевания группы B» в 2003 году. В этом руководстве четко указано: «Плановый бактериологический скрининг всех беременных женщин на предмет антенатального носительства GBS не рекомендуется, и вагинальные мазки не следует брать во время беременности, если для этого нет клинических показаний». Однако «Интранатальная антибиотикопрофилактика должна быть предложена, если GBS обнаружен в вагинальном мазке во время текущей беременности». [ необходима цитата ] Руководство RCOG 2003 года было пересмотрено в сентябре 2017 года без существенных изменений. [39] В Великобритании Королевский колледж акушеров и гинекологов (RCOG) по-прежнему не рекомендует проводить бактериологический скрининг всех беременных женщин на предмет антенатального носительства GBS в своих рекомендациях 2017 года, хотя в них указано, что женщинам, у которых в предыдущей беременности был положительный результат теста, и ребенок был здоров, следует предложить возможность пройти тестирование и получить интранатальную антимикробную профилактику или пройти IAP без тестирования. [87] Тем не менее, указано, что если носительство GBS обнаружено случайно или путем преднамеренного тестирования, женщинам следует предложить IAP. И что всем беременным женщинам следует предоставить соответствующую информационную брошюру о GBS и беременности (опубликованную в декабре 2017 года). [106] Вместо этого женщин лечат в соответствии с их риском в родах. IAP предлагается роженицам, у которых в моче или вагинальных/ректальных мазках, взятых во время беременности, был обнаружен GBS, а также женщинам, у которых ранее был ребенок с заболеванием GBS. Немедленная индукция родов и IAP должны быть предложены всем женщинам с преждевременным разрывом плодных оболочек на 37 неделе беременности или более, женщинам, у которых разрыв плодных оболочек произошел более чем через 18 часов, и тем, у кого наблюдается лихорадка во время родов. [ необходима ссылка ] Женщинам, у которых наблюдается лихорадка во время родов, следует предложить антибиотики широкого спектра действия, включая антибиотик, подходящий для профилактики EOD-GBS. [87] Также было предложено тестирование беременных женщин для выявления носителей GBS и назначение IAP тем, у кого есть GBS, и женщинам с высоким риском, и этот подход значительно более экономически эффективен, чем использование подхода с учетом факторов риска. В одной исследовательской работе была рассчитана ожидаемая чистая выгода для правительства Великобритании от такого подхода в размере около 37 миллионов фунтов стерлингов в год по сравнению с текущим подходом RCOG . [54] [55]
Национальный институт здравоохранения и медицинского обслуживания Великобритании (NICE) не рекомендует проводить рутинное тестирование на синдром Гийена-Барре, заявляя: «Беременным женщинам не следует предлагать рутинный дородовой скрининг на стрептококк группы B, поскольку доказательства его клинической и экономической эффективности остаются неопределенными». [107]
Это руководство было обновлено в 2021 году, тем не менее, скрининг и тестирование на GBS вышли за рамки этого нового руководства. Однако в руководстве говорится, что «На первом дородовом (регистрационном) приеме (и позже, если это уместно), обсудите и дайте информацию о .... инфекциях, которые могут повлиять на ребенка во время беременности или во время родов (таких как стрептококк группы B, простой герпес и цитомегаловирус)» [108] Тем не менее, руководство NICE по неонатальным инфекциям гласит: «Предлагайте антибиотики во время родов женщинам, которые:
Текущая позиция Национального комитета по скринингу Великобритании в отношении СГБ заключается в следующем: «скрининг не должен предлагаться всем беременным женщинам». [110] Это решение подверглось резкой критике со стороны благотворительной организации Group B Strep Support, поскольку оно игнорирует как пожелания общественности, так и растущие показатели заболеваемости СГБ в Великобритании. [111]
Рекомендации по IAP для профилактики перинатального заболевания GBS были выпущены CDC в 1996 году. В этих рекомендациях рекомендовалось использовать один из двух методов профилактики: либо подход, основанный на оценке риска, либо подход скрининга на основе культуры. [47] CDC выпустил обновленные рекомендации в 2002 году; эти рекомендации рекомендовали универсальный скрининг на основе культуры всех беременных женщин на 35–37 неделе беременности для оптимизации выявления женщин, которым необходимо получить IAP. CDC также рекомендовал, чтобы женщины с неизвестным статусом колонизации GBS на момент родов лечились в соответствии с наличием интранатальных факторов риска. Благодаря этой стратегии в США наблюдалось значительное снижение заболеваемости GBS-EOD. [112]
CDC снова выпустил обновленные рекомендации в 2010 году, однако основы профилактики в рекомендациях CDC 2010 года остались неизменными. [12] Ниже приведены основные дополнения к рекомендациям 2010 года:
В 2018 году задача пересмотра и обновления руководств по профилактике СГБ была передана от CDC в ACOG , Американскую академию педиатрии , AAP и Американское общество микробиологии , ASM. [14] [113] Комитет ACOG выпустил обновленный документ о профилактике раннего начала заболевания стрептококком группы B у новорожденных в 2019 году. [14] Руководство ACOG заменило руководство 2010 года, опубликованное CDC. [12] Этот документ не вносит важных изменений в руководство CDC. Ключевыми мерами, необходимыми для профилактики раннего начала заболевания СГБ у новорожденных, по-прежнему являются всеобщий пренатальный скрининг путем культивирования СГБ из мазков, собранных из нижней части влагалища и прямой кишки, правильный сбор и микробиологическая обработка образцов и надлежащее проведение интранатальной антибиотикопрофилактики. Также важно отметить, что ACOG рекомендовал проводить всеобщий скрининг СГБ между 36 и 37 неделями беременности. Эта новая рекомендация предусматривает 5-недельное окно [62] для действительных результатов культивирования, которое включает роды, происходящие до гестационного возраста не менее 41 недели. В 2019 году Американская академия педиатрии (AAP) опубликовала новый клинический отчет — Ведение младенцев с риском неонатального заболевания GBS. [22] Этот клинический отчет AAP заменяет руководства 2010 года, опубликованные CDC. [12] Американское общество микробиологии (ASM) опубликовало в 2021 году обновленные руководства по лабораторным процедурам для обнаружения и идентификации GB. В этих новых рекомендациях ASM культура по-прежнему остается основным моментом для обнаружения GBS. Учитывая, что надежный скрининговый тест важнее быстрого и менее точного результата, ASM также заявляет, что приемлемо использовать идентификацию GBS на основе NAAT из обогащенного бульона (после 18-24-часовой инкубации) с высокой чувствительностью, и что для проведения теста доступны одобренные FDA коммерческие анализы. [8]
Однако не рекомендуется использовать NAAT-тесты непосредственно из образца из-за низкой чувствительности с высоким уровнем ложноотрицательных результатов. [8] ACOG положительно относится к использованию NAAT и заявляет, что NAAT-тестирование с использованием обогащенного бульона является разумным, имеет более высокую чувствительность для обнаружения GBS, чем культура, и, следовательно, является, возможно, лучшим тестом. [14] Эта рекомендация основана на данных, подтверждающих ценную полезность теста. [114] ACOG также допускает использование NAAT без обогащенного бульона, [14] несмотря на высокий уровень ложноотрицательных результатов, в качестве быстрого теста POCT (места оказания помощи) для женщин, которые рожают с неизвестным статусом GBS. Однако и ASM, и ACOG признают, что тестирование на основе NAAT не имеет возможности обеспечить чувствительность к антибиотикам, необходимую для определения режима IAP, необходимого для женщин с аллергией на пенициллин. [8] [14]
Национальные рекомендации в большинстве стран рекомендуют использовать универсальный скрининг беременных женщин на поздних сроках беременности для выявления носительства GBS и использования IAP у всех колонизированных матерей. Например, Канада, [115] Испания, [116] Швейцария, [117] Германия, [118] Польша, [119] Чешская Республика, [120] Франция, [121] Бельгия, [122] Аргентина [123] и Колумбия [124]
Напротив, рекомендации на основе факторов риска были выпущены (в дополнение к Великобритании [87] ) в Нидерландах, [125] Королевский австралийский и новозеландский колледж акушеров и гинекологов рекомендует, чтобы все родильные отделения имели установленный план профилактики неонатального заболевания GBS. Тем не менее, не рекомендуется четко определенная стратегия профилактики. [126]
GBS также является важным инфекционным агентом, способным вызывать инвазивные инфекции у взрослых. Серьезные опасные для жизни инвазивные инфекции GBS все чаще распознаются у пожилых людей и у лиц, страдающих от таких основных заболеваний, как диабет, цирроз и рак. [103] [127] Инфекции GBS у взрослых включают инфекцию мочевыводящих путей, инфекцию кожи и мягких тканей ( инфекция кожи и структур кожи ), бактериемию без фокуса, остеомиелит, менингит и эндокардит . [3] Инфекция GBS у взрослых может быть серьезной, и смертность среди взрослых выше, чем среди новорожденных. [103]
В целом, пенициллин является антибиотиком выбора для лечения инфекций GBS. Эритромицин или клиндамицин не следует использовать для лечения пациентов с аллергией на пенициллин, если только не подтверждена восприимчивость инфицирующего изолята GBS к этим агентам. Гентамицин плюс пенициллин (для синергии антибиотиков ) можно использовать у пациентов с опасными для жизни инфекциями GBS. [127] [128] [129]
Инвазивные инфекции GBS у небеременных взрослых вызывают растущую трудность в большинстве развитых стран. Вакцинация для предотвращения инфекции GBS может стать решающим подходом для предотвращения заболевания GBS у взрослых. [130] [131]
Синдром токсического шока (СТШ) — острое мультисистемное опасное для жизни заболевание, приводящее к полиорганной недостаточности. Тяжесть этого заболевания часто требует немедленного медицинского лечения. СТШ вызывается в первую очередь некоторыми штаммами Staphylococcus aureus и Streptococcus pyogenes , которые продуцируют экзотоксины. Тем не менее, инвазивная инфекция GBS может быть осложнена, хотя и довольно редко, синдромом, подобным стрептококковому токсическому шоку (СТШ). [132]
Хотя введение национальных рекомендаций по скринингу беременных женщин на носительство GBS и использование IAP значительно снизило бремя заболевания GBS-EOD, это не оказало никакого влияния на профилактику ни GBS-LOD у младенцев, ни инфекций GBS у взрослых. [133] По этой причине, если бы была доступна эффективная вакцина против GBS, она стала бы эффективным средством контроля не только заболевания GBS у младенцев, но и инфекций у взрослых. [131]
Существует ряд проблем с назначением антибиотиков женщинам в родах. Такие риски воздействия антибиотиков включают тяжелые аллергические реакции и трудности скрининга беременных женщин на GBS. Если бы беременным женщинам можно было сделать прививку от GBS, это могло бы потенциально предотвратить большинство случаев GBS без необходимости приема антибиотиков или скрининга. Вакцинация считается идеальным решением для предотвращения не только раннего и позднего начала заболевания, но и инфекций GBS у взрослых из группы риска. [134]
Разработка вакцин против GBS для иммунизации матерей была определена Всемирной организацией здравоохранения в качестве приоритетной на основе высокой неудовлетворенной потребности. [135] [136] Эффективная против GBS материнская вакцина могла бы оказать большое влияние на заболеваемость и смертность новорожденных. Было подсчитано, что эта вакцина могла бы предотвратить около 127 000 случаев GBS-EOD, 87 000 случаев GBS-LOD, 31 000 смертей и 18 000 случаев нарушений нейроразвития. [137] Еще в 1976 году [29] было показано, что низкие уровни материнских антител против капсульного полисахарида GBS коррелируют с восприимчивостью к GBS-EOD и GBS-LOD. Специфические для матери антитела, переданные от матери новорожденному, были способны обеспечить защиту младенцев от инфекции GBS. [138] Капсульный полисахарид GBS, который является важным фактором вирулентности, также является отличным кандидатом для разработки эффективной вакцины. [18] [138] [139] [140 ]
Вакцины на основе белка GBS также находятся в стадии разработки и являются весьма многообещающими, поскольку они смогут защитить от инфекции GBS любого серотипа. [131] [141] [142] [143] [144] [145]
В настоящее время лицензирование вакцин против СГБ затруднено из-за сложности проведения клинических испытаний на людях из-за низкой заболеваемости новорожденных СГБ. [18] [140] [146] Тем не менее, хотя исследования и клинические испытания по разработке эффективной вакцины для профилактики инфекций СГБ ведутся, по состоянию на 2023 год вакцины не существует. [141] [144] [147] [148] [149] [150]
По состоянию на зиму 2023 года существует две вакцины на стадии клинической разработки для профилактики инвазивного заболевания GBS. Гексавалентная вакцина GBS от Pfizer [PF-06760805], GBS6 , представляет собой конъюгированный полисахарид CRM197, содержащий 6 наиболее распространенных серотипов GBS во всем мире. [151] Вакцина, которая в настоящее время проходит планирование фазы 3, может обеспечить значимую защиту от инвазивного заболевания у новорожденных и младенцев на основе результатов ее иммуногенности в исследовании фазы 2 [NCT03765073], которые были опубликованы в New England Journal of Medicine. [148] Датская компания MinervaX ApS также разрабатывает вакцину GBS на основе белка (GBS-NN/NN2), разработанную с использованием слияний высокоиммуногенных и защитных белковых доменов из выбранных поверхностных белков GBS (семейство альфа-подобных белков). [152] Вакцина, которая, как было показано, безопасна и иммуногенна для матерей, также готовится к планированию Фазы 3. MinervaX также завершила набор на свое исследование Фазы 1 для взрослых [NCT05782179], и первые иммунологические данные ожидаются в четвертом квартале 2023 года. Недавний анализ мирового спроса на вакцины против СГБ оценил потенциальный рынок вакцинации матерей и взрослых против СГБ в 798 млн долл. США в год и 2023 млн долл. США в год в 2034 году соответственно. [153] Другие доклинические программы вакцинации против СГБ реализуются биотехнологическими компаниями из США Omniose и Inventprise. [ необходима цитата ]
Июль был признан Международным месяцем осведомленности о стрептококках группы B [154], время, когда информация о стрептококках группы B, предназначенная для семей и медицинских работников, распространяется, в основном в Великобритании и США. В Великобритании этим руководит Group B Strep Support. [155]
Синдром Гийена-Барре был обнаружен у многих млекопитающих и других животных, таких как верблюды, собаки, кошки, тюлени, дельфины и крокодилы. [156]
У крупного рогатого скота GBS вызывает мастит, инфекцию вымени. Он может вызывать острое лихорадочное заболевание или подострое, более хроническое заболевание. Оба приводят к снижению выработки молока (отсюда его название: agalactiae, что означает «нет молока»). [157] GBS может выживать и сохраняться в молочных железах коров, образуя биопленки. [158] Мастит, связанный с GBS, может оказывать важное влияние на количество и качество производимого молока, а также связан с повышенным количеством соматических клеток и общим количеством бактерий в молоке. [159] Вспышки в стадах являются обычным явлением, и это имеет большое значение для молочной промышленности. [160] Программы по снижению воздействия GBS были реализованы во многих странах [157] Такие программы привели к почти полному устранению мастита, вызванного GBS у крупного рогатого скота, в Великобритании, Северной Европе и Канаде. Тем не менее, в последние годы в Северной Европе было отмечено повторное появление мастита крупного рогатого скота, вызванного СГБ, что позволяет предположить проникновение человеческих линий в популяцию крупного рогатого скота вследствие обратной зоонозной передачи. [161]
GBS также является важным патогеном для различных видов рыб, что приводит к серьезным экономическим потерям для многих видов рыб во всем мире. GBS вызывает серьезные эпидемии у разводимой рыбы, вызывая сепсис и внешние и внутренние кровотечения. Инфекция GBS была зарегистрирована у дикой и содержавшейся в неволе рыбы и была связана с эпизоотиями во многих странах. [162] [163] [164] Вспышки GBS в аквакультуре тиляпии могут привести к серьезному заболеванию со смертностью до 80%. [163] Также сообщалось о вспышке инвазивного заболевания, передающегося через пищу, у человека, вызванного употреблением в пищу тиляпии, инфицированной GBS [163] Вакцины для защиты рыб от инфекций GBS находятся в стадии разработки. [165] [166] [167]
{{cite journal}}
: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка ){{cite journal}}
: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка ){{cite journal}}
: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка ){{cite journal}}
: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка ){{cite journal}}
: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка ){{cite journal}}
: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка ){{cite journal}}
: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка ){{cite journal}}
: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка ){{cite journal}}
: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка ){{cite journal}}
: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка ){{cite web}}
: CS1 maint: числовые имена: список авторов ( ссылка ){{cite journal}}
: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка ){{cite journal}}
: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка ){{cite journal}}
: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка ){{cite journal}}
: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка ){{cite journal}}
: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка ){{cite journal}}
: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка ){{cite journal}}
: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )