Клетки 3T3 представляют собой несколько линий клеток мышиных эмбриональных фибробластов . Первоначальная линия клеток 3T3 (3T3-Swiss albino) была создана в 1962 году двумя учеными, работавшими тогда на кафедре патологии в Медицинской школе Нью-Йоркского университета , Джорджем Тодаро и Говардом Грином . Тодаро и Грин первоначально получили свои клетки 3T3 из ткани эмбриона мыши Swiss albino. [1] Позднее, занимая должность главного исследователя в Национальном институте рака в Бетесде, штат Мэриленд , Тодаро повторил процедуру выделения из эмбриона мыши NIH Swiss со своими студентами и создал линию клеток NIH-3T3. [2]
Номенклатура
Обозначение «3T3» относится к аббревиатуре «3-дневный перенос, инокулят».3 × 10 5 клеток». Эта клеточная линия была первоначально создана из первичных клеток мышиных эмбриональных фибробластов, которые культивировались по назначенному протоколу, так называемому «протоколу 3T3». Первичные клетки мышиных эмбриональных фибробластов переносились («T») каждые 3 дня (первые «3») и инокулировались при жесткой плотности3 × 10 5 клеток на чашку 20 см 2 (вторая «3») непрерывно. [2] Спонтанно иммортализованные клетки со стабильной скоростью роста были установлены после 20–30 поколений в культуре, и затем названы клетками «3T3». С тех пор было установлено несколько линий клеток с этим прокотолом: [3]
3T3-Swiss albino, оригинальная клеточная линия 1962 года
Swiss 3T3 может быть ингибирован темазепамом и другими бензодиазепинами. Эти клетки также контактно ингибируются. Клетки чувствительны к образованию очагов вируса саркомы и лейкемии. Клетки 3T3 могут быть трансформированы SV40 и некоторыми другими полиомавирусами. [6]
Характеристики культуры
Прилипшие клетки растут как монослой. Сливающийся монослой дает 40000 клеток/см 2 . [7]
Выражение
Лизофосфатидилхолин (лизо-PC) индуцирует активность AP-1 и активность N-концевой киназы c-jun (JNK1) посредством пути, независимого от протеинкиназы C. [8]
Цитогенетика
Клетки мыши 3T3 являются гипертриплоидными. Модальное число хромосом составляет 68, что встречается в 30% клеток. Более высокие плоидности встречаются с гораздо меньшей частотой — 2,4%. [7]
Ссылки
^ Todaro, GJ; Green, H (1963). «Количественные исследования роста клеток эмбриона мыши в культуре и их развития в установленные линии». J. Cell Biol . 17 (2): 299–313. doi :10.1083/jcb.17.2.299. PMC 2106200. PMID 13985244 .
^ ab "Создание линии клеток 3T3, гипотеза онкогена и лошади". www.asbmb.org . Получено 28.07.2020 .
^ Capes-Davis, Amanda; Freshney, R. Ian (2021). Культура животных клеток Freshney: Руководство по базовой технике и специализированным приложениям. John Wiley & Sons. стр. 611. ISBN978-1-119-51304-9.
^ Rheinwatd, James G.; Green, Howard (ноябрь 1975 г.). «Серийное культивирование штаммов человеческих эпидермальных кератиноцитов: образование кератинизиновых колоний из отдельных клеток». Cell . 6 (3): 331–343. doi :10.1016/S0092-8674(75)80001-8. PMID 1052771. S2CID 53294766.
^ Грин, Ховард; Кехинде, Оланийи (март 1974 г.). «Сублинии клеток мыши 3T3, которые накапливают липиды». Cell . 1 (3): 113–116. doi :10.1016/0092-8674(74)90126-3.
^ Происхождение, характеристики, экспрессия и цитогенетика клеточной линии NIH 3T3