stringtranslate.com

Клонирование методом разбавления

Клонирование методом разбавления или клонирование методом предельного разбавления [1] [2] описывает процедуру получения популяции моноклональных клеток, начиная с поликлональной массы клеток. Это достигается путем создания серии увеличивающихся разведений родительской (поликлональной) культуры клеток. Изготавливается суспензия родительских клеток. Затем производятся соответствующие разбавления в зависимости от количества клеток в исходной популяции, а также жизнеспособности и характеристик клонируемых клеток. После получения конечных разведений аликвоты суспензии высеваются [1] или помещаются в лунки [2] и инкубируются. Если все работает правильно, будет получена колония моноклональных клеток. Приложения для этой процедуры включают клонирование паразитов , [3] Т-клеток , [4] трансгенных клеток, [5] макрофагов . [6] и гемопоэтических стволовых клеток . [7]

Ссылки

  1. ^ ab Freshney, R. Ian (2010). Культура клеток животных: руководство по базовой технике и специализированным приложениям (6-е изд.). Hoboken, NJ: Wiley-Blackwell. стр. 208–211. ISBN 9780470528129.
  2. ^ ab Davis, John M, ed. (2011). Культура клеток животных . Oxford: Wiley-Blackwell. стр. 239–240. ISBN 978047066658-6.
  3. ^ Баттерворт, Элис С.; Робертсон, Алан Дж.; Хо, Мей-Фонг; Гаттон, Мишель Л.; Маккарти, Джеймс С.; Тренхолм, Кэтрин Р. (2011). «Улучшенный метод проведения анализов предельного разбавления для клонирования паразитов Plasmodium falciparum in vitro». Malaria Journal . 10 (1): 95. doi : 10.1186/1475-2875-10-95 . ISSN  1475-2875. PMC 3089786. PMID 21496350  . 
  4. ^ Раут, Намита; Элс, Джеймс Г.; Юэ, Саймон; Конноль, Мишель; Эксли, Марк А.; Каур, Амитиндер (2 июля 2010 г.). «Гетерогенность фенотипа и функции CD8+ и CD4/CD8 двойных отрицательных подмножеств естественных Т-киллеров у дымчатых мангабеев». Журнал медицинской приматологии . 39 (4): 224–234. doi :10.1111/j.1600-0684.2010.00431.x. PMC 2904642. PMID  20618588 . 
  5. ^ Лилиенфельд, Бенджамин Г.; Крю, Марк Д.; Форте, Пьетро; Бауманн, Беттина К.; Зеебах, Йорг Д. (1 марта 2007 г.). «Трансгенная экспрессия тримера одной цепи HLA-E защищает эндотелиальные клетки свиньи от цитотоксичности, опосредованной естественными клетками-киллерами человека». Ксенотрансплантация . 14 (2): 126–134. doi :10.1111/j.1399-3089.2007.00378.x. PMID  17381687. S2CID  1433274.
  6. ^ Seki, Yoshihiro; Suzuki, Satoshi O.; Masui, Kenta; Harada, Shiori; Nakamura, Seiji; Kanba, Shigenobu; Iwaki, Toru (1 июня 2011 г.). «Простой и высокопродуктивный метод подготовки культур микроглии крыс с использованием пластиковой пленки Aclar». Neuropathology . 31 (3): 215–222. doi :10.1111/j.1440-1789.2010.01163.x. PMID  21092060. S2CID  26016732.
  7. ^ Sieburg, Hans B; Cho, Rebecca H; Muller-Sieburg, Christa E (2002). «Анализ предельного разведения для оценки частоты гемопоэтических стволовых клеток: неопределенность и значимость». Exp Hematol . 39 (12): 1436–1443. doi : 10.1016/s0301-472x(02)00963-3 – через ISEH.

Внешние ссылки