Коагулаза — это белковый фермент , вырабатываемый несколькими микроорганизмами , который обеспечивает преобразование фибриногена в фибрин . В лаборатории его используют для различения различных типов изолятов стафилококка . Важно отметить, что S. aureus обычно является коагулазо-положительным, а это означает, что положительный тест на коагулазу будет указывать на присутствие S. aureus или любого из других 11 коагулазо-положительных стафилококков . [1] Отрицательный тест на коагулазу вместо этого покажет наличие коагулазонегативных организмов, таких как S. epidermidis или S. saprophyticus . Однако теперь известно, что не все S. aureus являются коагулазо-положительными. [2] [3] В то время как коагулазо-положительные стафилококки обычно являются патогенными , коагулазонегативные стафилококки чаще связаны с оппортунистической инфекцией . [4]
Его также производит Yersinia pestis . [5]
Коагулаза реагирует с протромбином в крови. Образующийся комплекс называется стафилотромбином , который позволяет ферменту действовать как протеаза , преобразуя фибриноген, белок плазмы, вырабатываемый печенью, в фибрин. Это приводит к свертыванию крови. Коагулаза прочно связана с поверхностью бактерии S. aureus и при контакте с кровью может покрывать ее поверхность фибрином. Сгусток фибрина может защитить бактерию от фагоцитоза и изолировать ее от других защитных сил хозяина. [6] Таким образом, фибриновая оболочка может сделать бактерии более вирулентными. Связанная коагулаза является частью более крупного семейства белков-адгезинов MSCRAMM .
Коагулазный тест традиционно используется для дифференциации золотистого стафилококка от коагулазонегативного стафилококка . S.aureus производит две формы коагулазы (т.е. связанную коагулазу и свободную коагулазу). Связанная коагулаза, также известная как «фактор слипания» , может быть обнаружена путем проведения слайд-коагулазного теста, а свободная коагулаза может быть обнаружена с помощью пробирочного теста на коагулазу.
Слайд-тест на коагулазу проводят с отрицательным контролем, чтобы исключить аутоагглютинацию. Две капли физиологического раствора наносятся на предметное стекло, помеченное номером образца: Тест (Т) и Контроль (С). Две капли физиологического раствора эмульгируются с тестируемым организмом с помощью проволочной петли, прямой проволоки или деревянной палочки. Каплю плазмы ( рекомендуется кроличья плазма, антикоагулированная ЭДТА ) [7] помещают на каплю инокулированного физиологического раствора, соответствующую тесту, и хорошо перемешивают, затем осторожно покачивают предметное стекло в течение примерно 10 секунд.
Если тест на коагулазу на предметном стекле отрицательный, в качестве подтверждения следует провести пробирочный тест. Слипание обеих капель является признаком аутоагглютинации, поэтому следует провести пробирочный тест. Пробирочный тест не проводится в каждом учреждении, но большая часть результата зависит от лабораторных культур крови.
В пробирочном тесте используется кроличья плазма , заражённая колонией стафилококка (т.е. грамположительными кокками, которые являются каталазоположительными ). Затем пробирку инкубируют при 37°С в течение 1,5 часов. Если результат отрицательный, то инкубацию продолжают до 18 часов.
