Лиаза фотопродукта спор ( EC 4.1.99.14 SP лиаза , SPL , SplB , SplG ) — радикальный фермент SAM , который восстанавливает сшивку ДНК оснований тимина, вызванную УФ-излучением . Существует несколько типов сшивки тимина, но SPL нацелен конкретно на 5-тиминил-5,6-дигидротимин , который также называется фотопродуктом споры (SP). [1] [2] Фотопродукт споры является преобладающим типом сшивки тимина в прорастающих эндоспорах, поэтому SPL уникален для организмов, которые производят эндоспоры, таких как Bacillus subtilis . [3] Другие типы сшивки тимина, такие как циклобутановые пиримидиновые димеры (CPD) и пиримидиновые (6-4) пиримидоновые фотопродукты (6-4PPs), реже образуются в эндоспорах. Эти различия в сшивании ДНК являются функцией различной структуры ДНК. Геномная ДНК споры содержит много связывающих ДНК белков, называемых малыми кислоторастворимыми белками, [4] которые изменяют ДНК с традиционной конформации B-формы на конформацию A-формы. [5] [6] Считается, что это различие в конформации является причиной того, что спящие споры преимущественно накапливают SP в ответ на УФ-излучение, а не другие формы сшивания. [1] [5] [6] Споры не могут восстанавливать сшивание, находясь в состоянии покоя, [3] вместо этого SP восстанавливаются во время прорастания, чтобы позволить вегетативной клетке нормально функционировать. [7] Если не восстанавливать, фотопродукт споры и другие типы сшивания могут вызывать мутации, блокируя транскрипцию и репликацию после точки сшивания. [3] Механизм восстановления, использующий лиазу фотопродукта споры, является одной из причин устойчивости некоторых бактериальных спор.
Механизм, с помощью которого функционирует SPL, еще не полностью изучен [8], хотя известно, что он катализирует светонезависимую репарацию [8] фотодимера 5-тиминил-5,6-дигидротимина , сшивающего посредством серии радикальных реакций, чтобы вернуть два функциональных тиминовых кольца [9] [3], как показано на рисунке ниже. SPL является частью семейства радикальных ферментов SAM, поэтому известно, что он имеет консервативные аспекты своей структуры и механизма, которые позволяют характеризовать его как радикальный фермент SAM. [8] Радикальные ферменты SAM имеют консервативный мотив цистеина, кластер железа и серы внутри мотива цистеина, а также S-аденозил-L-метионин (SAM) в качестве кофактора. [8] Общий радикальный механизм SAM включает восстановление кластера железа и серы внутри фермента и передачу электрона кофактору (SAM), который расщепляет часть структуры и образует 5'-дезоксиаденозильный радикал. [8] Этот 5'-дезоксиаденозильный радикал затем удаляет атом водорода из субстрата, образуя 5'-дезоксиаденозин и производя радикал на субстрате, который перестраивается, образуя продукт. [8] Учитывая, что полный механизм функции SPL полностью не охарактеризован, будущие исследования, вероятно, будут сосредоточены на выяснении этого процесса.
Спороспецифическая фотопродуктовая лиаза является частью одного из двух основных путей, которые используются для восстановления поперечно связанного 5-тиминил-5,6-дигидротимина, вызванного УФ-излучением: специфическая для спор система репарации ДНК (которая использует спороспецифическую фотопродуктовую лиазу) и общий путь эксцизионной репарации нуклеотидов (NER). [7] [8] Спороспецифическая система репарации ДНК специфична для SP, тогда как NER способна восстанавливать другие типы димеров тимина, такие как CPD и 6-4PP. [7] Споры проявляют высокую восприимчивость к УФ-излучению только тогда, когда оба пути репарации скомпрометированы. [7]