Мазок крови , мазок периферической крови или пленка крови представляет собой тонкий слой крови , нанесенный на предметное стекло микроскопа , а затем окрашенный таким образом, чтобы можно было исследовать различные клетки крови под микроскопом. Мазки крови исследуются при расследовании гематологических заболеваний (крови) и обычно используются для поиска паразитов крови , таких как малярия и филяриатоз .
Мазок крови делается путем помещения капли крови на один конец предметного стекла и использования разбрасывающего предметного стекла для распределения крови по длине предметного стекла. Цель состоит в том, чтобы получить область, называемую монослоем, где клетки расположены достаточно далеко друг от друга, чтобы их можно было подсчитать и дифференцировать. Монослой находится в «размытом крае», создаваемом разбрасывателем, когда он вытягивает кровь вперед. [ нужна цитата ]
Предметное стекло оставляют высыхать на воздухе, после чего кровь фиксируют на предметном стекле, погружая его на короткое время в метанол . Фиксатор необходим для хорошего окрашивания и представления клеточных деталей. После фиксации предметное стекло окрашивают , чтобы отличить клетки друг от друга. [ нужна цитата ]
Рутинный анализ крови в медицинских лабораториях обычно проводится на мазках крови, окрашенных красителями Романовского , такими как пятно Райта , пятно Гимзы или пятно Диффа-Квика . Комбинированная морилка Райта-Гимзы также является популярным выбором. Эти пятна позволяют обнаружить аномалии лейкоцитов , эритроцитов и тромбоцитов . Гематопатологи часто используют другие специализированные красители для дифференциальной диагностики заболеваний крови. [ нужна цитата ]
После окрашивания монослой просматривают под микроскопом с увеличением до 1000 раз. Отдельные клетки исследуют, характеризуют и записывают их морфологию. [1] [2]
Исследование мазка крови обычно проводится в сочетании с общим анализом крови , чтобы выявить аномальные результаты или подтвердить результаты, которые автоматический анализатор пометил как недостоверные. [3]
Микроскопическое исследование формы, размера и окраски эритроцитов полезно для определения причины анемии . Такие заболевания, как железодефицитная анемия , серповидно-клеточная анемия , мегалобластная анемия и микроангиопатическая гемолитическая анемия, приводят к характерным отклонениям в мазке крови. [2]
По мазку крови можно определить пропорции разных типов лейкоцитов . Это известно как ручной дифференциальный анализ лейкоцитов . Дифференциальный анализ лейкоцитов может выявить аномалии в пропорциях типов лейкоцитов, таких как нейтрофилия и эозинофилия , а также наличие аномальных клеток, таких как циркулирующие бластные клетки, наблюдаемые при остром лейкозе . [4] В мазке крови также видны качественные отклонения лейкоцитов, такие как токсические грануляции . Современные анализаторы общего анализа крови могут обеспечить автоматизированный дифференциальный анализ лейкоцитов, но они имеют ограниченную способность дифференцировать незрелые и аномальные клетки, поэтому часто показано ручное исследование мазка крови. [5] [6]
Исследование мазка крови является предпочтительным методом диагностики некоторых паразитарных инфекций, таких как малярия и бабезиоз . [7] Редко бактерии можно обнаружить в мазке крови у пациентов с тяжелым сепсисом . [8]
Предпочтительным и наиболее надежным диагнозом малярии является микроскопическое исследование мазков крови, поскольку каждый из четырех основных видов паразитов имеет отличительные характеристики. Традиционно используются два вида мазков крови. [9]
По густому мазку опытный микроскопист может обнаружить всех встреченных паразитов. Микроскопическая диагностика может быть затруднена, поскольку ранние трофозоиты («кольцевая форма») всех четырех видов выглядят одинаково, и никогда невозможно диагностировать виды на основе одной кольцевой формы; Видовая идентификация всегда осуществляется по нескольким трофозоитам. [ нужна цитата ]
Самая большая ошибка в большинстве лабораторий в развитых странах — это слишком большая задержка между взятием образца крови и изготовлением мазков крови. Когда кровь остывает до комнатной температуры, мужские гаметоциты будут делиться и высвобождать микрогаметы : это длинные извилистые нитевидные структуры, которые можно принять за такие организмы, как боррелии . Если кровь хранить при более высоких температурах, шизонты будут разрываться, и мерозоиты, проникающие в эритроциты, ошибочно придадут вид акколе-формы P. falciparum . Если P. vivax или P. ovale оставить на несколько часов в ЭДТА, накопление кислоты в образце приведет к сморщиванию зараженных паразитом эритроцитов, и паразит свернется, имитируя появление P.malariae . Эта проблема усугубляется, если используются антикоагулянты, такие как гепарин или цитрат . Антикоагулянт, вызывающий меньше всего проблем, — ЭДТА . Обычно используется окраска Романовского или ее вариант. Некоторые лаборатории ошибочно используют тот же pH окрашивания, что и для рутинных гематологических мазков крови ( pH 6,8): мазки малярийной крови необходимо окрашивать при pH 7,2, иначе точки Шюффнера и точки Джеймса не будут видны. [ нужна цитата ]
Процедуры иммунохроматографического захвата (экспресс-диагностические тесты, такие как тесты на выявление малярийного антигена ) представляют собой немикроскопические диагностические варианты для лабораторий, которые могут не иметь соответствующих знаний в области микроскопии. [11]
