stringtranslate.com

Нитросиний тетразолий хлорид

Нитросиний тетразолий — это химическое соединение , состоящее из двух тетразольных фрагментов. Используется в иммунологии для чувствительного обнаружения щелочной фосфатазы (с BCIP ). NBT служит окислителем , а BCIP — субстратом AP (и дает также темно-синий краситель).

Клиническое значение

В иммуногистохимии щелочная фосфатаза часто используется в качестве маркера, конъюгированного с антителом . Окрашенный продукт может быть либо реакцией NBT/BCIP, показывающей, где связано антитело, либо может использоваться в иммунофлуоресценции . [1]

Реакция NBT/BCIP также используется для колориметрических/ спектрофотометрических анализов активности оксидоредуктаз . Одним из применений является окрашивание активности в гель-электрофорезе , например, с комплексами митохондриальной цепи переноса электронов . [2]

Нитросиний тетразолий используется в диагностическом тесте, [3] в частности, при хронической гранулематозной болезни и других заболеваниях функции фагоцитов. При дефекте НАДФН-оксидазы фагоцит не способен производить активные формы кислорода или радикалы, необходимые для уничтожения бактерий. В результате бактерии могут процветать внутри фагоцита. Чем выше синий балл, тем лучше клетка производит активные формы кислорода. [4]

Ссылки

  1. ^ Trinh le A, McCutchen MD, Bonner-Fraser M, Fraser SE, Bumm LA, McCauley DW (июнь 2007 г.). «Флуоресцентная гибридизация in situ с использованием обычного хромогенного окрашивания NBT/BCIP». BioTechniques . 42 (6): 756–9. doi : 10.2144/000112476 . PMID  17612300.
  2. ^ Nisimoto Y, Wilson E, Heyl BL, Lambeth JD (5 января 1986 г.). "NADH-дегидрогеназа из мембран бычьих нейтрофилов. Очистка и свойства". J. Biol. Chem . 261 (1): 285–90. doi : 10.1016/S0021-9258(17)42467-7 . PMID  3941077.
  3. ^ Freeman, R; King B (октябрь 1972 г.). «Методика проведения теста с нитро-синим тетразолием (НБТ)». Журнал клинической патологии . 25 (10): 912–914. doi :10.1136/jcp.25.10.912. PMC 477548. PMID  4119008 . 
  4. ^ Nathan DG, Baehner RL, Weaver DK (октябрь 1969 г.). «Неспособность нитросинего тетразолия восстановить фагоцитарные вакуоли лейкоцитов при хронической гранулематозной болезни». J. Clin. Invest . 48 (10): 1895–904. doi :10.1172/JCI106156. PMC 322426. PMID  5387730 .