Орто -нитрофенил-β-галактозид ( ONPG ) является колориметрическим и спектрофотометрическим субстратом для обнаружения активности β-галактозидазы . [1] Это соединение обычно бесцветно. Однако, если присутствует β-галактозидаза, она гидролизует молекулу ONPG на галактозу и орто-нитрофенол . Последнее соединение имеет желтый цвет, который можно использовать для проверки активности фермента с помощью колориметрического анализа (при длине волны 420 нм). β-галактозидаза необходима для утилизации лактозы , поэтому интенсивность полученного цвета можно использовать в качестве меры скорости фермента.
Хотя ONPG имитирует лактозу и гидролизуется β-галактозидазой, он не может действовать как индуктор для lac-оперона . Без другого аналога лактозы, который может действовать как индуктор, такого как изопропил β- D -1-тиогалактопиранозид (IPTG), β-галактозидаза не будет транскрибироваться, а ONPG не будет гидролизоваться.