Масс -хроматограмма — это представление данных масс-спектрометрии в виде хроматограммы , где ось x представляет время , а ось y представляет интенсивность сигнала. [1] Исходные данные содержат информацию о массе; однако она не представлена графически в масс-хроматограмме в пользу визуализации интенсивности сигнала в зависимости от времени. Наиболее распространенное использование этого представления данных — когда масс-спектрометрия используется в сочетании с некоторой формой хроматографии , например, в жидкостной хроматографии–масс-спектрометрии или газовой хроматографии–масс-спектрометрии . В этом случае ось x представляет время удерживания, аналогично любой другой хроматограмме. Ось y представляет интенсивность сигнала или относительную интенсивность сигнала. Существует много различных типов метрик, которые может представлять эта интенсивность, в зависимости от того, какая информация извлекается из каждого масс-спектра.
Хроматограмма полного ионного тока (TICC) представляет собой суммированную интенсивность по всему диапазону масс, обнаруживаемых в каждой точке анализа. [2] [3] Диапазон обычно составляет несколько сотен единиц массы к заряду или более. В сложных образцах TICC часто дает ограниченную информацию, поскольку несколько аналитов элюируются одновременно, скрывая отдельные виды.
Хроматограмма базового пика похожа на TICC, однако она отслеживает только самый интенсивный пик в каждом спектре. [4] [3] Это означает, что хроматограмма базового пика представляет интенсивность самого интенсивного пика в каждой точке анализа. Хроматограммы базового пика часто имеют более чистый вид и, таким образом, более информативны, чем хроматограммы TIC, поскольку фон уменьшается за счет фокусировки на одном аналите в каждой точке.
В хроматограмме с извлеченными ионами (EIC или XIC), также называемой хроматограммой с реконструированными ионами (RIC), одно или несколько значений m/z, представляющих один или несколько интересующих аналитов, извлекаются («извлекаются») из всего набора данных для хроматографического прогона. [3] Общая интенсивность или интенсивность базового пика в пределах окна допуска массы вокруг отношения массы к заряду конкретного аналита наносится на график в каждой точке анализа. Размер окна допуска массы обычно зависит от точности массы и разрешения по массе прибора, собирающего данные. Это полезно для повторного изучения данных с целью обнаружения ранее не подозреваемых аналитов, для выделения потенциальных изомеров, разделения подозреваемых совместно элюирующих веществ или для предоставления чистых хроматограмм интересующих соединений. Хроматограмма с извлеченными ионами создается путем разделения интересующих ионов из файла данных, содержащего полный масс-спектр с течением времени после факта; это отличается от хроматограмм с выбранными ионами, обсуждаемых ниже, в которых данные собираются только для определенных значений m/z. Тесно связанный термин — хроматограмма экстрагированного соединения (ECC).
Хроматограмма мониторинга выбранных ионов (SIM) похожа на EIC/XIC, за исключением того, что масс-спектрометр работает в режиме SIM, так что в анализе обнаруживаются только предварительно выбранные значения m/z. [5] Эксперименты SIM можно проводить с использованием приборов масс-спектрометрии (MS) или тандемной масс-спектрометрии (MS/MS). Они более распространены на приборах MS. Это значительно отличается от хроматограммы с извлеченными ионами, упомянутой выше, тем, что в эксперименте SIM собираются только данные для интересующего иона(ов); для хроматограмм с извлеченными ионами (EIC или XIC) данные для всего диапазона масс собираются во время прогона, а затем исследуются на наличие интересующих аналитов после завершения прогона.
Эксперимент по мониторингу выбранной реакции (SRM) очень похож на эксперимент SIM, за исключением того, что используется тандемная масс-спектрометрия и обнаруживается определенный ион-продукт определенного родительского иона. [3] Сначала выбирается масса родительского аналита, в то время как другие ионы отфильтровываются. Затем родительский ион-аналит фрагментируется в газовой фазе, и отслеживается определенный ион-фрагмент. Этот эксперимент имеет очень высокую специфичность, поскольку хроматограмма SRM представляет только ионы определенной массы, которые фрагментируются таким образом, что производят очень определенную массу продукта. Этот тип эксперимента можно выполнить только с использованием тандемной масс-спектрометрии. Технологический прогресс в области MS/MS привел к разработке MRM, Multiple Reaction Monitoring, который позволяет одновременно обнаруживать несколько совместно элюирующих аналитов с различными родительскими и/или дочерними ионами.