В эмбриологии дробление — это деление клеток на ранних стадиях развития эмбриона после оплодотворения . [1] Зиготы многих видов проходят быстрые клеточные циклы без значительного общего роста, образуя кластер клеток того же размера , что и исходная зигота. Различные клетки, полученные в результате дробления, называются бластомерами и образуют компактную массу, называемую морулой . Дробление заканчивается образованием бластулы или бластоцисты у млекопитающих.
В зависимости от концентрации желтка в яйце, дробление может быть голобластическим (полное или полное дробление) или меробластическим (частичное или неполное дробление). Полюс яйца с самой высокой концентрацией желтка называется вегетативным полюсом , а противоположный ему — анимальным полюсом .
Деление отличается от других форм деления клеток тем, что оно увеличивает количество клеток и массу ядра без увеличения массы цитоплазмы . Это означает, что с каждым последующим делением в каждой дочерней клетке содержится примерно половина цитоплазмы, чем до этого деления, и, таким образом, соотношение ядерного и цитоплазматического материала увеличивается. [2]
Быстрые клеточные циклы облегчаются за счет поддержания высоких уровней белков, которые контролируют прогрессию клеточного цикла, таких как циклины и связанные с ними циклинзависимые киназы (CDK). Комплекс циклин B / CDK1, также известный как MPF ( фактор, способствующий созреванию ), способствует вступлению в митоз.
Процессы кариокинеза (митоза) и цитокинеза работают вместе, чтобы привести к дроблению. Митотический аппарат состоит из центрального веретена и полярных звезд, состоящих из полимеров белка тубулина, называемых микротрубочками . Звезды зарождаются центросомами , а центросомы организованы центриолями, которые приносятся в яйцеклетку сперматозоидом в качестве базальных телец . Цитокинез опосредуется сократительным кольцом , состоящим из полимеров белка актина , называемых микрофиламентами . Кариокинез и цитокинез являются независимыми, но пространственно и временно скоординированными процессами. В то время как митоз может происходить и без цитокинеза, цитокинез требует митотического аппарата.
Конец дробления совпадает с началом зиготической транскрипции. Эта точка у не млекопитающих называется переходом средней бластулы и, по-видимому, контролируется ядерно-цитоплазматическим соотношением (около 1:6).
Детерминированное дробление (также называемое мозаичным дроблением) встречается у большинства первичноротых . Оно приводит к тому, что судьба развития клеток задается на ранних стадиях развития эмбриона . Каждый бластомер, полученный в результате раннего эмбрионального дробления, не способен развиться в полноценный эмбрион .
Клетка может быть неопределенной (также называемой регуляторной), только если она имеет полный набор ненарушенных животных/растительных цитоархитектурных признаков. Это характерно для вторичноротых — когда исходная клетка в эмбрионе вторичноротых делится, две полученные клетки могут быть разделены, и каждая из них может индивидуально развиться в целый организм.
При голобластическом дроблении зигота и бластомеры полностью разделяются во время дробления, поэтому количество бластомеров удваивается с каждым дроблением. При отсутствии большой концентрации желтка можно наблюдать четыре основных типа дробления в изолецитальных клетках (клетки с небольшим, равномерным распределением желтка) или в мезолецитальных клетках или микролецитальных клетках (умеренная концентрация желтка в градиенте) — двустороннее голобластическое, радиальное голобластическое, ротационное голобластическое и спиральное голобластическое дробление. [3] Эти голобластические плоскости дробления проходят через изолецитальные зиготы в процессе цитокинеза. Целобластула является следующей стадией развития для яиц, которые подвергаются этим радиальным дроблениям. В голобластических яйцах первое дробление всегда происходит вдоль вегетативно-животной оси яйца, второе дробление перпендикулярно первому. Отсюда пространственное расположение бластомеров может следовать различным закономерностям из-за различных плоскостей дробления у разных организмов.
Первое дробление приводит к разделению зиготы на левую и правую половины. Последующие плоскости дробления центрированы на этой оси и приводят к тому, что две половины являются зеркальными отражениями друг друга. При двустороннем голобластическом дроблении деления бластомеров являются полными и раздельными; по сравнению с двусторонним меробластическим дроблением, при котором бластомеры остаются частично соединенными.
Радиальное дробление характерно для вторичноротых , к которым относятся некоторые позвоночные и иглокожие , у которых оси веретена расположены параллельно или под прямым углом к полярной оси ооцита .
Вращательное дробление включает в себя нормальное первое деление вдоль меридиональной оси, что приводит к появлению двух дочерних клеток. Отличие этого дробления в том, что одна из дочерних клеток делится меридионально, а другая — экваториально.
Нематода C. elegans , популярный модельный организм развития , претерпевает голобластическое вращательное деление клеток. [4]
Спиральное дробление сохраняется у многих представителей таксонов лофотрохозоа , называемых Spiralia . [5] Большинство спиралий подвергаются равному спиральному дроблению, хотя некоторые подвергаются неравному дроблению (см. ниже). [6] В эту группу входят кольчатые черви , моллюски и сипункулы . Спиральное дробление может различаться между видами, но обычно первые два деления клеток приводят к образованию четырех макромеров, также называемых бластомерами (A, B, C, D), каждое из которых представляет один квадрант эмбриона. Эти первые два дробления не ориентированы в плоскостях, которые проходят под прямым углом параллельно анимально-вегетативной оси зиготы . [ 5] На стадии 4 клеток макромеры A и C встречаются на анимальном полюсе, создавая анимальную поперечную борозду, в то время как макромеры B и D встречаются на вегетативном полюсе, создавая вегетативную поперечную борозду. [7] С каждым последующим циклом деления макромеры дают начало квартетам более мелких микромеров на анимальном полюсе. [8] [9] Деления, которые производят эти квартеты, происходят под косым углом, углом, который не кратен 90 градусам, к анимально-вегетативной оси. [9] Каждый квартет микромеров вращается относительно своего родительского макромера, и хиральность этого вращения отличается для квартетов с нечетным и четным номером, что означает, что существует чередующаяся симметрия между нечетными и четными квартетами. [5] Другими словами, ориентация делений, которые производят каждый квартет, чередуется между тем, чтобы быть по часовой стрелке и против часовой стрелки относительно анимального полюса. [9] Чередующийся рисунок деления, который происходит при создании квартетов, производит квартеты микромеров, которые находятся в бороздах деления четырех макромеров. [7] Если смотреть с анимального полюса, то это расположение клеток имеет спиральный рисунок.
Спецификация макромера D является важным аспектом развития спиралей. Хотя первичная ось, животно-вегетативная, определяется во время оогенеза , вторичная ось, дорсально-вентральная, определяется спецификацией квадранта D. [9] Макромер D облегчает клеточные деления, которые отличаются от делений, производимых тремя другими макромерами. Клетки квадранта D дают начало дорсальным и задним структурам спиралей. [9] Существуют два известных механизма спецификации квадранта D. Эти механизмы включают равное дробление и неравное дробление.
При равном дроблении первые два клеточных деления производят четыре макромера, которые неотличимы друг от друга. Каждый макромер имеет потенциал стать макромером D. [8] После образования третьего квартета один из макромеров инициирует максимальный контакт с вышележащими микромерами на анимальном полюсе эмбриона. [8] [9] Этот контакт необходим для различения одного макромера как официального бластомера квадранта D. В спиральных эмбрионах с равномерным дроблением квадрант D не определяется до тех пор, пока не образуется третий квартет, когда контакт с микромерами диктует одной клетке стать будущим бластомером D. После определения бластомер D подает сигнал окружающим микромерам, чтобы они определили свои клеточные судьбы. [9]
При неравном дроблении первые два деления клеток неравны, образуя четыре клетки, в которых одна клетка больше трех других. Эта более крупная клетка определяется как макромер D. [8] [9] В отличие от одинаково дробящихся спиралей, макромер D определяется на стадии четырех клеток во время неравного дробления. Неравное дробление может происходить двумя способами. Один из методов включает асимметричное расположение веретена деления. [9] Это происходит, когда астра на одном полюсе прикрепляется к клеточной мембране, в результате чего она становится намного меньше астры на другом полюсе. [8] Это приводит к неравному цитокинезу , при котором обе макромеры наследуют часть анимальной области яйца, но только более крупная макромера наследует вегетативную область. [8] Второй механизм неравного дробления включает образование безъядерного, связанного с мембраной цитоплазматического выступа, называемого полярной долей. [8] Эта полярная доля формируется на вегетативном полюсе во время дробления, а затем перемещается в бластомер D. [7] [8] Полярная доля содержит вегетативную цитоплазму, которая наследуется будущей макромерой D. [9]
При наличии большой концентрации желтка в оплодотворенной яйцеклетке, клетка может подвергнуться частичному, или меробластическому, расщеплению. Два основных типа меробластического расщепления — дискоидальное и поверхностное . [ необходима цитата ]
По сравнению с другими быстро развивающимися животными, млекопитающие имеют более медленную скорость деления, которая составляет от 12 до 24 часов. Первоначально синхронные, эти клеточные деления постепенно становятся все более и более асинхронными. Зиготическая транскрипция начинается на двух-, четырех- или восьмиклеточной стадии в зависимости от вида (например, зиготическая транскрипция у мышей начинается к концу стадии зиготы и становится значимой на двухклеточной стадии, тогда как человеческие эмбрионы начинают зиготическую транскрипцию на восьмиклеточной стадии). Дробление является голобластическим и ротационным.
В эмбриональном развитии человека на стадии восьми клеток, пройдя три деления, эмбрион начинает менять форму, поскольку он развивается в морулу, а затем в бластоцисту . На стадии восьми клеток бластомеры изначально круглые и слабо прилегают друг к другу. При дальнейшем делении в процессе уплотнения клетки прилегают друг к другу. [13] На стадии 16 клеток уплотненный эмбрион называется морулой . [ 14] [15] После того, как эмбрион разделился на 16 клеток, он начинает напоминать шелковицу , отсюда и название морула ( лат . morus : шелковица ). [16] Одновременно они развивают полярность изнутри наружу, которая обеспечивает различные характеристики и функции их интерфейсам клетка-клетка и клетка-среда. [17] [18] По мере того, как поверхностные клетки становятся эпителиальными , они начинают плотно прилегать , поскольку образуются щелевые соединения , а с другими бластомерами развиваются плотные соединения . [19] [14] При дальнейшем уплотнении отдельные внешние бластомеры, трофобласты , становятся неразличимыми, поскольку они организуются в тонкий слой плотно сцепленных эпителиальных клеток . Они все еще заключены в zona pellucida . Теперь морула водонепроницаема, чтобы удерживать жидкость, которую клетки позже закачают в эмбрион, чтобы превратить его в бластоцисту.
У людей морула попадает в матку через три или четыре дня и начинает впитывать жидкость, поскольку натрий-калиевые насосы на трофобластах закачивают натрий в морулу, втягивая воду из материнской среды путем осмоса , чтобы она стала бластоцельной жидкостью. В результате повышенного осмотического давления накопление жидкости повышает гидростатическое давление внутри эмбриона. [20] Гидростатическое давление разрывает межклеточные контакты внутри эмбриона путем гидравлического разрыва . [21] Первоначально распределенная в сотнях водных карманов по всему эмбриону, жидкость собирается в одну большую полость , называемую бластоцелем, после процесса, похожего на созревание Оствальда . [21] Клетки эмбриобласта, также известные как внутренняя клеточная масса , образуют компактную массу клеток на эмбриональном полюсе с одной стороны полости, которая в дальнейшем будет производить собственно эмбрион. Теперь эмбрион называется бластоцистой . [14] [22] Трофобласты в конечном итоге дадут начало эмбриональному компоненту плаценты, называемому хорионом .
Из восьмиклеточного эмбриона до уплотнения можно извлечь одну клетку и использовать ее для генетического скрининга , после чего эмбрион восстановится. [23] [24]
Существуют различия между дроблением у плацентарных млекопитающих и у других млекопитающих.