stringtranslate.com

Слияние липидного бислоя

Иллюстрация слияния липидных везикул, показывающая два возможных результата: гемислияние и полное слияние. При гемислиянии смешиваются только внешние двухслойные листки. При полном слиянии смешиваются как листки, так и внутреннее содержимое.

В биологии мембран слияние — это процесс, посредством которого два изначально отдельных липидных бислоя объединяют свои гидрофобные ядра, в результате чего образуется одна взаимосвязанная структура. Если это слияние полностью происходит через оба листка обоих бислоев, образуется водный мостик, и внутреннее содержимое двух структур может смешиваться. В качестве альтернативы, если в процессе слияния участвует только один листок из каждого бислоя, бислои называются полуслитыми. При полуслиянии липидные компоненты внешнего листка двух бислоев могут смешиваться, но внутренние листки остаются отдельными. Водное содержимое, заключенное в каждом бислое, также остается разделенным.

Слияние участвует во многих клеточных процессах, особенно у эукариот, поскольку эукариотическая клетка в значительной степени подразделяется липидными бислойными мембранами. Экзоцитоз, оплодотворение яйцеклетки спермой и транспорт отходов в лизосому — вот лишь некоторые из многих эукариотических процессов, которые основаны на той или иной форме слияния. Слияние также является важным механизмом для транспортировки липидов из места их синтеза в мембрану, где они необходимы. Даже проникновение патогенов может регулироваться слиянием, поскольку многие вирусы с бислойной оболочкой имеют специальные белки слияния для проникновения в клетку-хозяина.

Липидный механизм

В процессе слияния есть четыре основных шага, хотя каждый из этих шагов на самом деле представляет собой сложную последовательность событий. [1] Во-первых, вовлеченные мембраны должны агрегироваться, приближаясь друг к другу на расстояние в несколько нанометров. Во-вторых, два бислоя должны войти в очень тесный контакт (в пределах нескольких ангстрем). Чтобы достичь этого тесного контакта, две поверхности должны стать по крайней мере частично обезвоженными, так как связанная поверхностная вода, обычно присутствующая, заставляет бислои сильно отталкиваться на этом расстоянии. В-третьих, дестабилизация должна развиться в одной точке между двумя бислоями, вызывая высоколокализованную перестройку двух бислоев. Наконец, по мере роста этого точечного дефекта компоненты двух бислоев смешиваются и диффундируют от места контакта. В зависимости от того, происходит ли полуслияние или полное слияние, внутреннее содержимое мембран также может смешиваться в этой точке.

Схематическое изображение процесса слияния посредством образования стебля.

Точные механизмы, лежащие в основе этой сложной последовательности событий, все еще являются предметом споров. Чтобы упростить систему и провести более определенное исследование, было проведено множество экспериментов in vitro с синтетическими липидными везикулами. Эти исследования показали, что двухвалентные катионы играют решающую роль в процессе слияния, связываясь с отрицательно заряженными липидами, такими как фосфатидилсерин , фосфатидилглицерин и кардиолипин . [2] Одна из ролей этих ионов в процессе слияния заключается в экранировании отрицательного заряда на поверхности бислоя, уменьшении электростатического отталкивания и обеспечении сближения мембран. Однако это явно не единственная роль, поскольку существует широко документированная разница в способности Mg 2+ и Ca 2+ вызывать слияние. Хотя Mg 2+ вызовет обширную агрегацию, он не вызовет слияние, в то время как Ca 2+ вызывает и то, и другое. [3] Было высказано предположение, что это несоответствие обусловлено разницей в степени дегидратации. Согласно этой теории, ионы кальция сильнее связываются с заряженными липидами, но менее прочно с водой. Результирующее смещение кальция на воду дестабилизирует липидно-водную границу и способствует тесному межслоевому контакту. [4] Недавно предложенная альтернативная гипотеза заключается в том, что связывание кальция вызывает дестабилизирующее латеральное натяжение . [5] Каким бы ни был механизм слияния, вызванного кальцием, первоначальное взаимодействие явно электростатическое, поскольку цвиттер-ионные липиды не восприимчивы к этому эффекту. [6] [7]

В процессе слияния липидная головная группа не только участвует в плотности заряда, но и может влиять на дегидратацию и зарождение дефектов. Эти эффекты не зависят от эффектов ионов. Присутствие незаряженной головной группы фосфатидилэтаноламина (ПЭ) увеличивает слияние при включении в фосфатидилхолиновый бислой. Некоторые объясняют это явление как эффект дегидратации, аналогичный влиянию кальция. [8] Головная группа ПЭ связывает воду менее прочно, чем ПК, и поэтому может легче допускать близкое прилегание. Альтернативное объяснение заключается в том, что физическая, а не химическая природа ПЭ может способствовать слиянию. Согласно гипотезе слияния стебля, для слияния между двумя бислоями должен образоваться сильно изогнутый мостик. [9] Поскольку ПЭ имеет небольшую головную группу и легко образует инвертированные фазы мицелл, он должен, согласно модели стебля, способствовать образованию этих стеблей. [10] Дополнительным доказательством, приведенным в пользу этой теории, является тот факт, что некоторые липидные смеси, как было показано, поддерживают слияние только при повышении температуры выше температуры перехода этих инвертированных фаз. [11] [12] Эта тема также остается спорной, и даже если в процессе слияния присутствует изогнутая структура, в литературе ведутся споры о том, является ли она кубической, гексагональной или более экзотической расширенной фазой. [13]

Слитые белки

Схема действия белков SNARE, прикрепляющих везикулу для экзоцитоза. Комплементарные версии белка на везикуле и целевой мембране связываются и оборачиваются друг вокруг друга, сближая два бислоя в этом процессе. [14]

Ситуация еще больше усложняется при рассмотрении слияния in vivo , поскольку биологическое слияние почти всегда регулируется действием мембрано-ассоциированных белков . Первыми из этих белков, которые были изучены, были вирусные белки слияния, которые позволяют вирусу с оболочкой вставлять свой генетический материал в клетку-хозяина (вирусы с оболочкой - это те, которые окружены липидным бислоем; некоторые другие имеют только белковую оболочку). В целом, существует два класса вирусных белков слияния: кислые и pH-независимые. [1] pH- независимые белки слияния могут функционировать в нейтральных условиях и сливаться с плазматической мембраной , позволяя вирусу проникнуть в клетку. Вирусы, использующие эту схему, включают ВИЧ , корь и герпес . Кислотные белки слияния, такие как те, которые обнаружены у гриппа, активируются только при низком pH кислых эндосом и должны сначала подвергнуться эндоцитозу , чтобы проникнуть в клетку.

Эукариотические клетки используют совершенно разные классы белков слияния, наиболее изученными из которых являются SNARE . Белки SNARE используются для управления всем везикулярным внутриклеточным трафиком. Несмотря на годы исследований, многое еще неизвестно о функции этого класса белков. Фактически, все еще ведутся активные дебаты относительно того, связаны ли SNARE с ранней стыковкой или участвуют позже в процессе слияния, способствуя гемислиянию. [15] Даже после того, как роль SNARE или других специфических белков будет прояснена, единое понимание белков слияния маловероятно, поскольку существует огромное разнообразие структур и функций в пределах этих классов, и очень мало тем сохраняются. [16]

Слияние в лабораторной практике

В исследованиях молекулярной и клеточной биологии часто желательно искусственно вызвать слияние. Хотя это может быть достигнуто с добавлением кальция, как обсуждалось ранее, эта процедура часто невыполнима, поскольку кальций регулирует многие другие биохимические процессы, и его добавление будет сильным препятствием. Кроме того, как уже упоминалось, кальций вызывает массивную агрегацию, а также слияние. Добавление полиэтиленгликоля (ПЭГ) вызывает слияние без значительной агрегации или биохимического нарушения. Эта процедура в настоящее время широко используется, например, путем слияния В-клеток с клетками миеломы . [17] Полученная « гибридома » из этой комбинации экспрессирует желаемое антитело , как определено вовлеченной В-клеткой, но бессмертна из-за компонента миеломы. Механизм слияния ПЭГ окончательно не идентифицирован, но некоторые исследователи полагают, что ПЭГ, связывая большое количество молекул воды, эффективно снижает химическую активность воды и, таким образом, дегидратирует липидные головные группы. [18] Слияние также может быть искусственно вызвано посредством электропорации в процессе, известном как электрослияние. Считается, что это явление возникает из-за энергетически активных краев, образующихся во время электропорации, которые могут действовать как локальная точка дефекта для зарождения роста стебля между двумя бислоями. [19]

В качестве альтернативы, модельные системы, вдохновленные SNARE, могут быть использованы для индукции мембранного слияния липидных везикул. В этих системах мембранно-закрепленные комплементарные ДНК, [20] [21] [22] ПНК, [23] пептиды, [24] или другие молекулы [25] «застегиваются» вместе и сближают мембраны. Такие системы могли бы иметь практическое применение в будущем, например, при доставке лекарств. [26] Вероятно, наиболее изученная система [27] состоит из образующих спираль пептидов с комплементарным зарядом (один обычно несет избыток положительно заряженных лизинов и поэтому называется пептидом K, а другой — отрицательно заряженными глутаминовыми кислотами, называемыми пептидом E). [28] Интересно, что было обнаружено, что не только образование спиральной спирали между двумя пептидами необходимо для слияния мембран, но также и то, что пептид K взаимодействует с поверхностью мембраны и вызывает локальные дефекты. [29]

Анализы для измерения слияния мембран

Существует два уровня слияния: смешивание липидов мембраны и смешивание содержимого. Анализы слияния мембран сообщают либо о смешивании липидов мембраны, либо о смешивании водного содержимого слитых образований.

Анализы для измерения смешивания липидов

Анализы, оценивающие смешивание липидов, используют зависящие от концентрации эффекты, такие как безызлучательный перенос энергии, тушение флуоресценции и образование эксимера пирена.

(1.) Иллюстрация анализа смешивания липидов, основанного на резонансном переносе энергии Фёрстера.
(3.) Иллюстрация анализа смешивания липидов, основанного на самотушении флуоресценции.
  1. Передача энергии NBD-родамина: [30] В этом методе мембрана, помеченная как NBD (донор), так и Родамином (акцептор), соединяется с немеченой мембраной. Когда NBD и Родамин находятся на определенном расстоянии, происходит резонансная передача энергии Фёрстера (FRET). После слияния резонансная передача энергии (FRET) уменьшается, когда среднее расстояние между зондами увеличивается, в то время как флуоресценция NBD увеличивается.
  2. Образование эксимера пирена: длины волн испускания мономера и эксимера пирена различны. Длина волны испускания мономера составляет около 400 нм, а эксимера — около 470 нм. В этом методе мембрана, меченая пиреном, соединяется с немеченой мембраной. Пирен самоассоциируется в мембране, а затем возбужденный пирен возбуждает другой пирен. До слияния большая часть испускания — это испускание эксимера. После слияния расстояние между зондами увеличивается, а доля испускания эксимера уменьшается. [ необходима цитата ]
  3. Самогашение октадецил родамина B: [31] Этот анализ основан на самогашении октадецил родамина B. Самогашение октадецил родамина B происходит, когда зонд включается в липиды мембраны в концентрациях 1–10 мольных процентов [32], поскольку димеры родамина гасят флуоресценцию. В этом методе меченый мембраной родамин объединяется с немеченой мембраной. Слияние с немечеными мембранами приводит к разбавлению зонда, что сопровождается увеличением флуоресценции. [33] [34] Основной проблемой этого анализа является спонтанный перенос.

Анализы для измерения смешивания содержимого

Смешение водного содержимого везикул в результате лизиса, слияния или физиологической проницаемости можно обнаружить флуорометрически с использованием низкомолекулярных растворимых трассеров.

(1.) Иллюстрация анализа смешивания содержимого на основе пары гашения флуоресценции ANTS/DPX.
(2.) Иллюстрация анализа смешивания содержимого на основе пары усиления флуоресценции Tb 3+ /DPA.
  1. Анализы гашения флуоресценции с ANTS/DPX: [35] [36] ANTS — это полианионный флуорофор, а DPX — катионный гаситель. Анализ основан на их столкновительном тушении. Отдельные популяции везикул загружаются ANTS или DPX соответственно. Когда происходит смешивание содержимого, ANTS и DPX сталкиваются, и флуоресценция ANTS, отслеживаемая при 530 нм, с возбуждением при 360 нм гасится. Этот метод выполняется при кислом pH и высокой концентрации.
  2. Анализы усиления флуоресценции с Tb 3+ /DPA: [37] [38] Этот метод основан на том факте, что хелат Tb 3+ /DPA в 10 000 раз более флуоресцентный, чем один Tb 3+ . В анализе Tb 3+ /DPA отдельные популяции везикул нагружаются TbCl 3 или DPA. Образование хелата Tb 3+ /DPA может использоваться для индикации слияния везикул. Этот метод хорош для мембран, не содержащих белков. [ необходима цитата ]
  3. Анализ одиночной молекулы ДНК. [39] Шпилька ДНК, состоящая из 5 пар оснований стебля и политимидиновой петли, которая помечена донором (Cy3) и акцептором (Cy5) на концах стебля, была инкапсулирована в везикулу v-SNARE. Мы отдельно инкапсулировали несколько немеченых полиаденозиновых нитей ДНК в везикулу t-SNARE. Если две везикулы, обе диаметром ~100 нм, состыкуются и между ними образуется достаточно большая пора слияния, две молекулы ДНК должны гибридизоваться, открывая область стебля шпильки и переключая эффективность переноса энергии резонанса Фёрстера (FRET) (E) между Cy3 и Cy5 с высокого на низкое значение.

Смотрите также

Ссылки

  1. ^ ab Yeagle, PL (1993). Мембраны клеток (2-е изд.). Сан-Диего: Academic Press. ISBN 9780127690414.[ нужна страница ]
  2. ^ Папахаджопулос, Деметриос; Нир, Шломо; Дюзгюнес, Неджат (1990). «Молекулярные механизмы слияния мембран, вызванного кальцием». Журнал биоэнергетики и биомембран . 22 (2): 157–79. doi :10.1007/BF00762944. PMID  2139437. S2CID  1465571.
  3. ^ Leventis, Rania; Gagne, Jeannine; Fuller, Nola; Rand, R.; Silvius, J. (1986). «Слияние, вызванное двухвалентным катионом, и боковая сегрегация липидов в везикулах фосфатидилхолина и фосфатидной кислоты». Биохимия . 25 (22): 6978–87. doi :10.1021/bi00370a600. PMID  3801406.
  4. ^ Wilschut, Jan; Duezguenes, Nejat; Papahadjopoulos, Demetrios (1981). «Специфичность кальция/магния при слиянии мембран: кинетика агрегации и слияния фосфатидилсериновых везикул и роль кривизны бислоя». Биохимия . 20 (11): 3126–33. doi :10.1021/bi00514a022. PMID  7248275.
  5. ^ Чантурия, А.; Скария, П.; Вудл, М.С. (2000). «Роль латерального натяжения мембраны в слиянии мембран, вызванном кальцием». Журнал мембранной биологии . 176 (1): 67–75. doi :10.1007/s00232001076. PMID  10882429. S2CID  2209769.
  6. ^ Pannuzzo, Martina; Jong, De; Djurre, H.; Raudino, Antonio; Marrink Siewert, J. (2014). "Моделирование слияния мембран с участием полиэтиленгликоля и кальция" (PDF) . J. Chem. Phys . 140 (12): 124905. Bibcode :2014JChPh.140l4905P. doi :10.1063/1.4869176. hdl : 11370/78e66c44-d236-4336-9b4a-151d52ffa961 . PMID  24697479. S2CID  7548382.
  7. ^ Папахаджопулос, Д.; Посте, Г.; Шеффер, Бельгия; Вейл, WJ (1974). «Слияние мембран и молекулярная сегрегация в фосфолипидных везикулах». Biochimica et Biophysical Acta (BBA) – Биомембраны . 352 (1): 10–28. дои : 10.1016/0005-2736(74)90175-8. ПМИД  4859411.
  8. ^ Düzgünes, Nejat; Wilschut, Jan; Fraley, Robert; Papahadjopoulos, Demetrios (1981). «Исследования механизма слияния мембран. Роль состава головной группы в слиянии смешанных фосфолипидных везикул, вызванном кальцием и магнием». Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Биомембраны . 642 (1): 182–95. doi :10.1016/0005-2736(81)90148-6. PMID  7225377.
  9. ^ Маркин, ВС; Козлов, ММ; Боровягин, ВЛ (1984). "К теории слияния мембран. Стеблевой механизм" (PDF) . Общая физиология и биофизика . 3 (5): 361–77. PMID  6510702.
  10. ^ Черномордик, Леонид В.; Козлов, Михаил М. (2003). «Взаимодействие белков и липидов при слиянии и делении биологических мембран». Annual Review of Biochemistry . 72 : 175–207. doi :10.1146/annurev.biochem.72.121801.161504. PMID  14527322.
  11. ^ Нир, С.; Бенц, Дж.; Вильшут, Дж.; Дузгунес, Н. (1983). «Агрегация и слияние фосфолипидных везикул». Progress in Surface Science . 13 (1): 1–124. Bibcode : 1983PrSS...13....1N. doi : 10.1016/0079-6816(83)90010-2.
  12. ^ Элленс, Харма; Бенц, Джо; Сока, Фрэнсис К. (1986). «Слияние фосфатидилэтаноламинсодержащих липосом и механизм фазового перехода Lα-HII». Биохимия . 25 (14): 4141–7. дои : 10.1021/bi00362a023. ПМИД  3741846.
  13. ^ Холопайнен, Юха М.; Лехтонен, Юкка Я.А.; Киннунен, Пааво К.Дж. (1999). «Доказательства расширенной конформации фосфолипидов при слиянии и гемислиянии мембран». Биофизический журнал . 76 (4): 2111–20. Бибкод : 1999BpJ....76.2111H. дои : 10.1016/S0006-3495(99)77367-4. ПМК 1300184 . ПМИД  10096906. 
  14. ^ Георгиев, Данко Д.; Глейзбрук, Джеймс Ф. (2007). «Субнейрональная обработка информации уединенными волнами и стохастическими процессами». В Lyshevski, Сергей Эдвард (ред.). Nano and Molecular Electronics Handbook (PDF) . Nano and Microengineering Series. CRC Press. стр. 17–1–17–41. doi :10.1201/9781315221670. ISBN 978-0-8493-8528-5.
  15. ^ Чен, Ю А.; Шеллер, Ричард Х. (2001). «SNARE-опосредованное слияние мембран». Nature Reviews Molecular Cell Biology . 2 (2): 98–106. doi :10.1038/35052017. PMID  11252968. S2CID  205012830.
  16. ^ Уайт, Дж. М. (1990). «Вирусные и клеточные мембранные белки слияния». Annual Review of Physiology . 52 : 675–97. doi : 10.1146/annurev.ph.52.030190.003331. PMID  2184772.
  17. ^ Кёлер, Г.; Мильштейн, К. (1975). «Непрерывные культуры слитых клеток, секретирующих антитела предопределенной специфичности». Nature . 256 (5517): 495–7. Bibcode :1975Natur.256..495K. doi :10.1038/256495a0. PMID  1172191. S2CID  4161444.
  18. ^ Ленц, Барри Р. (1994). «Полимер-индуцированное слияние мембран: потенциальный механизм и связь с событиями слияния клеток». Химия и физика липидов . 73 (1–2): 91–106. doi :10.1016/0009-3084(94)90176-7. PMID  8001186.
  19. ^ Jordan, CA; Neumann, E.; Sowers, AE, ред. (1989). Электропорация и электрослияние в клеточной биологии . Springer. ISBN 978-0-306-43043-5.[ нужна страница ]
  20. ^ Малле, MG; Лёффлер, PMG; Бор, S.SR.; и др. (4 апреля 2022 г.). «Одночастичное комбинаторное мультиплексное слияние липосом, опосредованное ДНК». Nat. Chem . 14 (5): 558–565. Bibcode : 2022NatCh..14..558M. doi : 10.1038/s41557-022-00912-5. PMID  35379901. S2CID  247942781.
  21. ^ Леффлер, Филипп М.Г.; Райс, Оливер; Рабе, Александр; Охольм, Андерс Х.; Томсен, Расмус П.; Кьемс, Йорген; Фогель, Стефан (2017). «ДНК-программируемый каскад слияния липосом». Angewandte Chemie, международное издание . 56 (43): 13228–13231. дои : 10.1002/anie.201703243. ISSN  1521-3773. PMID  28598002. S2CID  205401773.
  22. ^ Стенгель, Гудрун; Зан, Рафаэль; Хёк, Фредрик (2007-08-01). «ДНК-индуцированное программируемое слияние фосфолипидных везикул». Журнал Американского химического общества . 129 (31): 9584–9585. doi :10.1021/ja073200k. ISSN  0002-7863. PMID  17629277.
  23. ^ Лыгина, Антонина С.; Мейенберг, Карстен; Ян, Рейнхард; Дидерихсен, Ульф (2011). «Трансмембранный домен пептида/пептидной нуклеиновой кислоты гибрид как модель белка SNARE в слиянии везикул». Angewandte Chemie International Edition . 50 (37): 8597–8601. doi :10.1002/anie.201101951. hdl : 11858/00-001M-0000-000F-41FF-2 . ISSN  1521-3773. PMID  21786370.
  24. ^ Литовски, Дж. Р.; Ходжес, Р. С. (2002-10-04). «Проектирование гетеродимерных двухцепочечных α-спиральных спиральных спиралей: ВЛИЯНИЕ ГИДРОФОБНОСТИ И α-СПИРАЛЬНОЙ СКЛАДЫВАЕМОСТИ НА СВОРАЧИВАНИЕ, СТАБИЛЬНОСТЬ И СПЕЦИФИЧНОСТЬ БЕЛКА». Журнал биологической химии . 277 (40): 37272–37279. doi : 10.1074/jbc.M204257200 . ISSN  0021-9258. PMID  12138097. S2CID  84379119.
  25. ^ Кумар, Паван; Гуха, Самит; Дидерихсен, Ульф (2015). «Слияние мембран, опосредованное аналогом белка SNARE». Журнал пептидной науки . 21 (8): 621–629. doi :10.1002/psc.2773. ISSN  1099-1387. PMID  25858776. S2CID  23718905.
  26. ^ Yang, Jian; Bahreman, Azadeh; Daudey, Geert; Bussmann, Jeroen; Olsthoorn, René CL; Kros, Alexander (28.09.2016). «Доставка лекарств посредством слияния клеточных мембран с использованием липопептид-модифицированных липосом». ACS Central Science . 2 (9): 621–630. doi :10.1021/acscentsci.6b00172. ISSN  2374-7943. PMC 5043431 . PMID  27725960. 
  27. ^ Робсон Марсден, Хана; Элберс, Нина А.; Боманс, Пол ХХ; Соммердайк, Нико А. Дж. М.; Крос, Александр (2009). «Редуцированная модель SNARE для слияния мембран». Angewandte Chemie International Edition . 48 (13): 2330–2333. doi :10.1002/anie.200804493. ISSN  1521-3773. PMID  19222065.
  28. ^ Линдхаут, Даррин А.; Литовски, Дженнифер Р.; Мерсье, Паскаль; Ходжес, Роберт С.; Сайкс, Брайан Д. (2004). «Структура раствора ЯМР высокостабильной de novo гетеродимерной спиральной катушки». Биополимеры . 75 (5): 367–375. doi :10.1002/bip.20150. ISSN  1097-0282. PMID  15457434. S2CID  28856028.
  29. ^ Рабе, Мартин; Эйзенбри, Кристофер; Плугачкова Кристина; Де Верт, Винсент; Бойл, Эйми Л.; Брюггеман, Диджей Ф.; Кирш, Соня А.; Бёкманн, Райнер А.; Крос, Александр; Раап, Ян; Бехингер, Буркхард (15 ноября 2016 г.). «Пептид со спиральной спиралью, формирующий липидные бислои при слиянии». Биофизический журнал . 111 (10): 2162–2175. Бибкод : 2016BpJ...111.2162R. дои : 10.1016/j.bpj.2016.10.010. ISSN  0006-3495. ПМК 5113151 . ПМИД  27851940. 
  30. ^ Struck, Douglas K.; Hoekstra, Dick; Pagano, Richard E. (1981). «Использование резонансного переноса энергии для мониторинга слияния мембран». Biochemistry . 20 (14): 4093–9. doi :10.1021/bi00517a023. PMID  7284312.
  31. ^ Hoekstra, Dick; De Boer, Tiny; Klappe, Karin; Wilschut, Jan (1984). «Метод флуоресценции для измерения кинетики слияния биологических мембран». Biochemistry . 23 (24): 5675–81. doi :10.1021/bi00319a002. PMID  6098295.
  32. ^ MacDonald, Ruby I (1990). «Характеристики самогашения флуоресценции липидно-конъюгированного родамина в мембранах». Журнал биологической химии . 265 (23): 13533–9. doi : 10.1016/S0021-9258(18)77380-8 . PMID  2380172.
  33. ^ Рубин, Р. Дж.; Чен, И. Д. (1990). «Диффузия и перераспределение липидоподобных молекул между мембранами в системах слияния вирус-клетка и клетка-клетка». Biophysical Journal . 58 (5): 1157–67. Bibcode :1990BpJ....58.1157R. doi :10.1016/S0006-3495(90)82457-7. PMC 1281061 . PMID  2291940. 
  34. ^ Чен, YD; Рубин, RJ; Сабо, A. (1993). «Кинетика гашения флуоресценции в комплексах слияния отдельных клеток». Biophysical Journal . 65 (1): 325–33. Bibcode :1993BpJ....65..325C. doi :10.1016/S0006-3495(93)81076-2. PMC 1225727 . PMID  8369440. 
  35. ^ Смолярский, Моше; Тейтельбаум, Двора; Села, Майкл; Гитлер, Карлос (1977). «Простой флуоресцентный метод определения комплемент-опосредованного липосомного иммунного лизиса». Журнал иммунологических методов . 15 (3): 255–65. doi :10.1016/0022-1759(77)90063-1. PMID  323363.
  36. ^ Элленс, Х.; Бенц, Дж.; Сока, ФК (1985). «Слияние и дестабилизация липосом, вызванные H+ и Ca2+». Биохимия . 24 (13): 3099–106. doi :10.1021/bi00334a005. PMID  4027232.
  37. ^ Wilschut, Jan; Papahadjopoulos, Demetrios (1979). «Ca2+-индуцированное слияние фосфолипидных везикул, контролируемое смешиванием водного содержимого». Nature . 281 (5733): 690–2. Bibcode :1979Natur.281..690W. doi :10.1038/281690a0. PMID  551288. S2CID  4353081.
  38. ^ Wilschut, Jan; Duzgunes, Nejat; Fraley, Robert; Papahadjopoulos, Demetrios (1980). «Исследования механизма слияния мембран: кинетика слияния везикул фосфатидилсерина, индуцированного ионами кальция, с последующим новым анализом смешивания содержимого водных везикул». Биохимия . 19 (26): 6011–21. doi :10.1021/bi00567a011. PMID  7470445.
  39. ^ Diao, Jiajie; Su, Zengliu; Ishitsuka, Yuji; Lu, Bin; Lee, Kyung Suk; Lai, Ying; Shin, Yeon-Kyun; Ha, Taekjip (2010). «Анализ смешивания содержимого одиночных везикул для слияния мембран, опосредованного SNARE». Nature Communications . 1 (5): 1–6. Bibcode :2010NatCo...1E..54D. doi :10.1038/ncomms1054. PMC 3518844 . PMID  20975723.