В молекулярной биологии стоп -кодон (или терминирующий кодон ) — это кодон ( триплет нуклеотидов в матричной РНК ), который сигнализирует об окончании процесса трансляции текущего белка . [1] Большинство кодонов в матричной РНК соответствуют добавлению аминокислоты к растущей полипептидной цепи, которая в конечном итоге может стать белком; стоп-кодоны сигнализируют об окончании этого процесса путем связывания факторов высвобождения , которые заставляют рибосомные субъединицы диссоциировать, высвобождая цепь аминокислот.
В то время как стартовым кодонам для начала трансляции необходимы близлежащие последовательности или факторы инициации , для инициации терминации достаточно одного стоп-кодона.
В стандартном генетическом коде существует три различных терминирующих кодона:
Существуют вариации стандартного генетического кода , и альтернативные стоп-кодоны были обнаружены в митохондриальных геномах позвоночных [ 2] , Scenedesmus obliquus [ 3] и Thraustochytrium [4] .
Ядерный генетический код является гибким, что иллюстрируется вариантными генетическими кодами, которые переназначают стандартные стоп-кодоны аминокислотам. [5]
В 1986 году были представлены убедительные доказательства того, что селеноцистеин (Sec) был включен котрансляционно. Более того, кодон, частично направляющий его включение в полипептидную цепь, был идентифицирован как UGA, также известный как опаловый кодон терминации. [6] Различные механизмы переопределения функции терминации этого кодона были идентифицированы у прокариот и эукариот. [7] Особое различие между этими царствами заключается в том, что цис-элементы, по-видимому, ограничены соседством с кодоном UAG у прокариот, тогда как у эукариот этого ограничения нет. Вместо этого такие местоположения кажутся неблагоприятными, хотя и не запрещенными. [8]
В 2003 году в знаковой статье была описана идентификация всех известных селенопротеинов у людей: всего 25. [9] Аналогичные анализы были проведены и для других организмов.
Кодон UAG может транслироваться в пирролизин (Pyl) аналогичным образом.
Распределение стоп-кодонов в геноме организма не является случайным и может коррелировать с содержанием GC . [10] [11] Например, геном E. coli K-12 содержит 2705 стоп-кодонов TAA (63%), 1257 TGA (29%) и 326 TAG (8%) (содержание GC 50,8%). [12] Также субстраты для стоп-кодонов фактора высвобождения 1 или фактора высвобождения 2 сильно коррелируют с распространенностью стоп-кодонов. [11] Масштабное исследование бактерий с широким диапазоном содержания GC показывает, что в то время как частота встречаемости TAA отрицательно коррелирует с содержанием GC, а частота встречаемости TGA положительно коррелирует с содержанием GC, частота встречаемости стоп-кодона TAG, который часто является минимально используемым стоп-кодоном в геноме, не зависит от содержания GC. [13]
Распознавание стоп-кодонов в бактериях было связано с так называемым «трипептидным антикодоном» [14] , высококонсервативным аминокислотным мотивом в RF1 (PxT) и RF2 (SPF). Хотя это подтверждается структурными исследованиями, было показано, что гипотеза трипептидного антикодона является чрезмерным упрощением. [15]
Стоп-кодоны исторически имели много разных названий, поскольку каждый из них соответствовал отдельному классу мутантов, которые вели себя схожим образом. Эти мутанты были впервые выделены в бактериофагах ( T4 и лямбда ), вирусах , которые заражают бактерии Escherichia coli . Мутации в вирусных генах ослабляли их инфекционную способность, иногда создавая вирусы, которые могли заражать и расти только в определенных разновидностях E. coli .
Они были первым набором бессмысленных мутаций , которые были обнаружены, выделены Ричардом Х. Эпштейном и Чарльзом Стейнбергом и названы в честь их друга и аспиранта Калифорнийского технологического института Харриса Бернстайна, чья фамилия означает « янтарь » на немецком языке ( ср. Бернстайн). [16] [17] [18]
Вирусы с мутациями янтаря характеризуются способностью заражать только определенные штаммы бактерий, известные как супрессоры янтаря. Эти бактерии несут свою собственную мутацию, которая позволяет восстановить функцию в мутантных вирусах. Например, мутация в тРНК, которая распознает стоп-кодон янтаря, позволяет трансляции «прочитать» кодон и произвести полноразмерный белок, тем самым восстанавливая нормальную форму белка и «подавляя» мутацию янтаря. [19] Таким образом, мутанты янтаря представляют собой целый класс мутантов вирусов, которые могут расти в бактериях, содержащих мутации супрессоров янтаря. Аналогичные супрессоры известны также для стоп-кодонов охры и опала.
Молекулы тРНК, несущие неестественные аминокислоты, были разработаны для распознавания янтарного стоп-кодона в бактериальной РНК. Эта технология позволяет включать ортогональные аминокислоты (например, п-азидофенилаланин) в определенных местах целевого белка.
Это была вторая обнаруженная мутация стоп-кодона. Напоминающий обычный желто-оранжево-коричневый цвет, связанный с янтарем, этот второй стоп-кодон получил название « охра » , оранжево-красновато-коричневый минеральный пигмент. [17]
Вирусы-мутанты цвета охры имели свойство, похожее на мутанты цвета янтаря, в том, что они восстанавливали инфекционную способность в определенных супрессорных штаммах бактерий. Набор супрессоров цвета охры отличался от супрессоров цвета янтаря, поэтому было выведено, что мутанты цвета охры соответствуют другому триплету нуклеотидов. С помощью серии экспериментов по мутации, сравнивающих эти мутанты друг с другом и другими известными кодонами аминокислот, Сидни Бреннер пришел к выводу, что мутации цвета янтаря и охры соответствуют триплетам нуклеотидов «UAG» и «UAA». [20]
Третий и последний стоп-кодон в стандартном генетическом коде был обнаружен вскоре после этого и соответствует триплету нуклеотидов «UGA». [21]
Продолжая тему цветных минералов, третий бессмысленный кодон стал известен как « опал » , что является разновидностью кремнезема, имеющего различные цвета. [17] Бессмысленные мутации, которые создали этот преждевременный стоп-кодон, позже были названы мутациями опала или мутациями умбры .
Бессмысленные мутации — это изменения в последовательности ДНК, которые вводят преждевременный стоп-кодон, вызывая аномальное укорачивание любого полученного белка. Это часто приводит к потере функции белка, поскольку критические части цепи аминокислот больше не собираются. Из-за этой терминологии стоп-кодоны также называют бессмысленными кодонами .
Мутация non-stop , также называемая вариантом stop-loss , представляет собой точечную мутацию , которая происходит в стоп-кодоне. Мутации non-stop вызывают непрерывную трансляцию цепи мРНК в то, что должно быть нетранслируемой областью. Большинство полипептидов, полученных из гена с мутацией non-stop, теряют свою функцию из-за их чрезвычайной длины и влияния на нормальную укладку. Мутации non-stop отличаются от бессмысленных мутаций тем, что они не создают стоп-кодон, а вместо этого удаляют его. Мутации non-stop также отличаются от миссенс-мутаций , которые являются точечными мутациями, при которых один нуклеотид изменяется, вызывая замену другой аминокислотой . Мутации non-stop связаны со многими наследственными заболеваниями, включая эндокринные расстройства, [22] заболевания глаз, [23] и нарушения развития нервной системы . [24] [25]
Скрытые остановки — это не-стоп-кодоны, которые читались бы как стоп-кодоны, если бы они были сдвинуты на +1 или -1. Они преждевременно завершают трансляцию, если соответствующий сдвиг рамки (например, из-за смещения рибосомной РНК) происходит до скрытой остановки. Предполагается, что это снижает трату ресурсов на нефункциональные белки и выработку потенциальных цитотоксинов . Исследователи из Университета штата Луизиана предлагают гипотезу засады , что скрытые остановки выбираются для. Кодоны, которые могут образовывать скрытые остановки, используются в геномах чаще по сравнению с синонимичными кодонами, которые в противном случае кодировали бы ту же аминокислоту. Нестабильная рРНК в организме коррелирует с более высокой частотой скрытых остановок. [26] Однако эта гипотеза не может быть подтверждена с большим набором данных. [27]
Стоп-кодоны и скрытые остановки вместе называются стоп-сигналами. Исследователи из Мемфисского университета обнаружили, что соотношения стоп-сигналов в трех считывающих рамках генома (называемые соотношением стоп-сигналов трансляции или TSSR) генетически родственных бактерий, несмотря на их большие различия в содержании генов, во многом схожи. Это почти идентичное значение геномного TSSR генетически родственных бактерий может указывать на то, что расширение бактериального генома ограничено их уникальным смещением стоп-сигналов этого вида бактерий. [28]
Подавление стоп-кодона или трансляционное считывание происходит, когда при трансляции стоп-кодон интерпретируется как смысловой кодон, то есть когда (стандартная) аминокислота «кодируется» стоп-кодоном. Причиной считывания могут быть мутировавшие тРНК , а также определенные нуклеотидные мотивы, близкие к стоп-кодону. Трансляционное считывание очень распространено у вирусов и бактерий, а также было обнаружено как принцип регуляции генов у людей, дрожжей, бактерий и дрозофилы. [29] [30] Этот вид эндогенного трансляционного считывания представляет собой вариацию генетического кода , поскольку стоп-кодон кодирует аминокислоту. В случае человеческой малатдегидрогеназы стоп-кодон считывается с частотой около 4%. [31] Аминокислота, вставленная в стоп-кодон, зависит от идентичности самого стоп-кодона: Gln, Tyr и Lys были обнаружены для кодонов UAA и UAG, в то время как Cys, Trp и Arg для кодона UGA были идентифицированы с помощью масс-спектрометрии. [32] Степень считывания у млекопитающих сильно варьируется и может широко диверсифицировать протеом и влиять на прогрессирование рака. [33]
В 2010 году, когда Крейг Вентер представил первую полностью функционирующую, воспроизводящуюся клетку, контролируемую синтетической ДНК, он описал, как его команда использовала частые стоп-кодоны для создания водяных знаков в РНК и ДНК, чтобы помочь подтвердить, что результаты действительно были синтетическими (а не загрязненными или иными), используя их для кодирования имен авторов и адресов веб-сайтов. [34]
{{cite journal}}
: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )