Тирозинаминотрансфераза (или тирозинтрансаминаза ) — фермент, присутствующий в печени и катализирующий превращение тирозина в 4-гидроксифенилпируват . [6]
У людей белок тирозинаминотрансферазы кодируется геном TAT . [ 7] Дефицит фермента у людей может привести к так называемой тирозинемии II типа , при которой наблюдается избыток тирозина в результате того, что тирозин не может пройти реакцию аминотрансферазы с образованием 4-гидроксифенилпирувата. [8]
Ниже показаны структуры трех основных молекул, участвующих в химической реакции, катализируемой ферментом тирозинаминотрансферазой: аминокислота тирозин (слева), простетическая группа пиридоксальфосфат (справа) и полученный продукт 4-гидроксифенилпируват (в центре).
Каждая сторона димерного белка включает пиридоксальфосфат (PLP), связанный с остатком Lys280 молекулы тирозинаминотрансферазы. Аминогруппа тирозина атакует альфа-углерод имина, связанного с Lys280, образуя тетраэдрический комплекс, а затем запуская LYS-ENZ. Этот процесс известен как трансиминирование, происходящее из-за выключения иминной группы, связанной с PLP. Затем вновь образованная молекула PLP-TYR подвергается атаке основанием.
Возможным кандидатом на роль основания в этом механизме может быть Lys280, который был просто вытолкнут из PLP, что секвестрирует новообразованную аминогруппу молекулы PLP-TYR. В аналогичном механизме аспартаттрансаминазы лизин, который образует начальный имин в PLP, позже действует как основание, которое атакует тирозин при трансиминировании. Электроны, оставшиеся после потери протона, перемещаются вниз, образуя новую двойную связь с имином, который, в свою очередь, выталкивает уже связанные двойной связью электроны через PLP и в конечном итоге оказывается в виде неподеленной пары на положительно заряженном азоте в шестичленном кольце молекулы. Вода атакует альфа-углерод имина PLP-TYR и через ацильную замену выталкивает азот PLP и образует пиридоксаминфосфат (PMP) и 4-гидроксифенилпируват.
Затем PMP регенерируется в PLP путем переноса его аминогруппы на альфа-кетоглутарат, реформируя его альдегидную функциональную группу. За этим следует еще одна реакция замещения с остатком Lys280 для реформирования его иминной связи с ферментом, образуя ENZ-PLP.
Тирозиновая аминотрансфераза в виде димера имеет два идентичных активных центра. Lys280 присоединен к PLP, который удерживается на месте с помощью двух неполярных боковых цепей аминокислот: фенилаланина и изолейцина (см. миниатюру справа). PLP также удерживается на месте водородными связями с окружающими молекулами, в основном своей фосфатной группой.
Ниже показан один активный участок при трех разных увеличениях:
Тирозинемия является наиболее распространенным метаболическим заболеванием, связанным с тирозинаминотрансферазой. Заболевание возникает из-за дефицита печеночной тирозинаминотрансферазы. [10] Тирозинемия II типа (синдром Рихнера-Ханхарта, RHS) является заболеванием с аутосомно-рецессивным типом наследования, характеризующимся кератитом, ладонно-подошвенным гиперкератозом, умственной отсталостью и повышенным уровнем тирозина в крови. [10] Кератит у пациентов с тирозинемией II типа вызван отложением кристаллов тирозина в роговице и приводит к воспалению роговицы. [11] Ген TAT расположен на человеческой хромосоме 16q22-24 и простирается на 10,9 килобаз (кб), содержащих 12 экзонов, а его мРНК размером 3,0 кб кодирует белок из 454 аминокислот массой 50,4 кДа. [12] Было зарегистрировано двенадцать различных мутаций гена TAT. [12]
Молекулярные графические изображения были получены с использованием пакета UCSF Chimera из Ресурса по биовычислениям, визуализации и информатике Калифорнийского университета в Сан-Франциско (при поддержке NIH P41 RR-01081).