Транслокон (также известный как транслокатор или канал транслокации ) представляет собой комплекс белков , связанных с транслокацией полипептидов через мембраны. [1] У эукариот термин транслокон чаще всего относится к комплексу, который транспортирует зарождающиеся полипептиды с целевой сигнальной последовательностью во внутреннее (цистернальное или люменальное) пространство эндоплазматического ретикулума (ЭР) из цитозоля . Этот процесс транслокации требует, чтобы белок пересек гидрофобный липидный бислой . Тот же комплекс также используется для интеграции зарождающихся белков в саму мембрану ( мембранные белки ). У прокариот аналогичный белковый комплекс транспортирует полипептиды через (внутреннюю) плазматическую мембрану или интегрирует мембранные белки. [2] В любом случае белковый комплекс образован из белков Sec (Sec: секреторный), причем гетеротримерный Sec61 является каналом. [3] У прокариот гомологичный комплекс каналов известен как SecYEG. [4]
В этой статье основное внимание уделяется собственным транслоконам клетки, однако патогены также могут собирать другие транслоконы в мембранах своих хозяев, что позволяет им экспортировать факторы вирулентности в свои целевые клетки. [5]
Канал транслокации представляет собой гетеротримерный белковый комплекс, называемый SecYEG у прокариот и Sec61 у эукариот. [6] Он состоит из субъединиц SecY, SecE и SecG. Структура этого канала в его неактивном состоянии была решена с помощью рентгеновской кристаллографии у архей . [4] SecY — это большая субъединица поры. На виде сбоку канал имеет форму песочных часов с воронкой на каждой стороне. Внеклеточная воронка имеет небольшую «заглушку», образованную из альфа-спирали . В середине мембраны находится конструкция, образованная поровым кольцом из шести гидрофобных аминокислот, которые проецируют свои боковые цепи внутрь. Во время транслокации белка заглушка отодвигается с пути, и полипептидная цепь перемещается из цитоплазматической воронки через поровое кольцо, внеклеточную воронку, во внеклеточное пространство. Гидрофобные сегменты мембранных белков выходят сбоку через латеральные ворота в липидную фазу и становятся сегментами, пронизывающими мембрану. [4]
В бактериях SecYEG образует комплекс с SecDF, YajC и YidC. [7] [8] В эукариотах Sec61 образует комплекс с комплексом олигосахарилтрансферазы , комплексом TRAP и мембранным белком TRAM (возможный шаперон). Для других компонентов, таких как комплекс сигнальной пептидазы и рецептор SRP, неясно, в какой степени они только временно ассоциируются с комплексом транслокона. [9]
Канал позволяет пептидам перемещаться в любом направлении, поэтому для перемещения пептида в определенном направлении требуются дополнительные системы в транслоконе. Существует три типа транслокации: котрансляционная транслокация, которая происходит во время трансляции, и два типа посттрансляционной транслокации, которая происходит после трансляции, каждый из которых наблюдается у эукариот и бактерий. В то время как эукариоты разворачивают белок с помощью BiP и используют другие комплексы для транспортировки пептида, бактерии используют АТФазу SecA . [10]
При котрансляционной транслокации транслокон ассоциируется с рибосомой , так что растущая зарождающаяся полипептидная цепь перемещается из туннеля рибосомы в канал SecY. Транслокон (транслокатор) действует как канал через гидрофобную мембрану эндоплазматического ретикулума (после того, как SRP диссоциировал и трансляция продолжается). Возникающий полипептид протягивается через канал в виде развернутой цепочки аминокислот, потенциально управляемой броуновским храповиком . После завершения трансляции сигнальная пептидаза отщепляет короткий сигнальный пептид от зарождающегося белка, оставляя полипептид свободным внутри эндоплазматического ретикулума. [11] [12]
У эукариот белки, которые должны быть перемещены в эндоплазматический ретикулум, распознаются частицей распознавания сигнала (SRP), которая останавливает трансляцию полипептида рибосомой , пока она прикрепляет рибосому к рецептору SRP на эндоплазматическом ретикулуме. Это событие распознавания основано на специфической N-концевой сигнальной последовательности, которая находится в первых нескольких кодонах синтезируемого полипептида. [10] Бактерии также используют SRP вместе с шапероном YidC, который похож на TRAM эукариот. [13] [10]
Транслокон также может перемещать и интегрировать мембранные белки в правильной ориентации в мембрану эндоплазматического ретикулума. Механизм этого процесса не полностью изучен, но включает в себя распознавание и обработку транслоконом гидрофобных участков в аминокислотной последовательности, которые должны стать трансмембранными спиралями . Закрытая последовательностями стоп-переноса и открытая встроенными сигнальными последовательностями, пробка изменяется между своим открытым и закрытым состояниями, чтобы размещать спирали в разных ориентациях. [10]
У эукариот посттрансляционная транслокация зависит от BiP и других комплексов, включая комплекс интегральных мембранных белков SEC62 / SEC63 . В этом режиме транслокации Sec63 помогает BiP гидролизовать АТФ, который затем связывается с пептидом и «вытягивает» его. Этот процесс повторяется для других молекул BiP, пока весь пептид не будет вытянут. [10]
У бактерий тот же процесс выполняется «толкающей» АТФазой, известной как SecA , иногда с помощью комплекса SecDF на другой стороне, ответственного за вытягивание. [14] АТФаза SecA использует механизм «толкай и скользи» для перемещения полипептида через канал. В связанном с АТФ состоянии SecA взаимодействует через двухспиральный палец с подмножеством аминокислот в субстрате, проталкивая их (с гидролизом АТФ) в канал. Затем взаимодействие ослабевает, когда SecA входит в связанное с АДФ состояние, позволяя полипептидной цепи пассивно скользить в любом направлении. Затем SecA захватывает еще один участок пептида, чтобы повторить процесс. [10]
Транслокаторы также могут перемещать полипептиды (например, поврежденные белки, предназначенные для протеасом ) из цистернального пространства эндоплазматического ретикулума в цитозоль. ER-белки деградируют в цитозоле с помощью 26S- протеасомы , этот процесс известен как деградация белков, связанная с эндоплазматическим ретикулумом , и поэтому должны транспортироваться по соответствующему каналу. Этот ретротранслокон все еще остается загадкой.
Первоначально считалось, что канал Sec61 отвечает за этот ретроградный транспорт, подразумевая, что транспорт через Sec61 не всегда однонаправленный, а может быть и двунаправленным. [15] Однако структура Sec61 не подтверждает эту точку зрения, и было высказано предположение, что за транспорт из просвета ЭР в цитозоль отвечают несколько различных белков. [16]