Пипетка (иногда пишется как пипетка ) — это тип лабораторного инструмента, обычно используемый в химии и биологии для транспортировки измеренного объема жидкости, часто в качестве дозатора сред . Пипетки бывают нескольких конструкций для различных целей с разной степенью точности и правильности , от цельных стеклянных пипеток до более сложных регулируемых или электронных пипеток. Многие типы пипеток работают, создавая частичный вакуум над камерой для хранения жидкости и выборочно выпуская этот вакуум для втягивания и дозирования жидкости. Точность измерения сильно различается в зависимости от прибора.
Первые простые пипетки были сделаны из стекла, например, пипетки Пастера . Большие пипетки продолжают делать из стекла; другие сделаны из сжимаемого пластика для ситуаций, когда не требуется точный объем.
Первая микропипетка была запатентована в 1957 году доктором Генрихом Шнитгером ( Марбург , Германия). Основатель компании Eppendorf , доктор Генрих Нетелер, унаследовал права и начал коммерческое производство микропипеток в 1961 году.
Регулируемая микропипетка — изобретение из Висконсина, разработанное в результате взаимодействия нескольких людей, в первую очередь изобретателя Уоррена Гилсона и Генри Ларди, профессора биохимии в Университете Висконсин-Мэдисон . [1] [2]
Хотя для каждого типа пипетки существуют свои названия, на практике любой тип можно назвать «пипеткой». [3] Пипетки, которые дозируют менее 1000 мкл , иногда называют микропипетками.
Термины «пипетка» и «пипетка» используются взаимозаменяемо, несмотря на незначительные исторические различия в их использовании. [4]
Микропипетки с вытеснением воздуха — это тип регулируемых микропипеток, которые подают измеряемый объем жидкости; в зависимости от размера, он может составлять от 0,1 мкл до 1000 мкл (1 мл). Для этих пипеток требуются одноразовые наконечники, которые контактируют с жидкостью.
Эти пипетки работают по принципу вытеснения воздуха поршнем . Вакуум создается вертикальным перемещением металлического или керамического поршня внутри герметичной гильзы. Когда поршень движется вверх, приводимый в движение нажатием плунжера, в пространстве, оставленном поршнем, создается вакуум. Жидкость вокруг наконечника перемещается в этот вакуум (вместе с воздухом в наконечнике) и затем может транспортироваться и выпускаться по мере необходимости. Эти пипетки способны быть очень точными и аккуратными. Однако, поскольку они основаны на вытеснении воздуха, они подвержены неточностям, вызванным изменением окружающей среды, в частности температуры и техники пользователя. По этим причинам это оборудование должно тщательно обслуживаться и калиброваться, а пользователи должны быть обучены правильной и последовательной технике.
Микропипетка была изобретена и запатентована в 1960 году доктором Генрихом Шнитгером в Марбурге , Германия. Впоследствии соучредитель биотехнологической компании Eppendorf , доктор Генрих Нетелер, унаследовал права и инициировал глобальное и общее использование микропипеток в лабораториях. В 1972 году регулируемая микропипетка была изобретена в Университете Висконсин-Мэдисон несколькими людьми, в первую очередь Уорреном Гилсоном и Генри Ларди. [5]
Типы пипеток с вытеснением воздуха включают:
Независимо от марки или стоимости пипетки, каждый производитель микропипеток рекомендует проверять калибровку не реже одного раза в шесть месяцев, если они используются регулярно. Компании в фармацевтической или пищевой промышленности обязаны калибровать свои пипетки ежеквартально (каждые три месяца). Школы, в которых проводятся занятия по химии, могут проводить эту процедуру ежегодно. Те, кто изучает судебную экспертизу и исследования, где обычно проводится много испытаний, будут выполнять ежемесячную калибровку.
Чтобы свести к минимуму возможное развитие заболеваний опорно-двигательного аппарата из-за многократного пипетирования, электронные пипетки обычно заменяют механические.
Они похожи на пипетки с вытеснением воздуха, но используются реже и применяются для предотвращения загрязнения и для летучих или вязких веществ в малых объемах, таких как ДНК . Основное отличие заключается в том, что одноразовый наконечник представляет собой микрошприц (пластик), состоящий из капилляра и поршня (подвижной внутренней части), который непосредственно вытесняет жидкость.
Объемные пипетки или пипетки с грушей позволяют пользователю измерять объем раствора с исключительной точностью (точность до четырех значащих цифр). Эти пипетки имеют большую грушу с длинной узкой частью сверху с одной градуировкой, поскольку она откалибрована для одного объема (как мерная колба ). Типичные объемы составляют 20, 50 и 100 мл. Объемные пипетки обычно используются для приготовления лабораторных растворов из базового раствора, а также для подготовки растворов для титрования .
Градуированные пипетки — это тип макропипеток, состоящий из длинной трубки с серией градуировок, как на градуированном цилиндре или бюретке , для указания различных калиброванных объемов. Им также требуется источник вакуума; на заре химии и биологии использовался рот. Правила безопасности включали утверждение: «Никогда не пипетируйте ртом KCN, NH3, сильные кислоты, основания и соли ртути». Некоторые пипетки изготавливались с двумя пузырьками между мундштуком и линией уровня раствора, чтобы защитить химика от случайного проглатывания раствора.
Пипетки Пастера — это пластиковые или стеклянные пипетки, которые используются для переноса небольших объемов жидкостей, но не градуированы и не калиброваны для какого-либо определенного объема. Груша отделена от корпуса пипетки. Пипетки Пастера также называются пипетками -сосками , капельницами , глазными пипетками и химическими капельницами .
Пипетки для переноса , также известные как пипетки Берала , похожи на пипетки Пастера, но изготовлены из цельного куска пластика, а их груша может служить камерой для хранения жидкости.
Пипеточные шприцы — это ручные устройства, которые сочетают в себе функции объемных (грушевых) пипеток, градуированных пипеток и бюреток . Они откалиброваны в соответствии со стандартами ISO по объему класса A. Стеклянная или пластиковая трубка пипетки используется с поршнем, управляемым большим пальцем, и PTFE- уплотнителем, который скользит внутри пипетки в операции положительного вытеснения. Такое устройство можно использовать для самых разных жидкостей (водных, вязких и летучих жидкостей; углеводородов; эфирных масел и смесей) в объемах от 0,5 мл до 25 мл. Такое расположение обеспечивает улучшение точности, безопасности обращения, надежности, экономичности и универсальности. Для пипеточного шприца не требуются одноразовые наконечники или вспомогательные средства для пипетирования.
Пипетка Ван Слайка, изобретенная Дональдом Декстером Ван Слайком , представляет собой градуированную пипетку, обычно используемую в медицинской технике с серологическими пипетками для объемного анализа. [6]
Пипетка Оствальда–Фолина, разработанная Вильгельмом Оствальдом и усовершенствованная Отто Фолином , представляет собой тип объемной пипетки, используемой для измерения вязких жидкостей, таких как цельная кровь или сыворотка. [7] [8]
Газовая пипетка Винклера-Денниса, разработанная Клеменсом Винклером и усовершенствованная Луисом Манро Деннисом, представляет собой аппарат для контролируемой реакции жидкостей под действием слабого электрического тока и подачи кислорода. [9]
Они используются для физического взаимодействия с микроскопическими образцами, например, в процедурах микроинъекции и патч-клампинга . Большинство микропипеток изготавливаются из боросиликата , алюмосиликата или кварца , при этом доступны многие типы и размеры стеклянных трубок. Каждый из этих составов обладает уникальными свойствами, которые определяют подходящие области применения.
Стеклянные микропипетки изготавливаются в микропипеточном извлекателе и обычно используются в микроманипуляторе .
Недавнее введение в область микропипеток объединяет универсальность микрофлюидики в свободно позиционируемую платформу пипетки. На кончике устройства создается локализованная зона потока, что позволяет осуществлять постоянный контроль среды нанолитра, непосредственно перед пипеткой. Пипетки изготовлены из полидиметилсилоксана (PDMS), который формируется с помощью реактивного литья под давлением. Интерфейс этих пипеток с использованием пневматики позволяет загружать и переключать несколько растворов по требованию, со временем замены раствора 100 мс.
Изобретено Аларом Айнлой, в настоящее время работающим в Лаборатории биофизических технологий [10] в Технологическом университете Чалмерса в Швеции. [11]
В Брукхейвенской национальной лаборатории была разработана пипетка на зептолитров . Пипетка сделана из углеродной оболочки, внутри которой находится сплав золота и германия. Пипетка использовалась для изучения того, как происходит кристаллизация . [12]
Разработано множество устройств для более безопасного, простого и эффективного пипетирования. Например, моторизованный контроллер пипетки может помочь в аспирации или дозировании жидкости с помощью волюметрических пипеток или градуированных пипеток; [13] планшет может взаимодействовать в режиме реального времени с пипеткой и направлять пользователя по протоколу; [14] а станция пипетки может помочь контролировать глубину погружения наконечника пипетки и улучшить эргономику. [15]
Роботы-пипетки способны манипулировать пипетками так же, как это делают люди. [16]
Повторная калибровка пипеток [17] является важным фактором в лабораториях, использующих эти устройства. Это процесс определения точности измерительного прибора путем сравнения с прослеживаемыми эталонными стандартами NIST . Калибровка пипеток необходима для обеспечения работы прибора в соответствии с ожиданиями и в соответствии с определенными режимами или рабочими протоколами. Калибровка пипеток считается сложным делом, поскольку она включает в себя множество элементов процедуры калибровки и несколько вариантов протокола калибровки, а также марки и модели пипеток, которые следует учитывать.
Правильная поза при пипетировании является наиболее важным элементом в установлении хороших эргономичных рабочих практик. [18] Во время повторяющихся задач, таких как пипетирование, поддержание положения тела, которое обеспечивает максимальную силу с наименьшим количеством мышечного напряжения, важно для минимизации риска получения травмы. Ряд распространенных методов пипетирования были определены как потенциально опасные из-за биомеханических факторов стресса. Рекомендации по корректирующим действиям при пипетировании, разработанные различными правительственными агентствами США и экспертами по эргономике, представлены ниже.
В отличие от традиционных осевых пипеток, эргономичное пипетирование может влиять на осанку и предотвращать распространенные травмы при пипетировании, такие как синдром запястного канала, тендинит и другие заболевания опорно-двигательного аппарата. [19] Для «эргономически правильного» необходимо внести существенные изменения в традиционные позы пипетирования, например:
минимизируйте вращение предплечий и запястий, держите руки и локти низко, расслабьте плечи и верхнюю часть рук.
Обычно пипетки хранятся вертикально на держателе, называемом подставкой для пипеток. В случае электронных пипеток такие подставки могут перезаряжать свои батареи. Самые передовые подставки для пипеток могут напрямую управлять электронными пипетками. [20]
Альтернативной технологией, особенно для перекачки небольших объемов (микро- и нанолитров), является акустический выброс капель .