Циклический ди-ГМФ (также называемый циклическим дигуанилатом и c-ди- ГМФ ) является вторичным мессенджером , используемым в передаче сигнала у самых разных бактерий . [1] Циклический ди-ГМФ, как известно, не используется археями и был обнаружен только у эукариот в Dictyostelium . [2] Биологическая роль циклического ди-ГМФ была впервые раскрыта, когда он был идентифицирован как аллостерический активатор целлюлозосинтазы, обнаруженной в Gluconacetobacter xylinus , для производства микробной целлюлозы . [3]
По своей структуре это цикл, содержащий только два основания гуанина , связанных рибозой и фосфатом .
Контакт с поверхностями увеличивает c-di-GMP, что увеличивает транскрипцию , трансляцию и посттрансляцию экзополисахаридов (EPS) и других компонентов внеклеточного полимерного вещества матрицы (см. обзор Jenal et al 2017). [4] У бактерий определенные сигналы передаются путем синтеза или деградации циклического di-GMP. Циклический di-GMP синтезируется белками с активностью дигуанилатциклазы . Эти белки обычно имеют характерный мотив GGDEF , который относится к консервативной последовательности из пяти аминокислот . Деградация циклического di-GMP зависит от белков с активностью фосфодиэстеразы . Эти белки имеют либо мотив аминокислот EAL, либо HD-GYP. Процессы, которые, как известно, регулируются циклическим ди-ГМФ, по крайней мере, в некоторых организмах, включают образование биопленки (например, матрицы ЭПС, обнаруженные Штайнером и др. в 2013 г.), [4] подвижность (особенно переход от подвижного к сидячему положению, см. обзор Дженала и др. в 2017 г.) [4] и продукцию факторов вирулентности .
Уровни циклического ди-ГМФ регулируются с помощью различных механизмов. Многие белки с доменами GGDEF, EAL или HD-GYP обнаружены с другими доменами, которые могут получать сигналы, такими как домены PAS . Считается, что ферменты, которые расщепляют или синтезируют циклический ди-ГМФ, локализуются в определенных областях клетки, где они влияют на приемники в ограниченном пространстве. [1] В Gluconacetobacter xylinus c-di-GMP стимулирует полимеризацию глюкозы в целлюлозу как высокоаффинный аллостерический активатор фермента целлюлозосинтазы. [3] Некоторые ферменты дигуанилатциклазы аллостерически ингибируются циклическим ди-ГМФ.
Уровни циклического ди-ГМФ регулируют другие процессы посредством ряда механизмов. Синтаза целлюлозы Gluconacetobacter xylinus аллостерически стимулируется циклическим ди-ГМФ, представляя механизм, посредством которого циклический ди-ГМФ может регулировать активность синтазы целлюлозы. Было показано, что домен PilZ связывает циклический ди-ГМФ и, как полагают, участвует в циклической ди-ГМФ-зависимой регуляции, но механизм, посредством которого он это делает, неизвестен. Недавние структурные исследования доменов PilZ двух видов бактерий продемонстрировали, что домены PilZ радикально меняют конформацию при связывании с циклическим ди-ГМФ. [5] [6] Это приводит к убедительному выводу о том, что конформационные изменения в доменах PilZ позволяют регулировать активность целевых эффекторных белков (таких как синтаза целлюлозы) циклическим ди-ГМФ. Рибопереключатели, называемые рибопереключателем циклического ди-ГМФ-I и рибопереключателем циклического ди-ГМФ-II, регулируют экспрессию генов в ответ на концентрации циклического ди-ГМФ у различных бактерий, но не у всех бактерий, которые, как известно, используют циклический ди-ГМФ.
Циклический ди-ГМФ был связан с ассоциацией хозяина у нескольких видов Pseudomonas . В эксперименте, где Pseudomonas lurida выращивалась в ассоциации с хозяином-нематодой Caenorhabditis elegans, генетические мутации были обнаружены в определенных генах, которые повышали регуляцию c-di-GMP, вызывая появление специализированного морфотипа хозяина. Мутации, влияющие на регуляцию c-di-GMP, были обнаружены с помощью секвенирования всего генома. Гены wspE и wspF из оперона wsp показали мутации, которые повышали регуляцию c-di-GMP. Кроме того, было установлено, что мутации в гене rph также влияют на экспрессию c-di-GMP, что является новым открытием, поскольку rph ранее не был связан с регуляцией c-di-GMP. [7]
Обзор ролей c-di-GMP в Caulobacter crescentus , Pseudomonas aeruginosa , Komagataeibacter xylinus / Gluconacetobacter xylinus , Myxococcus xanthus , Bdellovibrio бактериоворус и Pseudomonas fluorescens см. Jenal et al 2017. [4]