Липополисахарид , теперь более известный как эндотоксин , [1] является собирательным термином для компонентов внешней мембраны клеточной оболочки грамотрицательных бактерий, таких как E. coli и Salmonella [2] с общей структурной архитектурой. Липополисахариды ( ЛПС ) представляют собой большие молекулы, состоящие из трех частей: внешнего полисахарида ядра, называемого O- антигеном , внутреннего олигосахарида ядра и липида А (от которого в значительной степени зависит токсичность), все ковалентно связанные. В современной терминологии термин эндотоксин часто используется как синоним ЛПС, хотя существует несколько эндотоксинов (в первоначальном смысле токсинов , которые находятся внутри бактериальной клетки и высвобождаются при ее распаде), которые не связаны с ЛПС, например, так называемые белки дельта-эндотоксина, вырабатываемые Bacillus thuringiensis . [3]
Липополисахариды могут оказывать существенное влияние на здоровье человека, в первую очередь через взаимодействие с иммунной системой. ЛПС является мощным активатором иммунной системы и пирогеном ( агентом, вызывающим лихорадку). [4] В тяжелых случаях ЛПС может вызвать бурную реакцию хозяина и множественные типы острой недостаточности органов [5], что может привести к септическому шоку . [6] При более низких уровнях и в течение более длительного периода времени есть доказательства того, что ЛПС может играть важную и вредную роль в аутоиммунитете , ожирении , депрессии и клеточном старении . [7] [8] [9] [10]
Токсическая активность ЛПС была впервые обнаружена и названа эндотоксином Ричардом Фридрихом Йоханнесом Пфайффером . Он различал экзотоксины , токсины, которые выделяются бактериями в окружающую среду, и эндотоксины, которые являются токсинами «внутри» бактериальной клетки и выделяются только после разрушения бактериальной внешней мембраны. [11] Последующие работы показали, что высвобождение ЛПС из грамотрицательных микробов не обязательно требует разрушения стенки бактериальной клетки, а скорее ЛПС секретируется как часть нормальной физиологической активности перемещения мембранных везикул в форме бактериальных везикул внешней мембраны (OMV) , которые также могут содержать другие факторы вирулентности и белки. [12] [2]
ЛПС является основным компонентом внешней клеточной мембраны грамотрицательных бактерий , внося большой вклад в структурную целостность бактерий и защищая мембрану от определенных видов химической атаки. ЛПС является наиболее распространенным антигеном на поверхности клеток большинства грамотрицательных бактерий, составляя до 80% внешней мембраны E. coli и Salmonella . [2] ЛПС увеличивает отрицательный заряд клеточной мембраны и помогает стабилизировать общую структуру мембраны. Он имеет решающее значение для многих грамотрицательных бактерий, которые погибают, если гены, кодирующие его, мутируют или удаляются. Однако, по-видимому, ЛПС не является существенным по крайней мере для некоторых грамотрицательных бактерий, таких как Neisseria meningitidis , Moraxella catarrhalis и Acinetobacter baumannii . [13] Он также был вовлечен в непатогенные аспекты бактериальной экологии, включая поверхностную адгезию, чувствительность к бактериофагам и взаимодействие с хищниками, такими как амебы . ЛПС также необходим для функционирования омптинов , класса бактериальных протеаз. [14]
ЛПС являются амфипатическими и состоят из трех частей: О-антигена (или О-полисахарида), который является гидрофильным, основного олигосахарида (также гидрофильного) и липида А , гидрофобного домена.
Повторяющийся гликановый полимер, содержащийся в ЛПС, называется О- антигеном , О- полисахаридом или О-боковой цепью бактерий. О-антиген прикреплен к основному олигосахариду и составляет самый внешний домен молекулы ЛПС. Структура и состав О-цепи сильно варьируются от штамма к штамму, определяя серологическую специфичность родительского штамма бактерий; [15] существует более 160 различных структур О-антигенов, продуцируемых различными штаммами E. coli . [16] Наличие или отсутствие О-цепей определяет, считается ли ЛПС «шероховатым» или «гладким». Полноразмерные О-цепи сделают ЛПС гладким, тогда как отсутствие или уменьшение О-цепей сделает ЛПС шероховатым. [17] Бактерии с шероховатым ЛПС обычно имеют более проницаемые клеточные мембраны для гидрофобных антибиотиков, поскольку шероховатый ЛПС более гидрофобен . [18] О-антиген находится на самой внешней поверхности бактериальной клетки и, как следствие, является мишенью для распознавания антителами хозяина .
Основной домен всегда содержит олигосахаридный компонент, который присоединяется непосредственно к липиду А и обычно содержит сахара, такие как гептоза и 3-дезокси-D-манно-окт-2-улозоновая кислота (также известная как KDO, кето-дезоксиоктулозонат). [19] Основной олигосахарид менее изменчив по своей структуре и составу, данная основная структура является общей для больших групп бактерий. [15] Ядра ЛПС многих бактерий также содержат неуглеводные компоненты, такие как фосфат, аминокислоты и заместители этаноламина.
Липид А в нормальных условиях представляет собой фосфорилированный дисахарид глюкозамина , украшенный несколькими жирными кислотами . Эти гидрофобные цепи жирных кислот закрепляют ЛПС в бактериальной мембране, а остальная часть ЛПС выступает из поверхности клетки. Домен липида А является наиболее биоактивным и отвечает за большую часть токсичности грамотрицательных бактерий . Когда бактериальные клетки лизируются иммунной системой , фрагменты мембраны, содержащие липид А, могут высвобождаться в кровоток, вызывая лихорадку, диарею и возможный фатальный эндотоксический септический шок (форма септического шока ). Часть липида А является очень консервативным компонентом ЛПС. [20] Однако структура липида А различается у разных видов бактерий. Структура липида А в значительной степени определяет степень и характер общей иммунной активации хозяина. [21]
«Грубая форма» ЛПС имеет более низкую молекулярную массу из-за отсутствия полисахарида O. На его месте находится короткий олигосахарид: эта форма известна как липоолигосахарид (ЛОС) и представляет собой гликолипид, обнаруженный во внешней мембране некоторых типов грамотрицательных бактерий , таких как Neisseria spp. и Haemophilus spp. [7] [22] ЛОС играет центральную роль в поддержании целостности и функциональности внешней мембраны оболочки грамотрицательной клетки. ЛОС играют важную роль в патогенезе некоторых бактериальных инфекций, поскольку они способны действовать как иммуностимуляторы и иммуномодуляторы. [7] Кроме того, молекулы ЛОС отвечают за способность некоторых бактериальных штаммов демонстрировать молекулярную мимикрию и антигенное разнообразие , помогая уклоняться от иммунной защиты хозяина и, таким образом, способствуя вирулентности этих бактериальных штаммов . В случае Neisseria meningitidis липидная часть молекулы A имеет симметричную структуру, а внутреннее ядро состоит из 3-дезокси-D-манно-2-октулозоновой кислоты (KDO) и гептозы (Hep). Внешняя сердцевинная олигосахаридная цепь варьируется в зависимости от штамма бактерий . [7] [22]
Высококонсервативный фермент хозяина, называемый ацилоксиацилгидролазой (AOAH), может детоксифицировать ЛПС, когда он попадает в ткани животных или вырабатывается в них. Он также может преобразовывать ЛПС в кишечнике в ингибитор ЛПС. Нейтрофилы, макрофаги и дендритные клетки вырабатывают эту липазу, которая инактивирует ЛПС, удаляя две вторичные ацильные цепи из липида А для получения тетраацил-ЛПС. Если мышам вводить ЛПС парентерально, у тех, у кого отсутствует AOAH, развиваются высокие титры неспецифических антител, развивается длительная гепатомегалия и наблюдается длительная толерантность к эндотоксинам. Инактивация ЛПС может потребоваться животным для восстановления гомеостаза после парентерального воздействия ЛПС. [23] Хотя у мышей есть много других механизмов для ингибирования сигнализации ЛПС, ни один из них не способен предотвратить эти изменения у животных, у которых отсутствует AOAH.
Дефосфорилирование ЛПС щелочной фосфатазой кишечника может снизить тяжесть инфекции Salmonella tryphimurium и Clostridioides difficile , восстанавливая нормальную микробиоту кишечника. [24] Щелочная фосфатаза предотвращает воспаление кишечника (и « протекающий кишечник »), вызванное бактериями, путем дефосфорилирования липида А в составе ЛПС. [25] [26] [27]
Весь процесс создания ЛПС начинается с молекулы, называемой липидом A-Kdo2, которая сначала создается на поверхности внутренней мембраны бактериальной клетки. Затем к этой молекуле на внутренней мембране добавляются дополнительные сахара, прежде чем она перемещается в пространство между внутренней и внешней мембранами ( периплазматическое пространство ) с помощью белка, называемого MsbA. О-антиген, другая часть ЛПС, производится специальными ферментными комплексами на внутренней мембране. Затем он перемещается на внешнюю мембрану через три различные системы: одна зависит от Wzy, другая полагается на транспортеры ABC, а третья включает процесс, зависящий от синтазы. [30]
В конечном итоге ЛПС транспортируется к внешней мембране с помощью межмембранного мостика белков липолисахаридного транспорта (Lpt). [29] [31] Этот транспортер является потенциальной мишенью для антибиотиков. [32] [33]
Человеческое тело несет эндогенные запасы ЛПС. [34] Эпителиальные поверхности колонизированы сложной микробной флорой (включая грамотрицательные бактерии), которая превосходит по численности человеческие клетки в 10 раз. Грамотрицательные бактерии будут выделять эндотоксины. Это взаимодействие хозяина и микроба является симбиотическим отношением, которое играет решающую роль в системном иммунологическом гомеостазе. Когда оно нарушается, это может привести к таким заболеваниям, как эндотоксемия и эндотоксический септический шок.
ЛПС действует как прототипический эндотоксин, поскольку он связывает комплекс рецепторов CD14 / TLR4 / MD2 во многих типах клеток, но особенно в моноцитах , дендритных клетках , макрофагах и В-клетках , что способствует секреции провоспалительных цитокинов , оксида азота и эйкозаноидов . [35] Брюс Бейтлер был удостоен части Нобелевской премии по физиологии и медицине 2011 года за свою работу, продемонстрировавшую, что TLR4 является рецептором ЛПС. [36] [37]
Как часть реакции клетки на стресс , супероксид является одним из основных активных видов кислорода, индуцируемых ЛПС в различных типах клеток, которые экспрессируют TLR ( толл-подобный рецептор ). [38] ЛПС также является экзогенным пирогеном (веществом, вызывающим лихорадку). [4]
Функция ЛПС уже несколько лет находится в экспериментальном исследовании из-за его роли в активации многих факторов транскрипции . ЛПС также производит много типов медиаторов, участвующих в септическом шоке . Из млекопитающих люди гораздо более чувствительны к ЛПС, чем другие приматы [39] и другие животные (например, мыши). Доза 1 мкг/кг вызывает шок у людей, но мыши переносят дозу в тысячу раз большую. [40] Это может быть связано с различиями в уровне циркулирующих естественных антител между двумя видами. [41] [42] Это также может быть связано с множественными иммунными тактиками против патогенов и частью многогранной антимикробной стратегии, которая была сформирована изменениями в поведении человека в ходе эволюции нашего вида (например, употребление мяса, сельскохозяйственная практика и курение). [39] Саид и др. показали, что ЛПС вызывает ИЛ-10 -зависимое ингибирование расширения и функционирования Т-клеток CD4 путем повышения уровня PD-1 на моноцитах , что приводит к продукции ИЛ-10 моноцитами после связывания PD-1 с PD-L1 . [43]
Эндотоксины в значительной степени ответственны за драматические клинические проявления инфекций, вызванных патогенными грамотрицательными бактериями, такими как Neisseria meningitidis , возбудителями менингококковой инфекции , включая менингококцемию , синдром Уотерхауза-Фридериксена и менингит .
Было показано, что части ЛПС из нескольких штаммов бактерий химически схожи с молекулами поверхности клеток-хозяев человека; способность некоторых бактерий представлять на своей поверхности молекулы, которые химически идентичны или схожи с молекулами поверхности некоторых типов клеток-хозяев, называется молекулярной мимикрией . [44] Например, в Neisseria meningitidis L2,3,5,7,9 терминальная тетрасахаридная часть олигосахарида (лакто-N-неотетраоза) является тем же тетрасахаридом, что и обнаруженный в параглобозиде, предшественнике гликолипидных антигенов ABH, обнаруженных на эритроцитах человека . [7] В другом примере терминальная трисахаридная часть (лактотриаоза) олигосахарида из патогенных Neisseria spp. LOS также обнаружена в гликосфинголипидах лактонеозного ряда из клеток человека. [7] Было показано, что большинство менингококков из групп B и C, а также гонококков , имеют этот трисахарид как часть своей структуры LOS. [7] Наличие этих «имитаторов» поверхности человеческих клеток может, в дополнение к действию в качестве «камуфляжа» от иммунной системы, играть роль в отмене иммунной толерантности при инфицировании хозяев определенными генотипами человеческого лейкоцитарного антигена (HLA), такими как HLA-B35 . [7]
LPS может ощущаться непосредственно гемопоэтическими стволовыми клетками (HSC) через связь с TLR4, заставляя их пролиферировать в ответ на системную инфекцию. Этот ответ активирует сигнализацию TLR4-TRIF-ROS-p38 внутри HSC и через устойчивую активацию TLR4 может вызывать пролиферативный стресс, что приводит к нарушению их конкурентной способности к повторному заселению. [45] Инфекция у мышей с использованием S. typhimurium показала схожие результаты, подтверждая экспериментальную модель также in vivo .
О-антигены (внешние углеводы) являются наиболее изменчивой частью молекулы ЛПС, придающей антигенную специфичность. Напротив, липид А является наиболее консервативной частью. Однако состав липида А также может варьироваться (например, по количеству и природе ацильных цепей даже внутри или между родами). Некоторые из этих вариаций могут придавать антагонистические свойства этим ЛПС. Например, дифосфориллипид А Rhodobacter sphaeroides (RsDPLA) является мощным антагонистом ЛПС в клетках человека, но является агонистом в клетках хомяка и лошади. [46]
Было высказано предположение, что конический липид А (например, из E. coli ) является более агонистическим, в то время как менее конический липид А, как у Porphyromonas gingivalis, может активировать другой сигнал ( TLR2 вместо TLR4), а полностью цилиндрический липид А, как у Rhodobacter sphaeroides, является антагонистом TLR. [47] [48] В целом, кластеры генов ЛПС сильно различаются между различными штаммами, подвидами и видами бактериальных патогенов растений и животных. [49] [50]
Нормальная сыворотка крови человека содержит анти-LOS-антитела, которые являются бактерицидными, а пациенты с инфекциями, вызванными серотипически различными штаммами, обладают анти-LOS-антителами, которые отличаются по своей специфичности по сравнению с нормальной сывороткой. [51] Эти различия в гуморальном иммунном ответе на различные типы LOS могут быть отнесены к структуре молекулы LOS, в первую очередь в структуре олигосахаридной части молекулы LOS. [51] В Neisseria gonorrhoeae было показано, что антигенность молекул LOS может меняться во время инфекции из-за способности этих бактерий синтезировать более одного типа LOS, [51] эта характеристика известна как фазовая вариация . Кроме того, Neisseria gonorrhoeae , а также Neisseria meningitidis и Haemophilus influenzae [ 7] способны дополнительно модифицировать свой LOS in vitro , например, посредством сиалилирования (модификации остатками сиаловой кислоты), и в результате способны повышать свою устойчивость к комплемент -опосредованному уничтожению [51] или даже подавлять активацию комплемента [7] или избегать воздействия бактерицидных антител. [7] Сиалилирование может также способствовать затрудненному прикреплению нейтрофилов и фагоцитозу клетками иммунной системы, а также уменьшению окислительного взрыва. [ 7] Было также показано, что Haemophilus somnus , патоген крупного рогатого скота, демонстрирует изменение фазы LOS, характеристику, которая может помочь в уклонении от иммунной защиты хозяина крупного рогатого скота . [52] В совокупности эти наблюдения свидетельствуют о том, что изменения в молекулах бактериальной поверхности, таких как LOS, могут помочь патогену избежать как гуморальной (опосредованной антителами и комплементом), так и клеточно-опосредованной (например, уничтожение нейтрофилами) иммунной защиты хозяина.
Недавно было показано, что в дополнение к опосредованным TLR4 путям некоторые члены семейства ионных каналов транзиторного рецепторного потенциала распознают ЛПС. [53] Опосредованная ЛПС активация TRPA1 была показана у мышей [54] и мух Drosophila melanogaster . [55] При более высоких концентрациях ЛПС активирует и других членов семейства сенсорных каналов TRP , таких как TRPV1 , TRPM3 и в некоторой степени TRPM8 . [56] ЛПС распознается TRPV4 на эпителиальных клетках. Активация TRPV4 ЛПС была необходима и достаточна для индукции продукции оксида азота с бактерицидным эффектом. [57]
Липополисахарид является важным фактором, который делает бактерии вредоносными, и он помогает классифицировать их по разным группам на основе их структуры и функции. Это делает ЛПС полезным маркером для различения различных грамотрицательных бактерий. Быстрое выявление и понимание типов вовлеченных патогенов имеет решающее значение для оперативного управления и лечения инфекций. Поскольку ЛПС является основным триггером иммунного ответа в наших клетках, он действует как ранний сигнал острой инфекции. Поэтому тестирование ЛПС является более специфичным и значимым, чем многие другие серологические тесты. [58]
Современные методы тестирования ЛПС довольно чувствительны, но многие из них испытывают трудности с дифференциацией разных групп ЛПС. Кроме того, природа ЛПС, которая обладает как водопритягивающими, так и водоотталкивающими свойствами (амфифильная), затрудняет разработку чувствительных и удобных для пользователя тестов. [58]
Типичные методы обнаружения основаны на идентификации липида А в составе ЛПС, поскольку липид А очень похож среди различных видов и серотипов бактерий. Методы тестирования ЛПС делятся на шесть категорий, и они часто пересекаются: тесты in vivo, тесты in vitro, модифицированные иммуноанализы, биологические анализы и химические анализы. [58]
Поскольку ЛПС очень трудно измерить в цельной крови и поскольку большинство ЛПС связано с белками и комплементом, в 2003 году Управлением по контролю за продуктами и лекарствами США был разработан и одобрен Анализ активности эндотоксина (EAA™). EAA — это быстрый in vitro хемилюминесцентный иммунодиагностический тест. Он использует специфическое моноклональное антитело для измерения активности эндотоксина в образцах цельной крови с ЭДТА. Этот анализ использует биологическую реакцию нейтрофилов в крови пациента на иммунологический комплекс эндотоксина и экзогенного антитела — образующаяся хемилюминесцентная реакция создает излучение света. Количество хемилюминесценции пропорционально логарифмической концентрации ЛПС в образце и является мерой активности эндотоксина в крови. [59] Анализ реагирует специфически с частью липида А ЛПС грамотрицательных бактерий и не вступает в перекрестную реакцию с компонентами клеточной стенки грамположительных бактерий и других микроорганизмов.
ЛПС — это мощный токсин, который, попадая в организм, вызывает воспаление, связываясь с клеточными рецепторами. Избыток ЛПС в крови, эндотоксемия, может вызвать крайне летальную форму сепсиса, известную как эндотоксический септический шок. [5] Это состояние включает симптомы, которые попадают в континуум патофизиологических состояний, начиная с синдрома системной воспалительной реакции (SIRS) и заканчивая синдромом полиорганной дисфункции (MODS) перед смертью. Ранние симптомы включают учащенное сердцебиение, учащенное дыхание, перепады температуры и проблемы со свертываемостью крови, что приводит к расширению кровеносных сосудов и уменьшению объема крови, что приводит к клеточной дисфункции. [58]
Недавние исследования показывают, что даже небольшое воздействие ЛПС связано с аутоиммунными заболеваниями и аллергиями. Высокий уровень ЛПС в крови может привести к метаболическому синдрому, увеличивая риск таких состояний, как диабет, болезни сердца и проблемы с печенью. [58]
ЛПС также играет важную роль в симптомах, вызванных инфекциями, вызванными вредными бактериями, включая такие тяжелые состояния, как синдром Уотерхауса-Фридериксена, менингококкемия и менингит. Некоторые бактерии могут адаптировать свои ЛПС, чтобы вызывать длительные инфекции в дыхательной и пищеварительной системах. [58]
Недавние исследования показали, что ЛПС разрушает липиды клеточной мембраны, влияя на уровень холестерина и метаболизм, что потенциально приводит к высокому уровню холестерина, аномальным уровням липидов в крови и неалкогольной жировой болезни печени. В некоторых случаях ЛПС может мешать выведению токсинов, что может быть связано с неврологическими проблемами. [58]
В целом, воздействие ЛПС на здоровье обусловлено его способностью быть мощным активатором и модулятором иммунной системы, особенно его способностью вызывать воспаление. ЛПС является непосредственно цитотоксичным и высокоиммуностимулирующим – поскольку иммунные клетки хозяина распознают ЛПС, комплемент сильно активируется. Активация комплемента и усиление противовоспалительного ответа могут привести к дисфункции иммунных клеток, иммуносупрессии, распространенной коагулопатии, серьезному повреждению тканей и могут прогрессировать до полиорганной недостаточности и смерти. [39]
Наличие эндотоксинов в крови называется эндотоксемией. Высокий уровень эндотоксемии может привести к септическому шоку [ 60] или, более конкретно, эндотоксическому септическому шоку [5] , в то время как более низкая концентрация эндотоксинов в кровотоке называется метаболической эндотоксемией [61] . Эндотоксемия связана с ожирением, диетой [62], сердечно-сосудистыми заболеваниями [62] и диабетом [61] , а также генетика хозяина может иметь влияние [63] .
Более того, эндотоксемия кишечного происхождения, особенно на границе хозяина и патогена , считается важным фактором развития алкогольного гепатита [64] , который, вероятно, развивается на основе синдрома избыточного бактериального роста в тонкой кишке и повышенной проницаемости кишечника [65] .
Липид А может вызывать неконтролируемую активацию иммунной системы млекопитающих с выработкой воспалительных медиаторов, что может привести к эндотоксическому септическому шоку . [22] [5] Эта воспалительная реакция в первую очередь опосредована Toll-подобным рецептором 4 , который отвечает за активацию клеток иммунной системы. [22] Повреждение эндотелиального слоя кровеносных сосудов, вызванное этими воспалительными медиаторами, может привести к синдрому капиллярной утечки , расширению кровеносных сосудов и снижению сердечной функции, а также может еще больше усугубить шок. [66] ЛПС также является мощным активатором комплемента. [66] Неконтролируемая активация комплемента может вызвать деструктивное повреждение эндотелия, приводящее к диссеминированному внутрисосудистому свертыванию (ДВС) или атипичному гемолитико-уремическому синдрому (аГУС) с повреждением различных органов, включая почки и легкие. [67] Кожа может показывать последствия сосудистого повреждения, часто в сочетании с истощением факторов свертывания в виде петехий , пурпуры и экхимозов . Конечности также могут быть затронуты, иногда с разрушительными последствиями, такими как развитие гангрены , требующей последующей ампутации . [66] Потеря функции надпочечников может вызвать надпочечниковую недостаточность , а дополнительное кровоизлияние в надпочечники вызывает синдром Уотерхауза-Фридериксена , оба из которых могут быть опасны для жизни.
Также сообщалось, что гонококковый ЛОС может вызывать повреждение фаллопиевых труб человека . [51]
Toraymyxin — широко используемая экстракорпоральная терапия удаления эндотоксинов посредством прямой гемоадсорбции (также называемой гемоперфузией). Это картридж, полученный из полистирола, с молекулами полимиксина B (PMX-B), ковалентно связанными с сетчатыми волокнами, содержащимися в нем. Полимиксины — это циклические катионные полипептидные антибиотики, полученные из Bacillus polymyxa, с эффективной антимикробной активностью против грамотрицательных бактерий, но их внутривенное клиническое применение было ограничено из-за их побочных эффектов нефротоксичности и нейротоксичности. [68] Экстракорпоральное использование картриджа Toraymyxin позволяет PMX-B связывать липид A с очень стабильным взаимодействием с его гидрофобными остатками, тем самым нейтрализуя эндотоксины, когда кровь фильтруется через экстракорпоральный контур внутри картриджа, тем самым обращая эндотоксемию и избегая ее токсических системных эффектов. [69]
Молекулярная мимикрия некоторых молекул LOS, как полагают, вызывает аутоиммунные реакции хозяина, такие как вспышки рассеянного склероза . [7] [44] Другие примеры бактериальной мимикрии структур хозяина посредством LOS обнаружены у бактерий Helicobacter pylori и Campylobacter jejuni , организмов, вызывающих желудочно-кишечные заболевания у людей, и Haemophilus ducreyi , вызывающего мягкий шанкр . Определенные серотипы LPS C. jejuni (относящиеся к определенным тетра- и пентасахаридным фрагментам основного олигосахарида) также связаны с синдромом Гийена-Барре и вариантом Гийена-Барре, называемым синдромом Миллера-Фишера . [7]
Эпидемиологические исследования показали, что повышенная нагрузка эндотоксином, которая может быть результатом увеличения популяции бактерий, продуцирующих эндотоксин, в кишечном тракте, связана с определенными группами пациентов, страдающих ожирением. [8] [70] [71] Другие исследования показали, что очищенный эндотоксин из Escherichia coli может вызывать ожирение и резистентность к инсулину при инъекции в стерильные мышиные модели . [72] Более недавнее исследование выявило потенциально способствующую роль Enterobacter cloacae B29 в развитии ожирения и резистентности к инсулину у пациента-человека. [73] Предполагаемый механизм связи эндотоксина с ожирением заключается в том, что эндотоксин вызывает опосредованный воспалением путь, отвечающий за наблюдаемое ожирение и резистентность к инсулину. [72] Бактериальные роды, связанные с эффектами ожирения, связанными с эндотоксином, включают Escherichia и Enterobacter .
Существуют экспериментальные и наблюдательные доказательства того, что ЛПС может играть роль в депрессии. Введение ЛПС мышам может привести к симптомам депрессии, и, по-видимому, у некоторых людей с депрессией наблюдается повышенный уровень ЛПС. Воспаление иногда может играть роль в развитии депрессии, а ЛПС является провоспалительным. [9]
Воспаление, вызванное ЛПС, может вызывать клеточное старение , как это было показано для эпителиальных клеток легких и микроглиальных клеток (последние приводят к нейродегенерации ). [10]
Липополисахариды часто являются загрязнителями плазмидной ДНК, полученной из бактерий или белков, экспрессируемых из бактерий, и должны быть удалены из ДНК или белка, чтобы избежать загрязняющих экспериментов и токсичности продуктов, произведенных с использованием промышленной ферментации . [74]
Овальбумин часто загрязняется эндотоксинами. Овальбумин является одним из тщательно изученных белков в животных моделях, а также установленным модельным аллергеном для гиперреактивности дыхательных путей (AHR). Коммерчески доступный овальбумин, загрязненный ЛПС, может фальсифицировать результаты исследований, поскольку он неточно отражает влияние белкового антигена на физиологию животных. [75]
В фармацевтическом производстве необходимо удалить все следы эндотоксина из контейнеров с лекарственными препаратами, поскольку даже небольшое количество эндотоксина может вызвать заболевание у людей. Для этой цели используется печь депирогенизации . Для полного расщепления ЛПС требуются температуры свыше 300 °C. [76]
Стандартным анализом для обнаружения наличия эндотоксина является анализ лизата амебоцитов Limulus (LAL), в котором используется кровь мечехвоста ( Limulus polyphemus ). [77] Очень низкие уровни ЛПС могут вызвать коагуляцию лизата амебоцитов Limulus из-за мощной амплификации через ферментативный каскад. Однако из-за сокращения популяции мечехвостов и того факта, что существуют факторы, которые мешают анализу LAL, были предприняты попытки разработать альтернативные анализы, наиболее многообещающими из которых являются тесты ELISA с использованием рекомбинантной версии белка в анализе LAL, фактора C. [78]