2000–01 Кипрский первый дивизион был 62-м сезоном кипрской высшей футбольной лиги. Омония выиграла свой 18-й титул.
В Первом дивизионе Кипра 2000–01 участвовало четырнадцать команд. Все команды играли друг с другом дважды, один раз дома и один раз на выезде. Команда, набравшая наибольшее количество очков в конце сезона, становилась чемпионом. Последние три команды были переведены во Второй дивизион Кипра 2001–02 .
Чемпионы обеспечили себе участие в Лиге чемпионов УЕФА 2001–02 и стали серебряными призерами Кубка УЕФА 2001–02 .
Команды должны были заявить о своей заинтересованности в участии в Кубке Интертото УЕФА 2001 года до окончания чемпионата. По окончании чемпионата команда, занявшая более высокое место среди заинтересованных, принимала участие в Кубке Интертото (если она не обеспечила себе участие в каком-либо другом турнире УЕФА).
За победу команды получали три очка, за ничью — одно очко, за поражение — ноль очков.
Ethnikos Assia , Anagennisi Deryneia и Alki Larnaca вылетели из лиги в предыдущем сезоне и играли во втором дивизионе Кипра 2000–01 . Их заменили первые три команды второго дивизиона Кипра 1999–2000 годов : Digenis Morphou , Aris Limassol и Doxa Katokopias .
Перед началом сезона «АПОП Пафос» и «Эвагорас Пафос» были объединены в «АЕП Пафос» , который занял место «АПОП Пафос» в Первом дивизионе Кипра.
