Ангиогенез — это физиологический процесс, посредством которого новые кровеносные сосуды образуются из уже существующих сосудов, [1] [2] [3], образованных на более ранней стадии васкулогенеза . Ангиогенез продолжает рост сосудистой сети в основном за счет процессов прорастания и расщепления, но такие процессы, как коалесцентный ангиогенез , [4] удлинение сосудов и кооптация сосудов, также играют свою роль. [2] Васкулогенез — это эмбриональное образование эндотелиальных клеток из предшественников мезодермальных клеток, [5] и из неоваскуляризации , хотя обсуждения не всегда точны (особенно в старых текстах). Первые сосуды в развивающемся эмбрионе образуются посредством васкулогенеза, после чего ангиогенез отвечает за большую часть, если не за весь, рост кровеносных сосудов во время развития и при заболеваниях. [6] [7] [8]
Ангиогенез является нормальным и жизненно важным процессом роста и развития, а также заживления ран и образования грануляционной ткани . Однако он также является основополагающим этапом перехода опухолей из доброкачественного состояния в злокачественное , что привело к использованию ингибиторов ангиогенеза при лечении рака . [9] Существенная роль ангиогенеза в росте опухолей была впервые предложена в 1971 году Джудой Фолкманом , который описал опухоли как «горячие и кровавые», [10] иллюстрируя, что, по крайней мере, для многих типов опухолей характерны приливная перфузия и даже гиперемия .
Прорастающий ангиогенез был первой идентифицированной формой ангиогенеза, и поэтому он гораздо более понятен, чем инвагинальный ангиогенез. Он происходит в несколько хорошо охарактеризованных стадий. Первоначальный сигнал исходит из областей ткани, лишенных сосудистой сети. Гипоксия, которая отмечается в этих областях, заставляет ткани требовать наличия питательных веществ и кислорода, которые позволят ткани выполнять метаболическую активность. Из-за этого паренхиматозные клетки будут секретировать фактор роста эндотелия сосудов ( VEGF-A ), который является проангиогенным фактором роста. [11] Эти биологические сигналы активируют рецепторы на эндотелиальных клетках, присутствующих в уже существующих кровеносных сосудах. Во-вторых, активированные эндотелиальные клетки, также известные как кончиковые клетки , [12] начинают выделять ферменты, называемые протеазами , которые разрушают базальную мембрану , позволяя эндотелиальным клеткам выходить из исходных (родительских) стенок сосудов. Затем эндотелиальные клетки пролиферируют в окружающий матрикс и образуют твердые ростки, соединяющие соседние сосуды. Клетки, которые пролиферируют, расположены позади клеток кончика и известны как клетки стебля . [12] Пролиферация этих клеток позволяет капиллярному ростку одновременно расти в длину.
По мере того, как отростки распространяются к источнику ангиогенного стимула, эндотелиальные клетки мигрируют в тандеме , используя адгезионные молекулы, называемые интегринами . Затем эти отростки образуют петли, чтобы стать полноценным просветом сосуда , когда клетки мигрируют к месту ангиогенеза. Прорастание происходит со скоростью несколько миллиметров в день и позволяет новым сосудам прорастать через щели в сосудистой системе . Это заметно отличается от расщепления ангиогенеза, поскольку он формирует совершенно новые сосуды, а не разделяет существующие сосуды.
Инвагинальный ангиогенез , также известный как расщепляющий ангиогенез , представляет собой образование нового кровеносного сосуда путем разделения существующего кровеносного сосуда на два.
Инвагинация впервые была обнаружена у новорожденных крыс. При этом типе формирования сосудов стенка капилляра простирается в просвет, разделяя один сосуд на две части. Существует четыре фазы инвагинационного ангиогенеза. Во-первых, две противоположные стенки капилляров устанавливают зону контакта. Во-вторых, соединения эндотелиальных клеток реорганизуются, а бислой сосудов перфорируется, чтобы позволить факторам роста и клеткам проникать в просвет. В-третьих, между двумя новыми сосудами в зоне контакта формируется ядро, которое заполнено перицитами и миофибробластами . Эти клетки начинают откладывать коллагеновые волокна в ядро, чтобы обеспечить внеклеточный матрикс для роста просвета сосуда. Наконец, ядро уплотняется без изменений в базовой структуре. Инвагинация важна, потому что это реорганизация существующих клеток. Она позволяет значительно увеличить количество капилляров без соответствующего увеличения количества эндотелиальных клеток . Это особенно важно в эмбриональном развитии, поскольку ресурсов для создания богатой микрососудистой сети с новыми клетками каждый раз, когда развивается новый сосуд, недостаточно . [13]
Коалесцентный ангиогенез — это режим ангиогенеза, который считается противоположностью инвагинальному ангиогенезу, при котором капилляры сливаются или объединяются, образуя более крупный кровеносный сосуд, тем самым увеличивая приток крови и циркуляцию. [14] Коалесцентный ангиогенез вышел за рамки эмбриологии. Предполагается, что он играет роль в формировании новых сосудов, например, в опухоли. [15]
Механическая стимуляция ангиогенеза недостаточно изучена. Существует много споров относительно воздействия напряжения сдвига на капилляры, вызывающего ангиогенез, хотя современные знания предполагают, что усиление мышечных сокращений может усилить ангиогенез. [16] Это может быть связано с увеличением выработки оксида азота во время физических упражнений. Оксид азота приводит к вазодилатации кровеносных сосудов.
Химическая стимуляция ангиогенеза осуществляется различными ангиогенными белками, например, интегринами и простагландинами, включая несколько факторов роста, например, VEGF, FGF.
Семейство факторов роста фибробластов (FGF) с его прототипическими членами FGF-1 (кислый FGF) и FGF-2 (основной FGF) на сегодняшний день состоит по меньшей мере из 22 известных членов. [21] Большинство из них являются одноцепочечными пептидами 16-18 кДа и демонстрируют высокое сродство к гепарину и гепарансульфату. В целом, FGF стимулируют различные клеточные функции, связываясь с рецепторами FGF на клеточной поверхности в присутствии протеогликанов гепарина. Семейство рецепторов FGF состоит из семи членов, и все рецепторные белки являются одноцепочечными рецепторными тирозинкиназами, которые активируются посредством аутофосфорилирования, вызванного механизмом димеризации рецепторов, опосредованной FGF. Активация рецептора приводит к каскаду передачи сигнала, который приводит к активации генов и разнообразным биологическим реакциям, включая клеточную дифференциацию, пролиферацию и растворение матрикса, тем самым инициируя процесс митогенной активности, критически важный для роста эндотелиальных клеток, фибробластов и гладкомышечных клеток. FGF-1, уникальный среди всех 22 членов семейства FGF, может связываться со всеми семью подтипами рецепторов FGF, что делает его самым широко действующим членом семейства FGF и мощным митогеном для разнообразных типов клеток, необходимых для установки ангиогенного ответа в поврежденных (гипоксических) тканях, где происходит повышение регуляции рецепторов FGF. [22] FGF-1 стимулирует пролиферацию и дифференцировку всех типов клеток, необходимых для построения артериального сосуда, включая эндотелиальные клетки и гладкомышечные клетки; этот факт отличает FGF-1 от других проангиогенных факторов роста , таких как фактор роста эндотелия сосудов (VEGF), который в первую очередь стимулирует образование новых капилляров. [23] [24]
Помимо FGF-1, одной из важнейших функций фактора роста фибробластов-2 (FGF-2 или bFGF ) является стимулирование пролиферации эндотелиальных клеток и физической организации эндотелиальных клеток в трубчатые структуры, тем самым способствуя ангиогенезу. FGF-2 является более мощным ангиогенным фактором, чем VEGF или PDGF ( фактор роста тромбоцитов ); однако он менее эффективен, чем FGF-1. Помимо стимуляции роста кровеносных сосудов, aFGF (FGF-1) и bFGF (FGF-2) играют важную роль в заживлении ран. Они стимулируют пролиферацию фибробластов и эндотелиальных клеток, что приводит к ангиогенезу и развитию грануляционной ткани; оба увеличивают кровоснабжение и заполняют раневое пространство/полость на ранних этапах процесса заживления ран.
Фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) продемонстрировал свою роль в ангиогенезе, увеличивая количество капилляров в данной сети. Первоначальные исследования in vitro показали, что эндотелиальные клетки капилляров крупного рогатого скота будут пролиферировать и демонстрировать признаки трубчатых структур при стимуляции VEGF и bFGF , хотя результаты были более выраженными с VEGF. [25] Повышение регуляции VEGF является основным компонентом физиологической реакции на физическую нагрузку, и его роль в ангиогенезе, как предполагается, может быть возможным лечением сосудистых повреждений. [26] [27] [28] [29] Исследования in vitro ясно демонстрируют, что VEGF является мощным стимулятором ангиогенеза, поскольку в присутствии этого фактора роста покрытые пластиной эндотелиальные клетки будут пролиферировать и мигрировать, в конечном итоге образуя трубчатые структуры, напоминающие капилляры. [16] VEGF вызывает массивный каскад сигналов в эндотелиальных клетках. Связывание с рецептором VEGF-2 (VEGFR-2) запускает каскад сигналов тирозинкиназы, который стимулирует выработку факторов, которые по-разному стимулируют проницаемость сосудов (eNOS, продуцирующий NO), пролиферацию/выживание (bFGF), миграцию (ICAM/VCAM/MMP) и, наконец, дифференциацию в зрелые кровеносные сосуды. Механически VEGF повышается при мышечных сокращениях в результате увеличения притока крови к пораженным областям. Увеличение притока также вызывает значительное увеличение выработки мРНК рецепторов VEGF 1 и 2. Увеличение выработки рецепторов означает, что мышечные сокращения могут вызвать повышение регуляции каскада сигналов, связанных с ангиогенезом. Как часть каскада сигналов ангиогенного происхождения, NO широко считается основным фактором, способствующим ангиогенному ответу, поскольку ингибирование NO значительно снижает эффекты ангиогенных факторов роста. Однако ингибирование NO во время упражнений не подавляет ангиогенез, что указывает на то, что в ангиогенном ответе участвуют и другие факторы. [16]
Ангиопоэтины , Ang1 и Ang2, необходимы для формирования зрелых кровеносных сосудов, как показали исследования с нокаутом у мышей . [30] Ang1 и Ang2 являются белковыми факторами роста, которые действуют путем связывания своих рецепторов, Tie-1 и Tie-2 ; хотя это несколько спорно, похоже, что клеточные сигналы передаются в основном через Tie-2 ; хотя некоторые работы показывают физиологическую сигнализацию также через Tie-1 . Эти рецепторы являются тирозинкиназами . Таким образом, они могут инициировать клеточную сигнализацию , когда связывание лиганда вызывает димеризацию, которая инициирует фосфорилирование ключевых тирозинов.
Другим важным фактором ангиогенеза является матриксная металлопротеиназа (ММП). ММП помогают расщеплять белки, которые поддерживают стенки сосудов твердыми. Этот протеолиз позволяет эндотелиальным клеткам выходить в интерстициальный матрикс, как это видно при прорастании ангиогенеза. Ингибирование ММП предотвращает образование новых капилляров . [31] Эти ферменты строго регулируются в процессе формирования сосудов, поскольку разрушение внеклеточного матрикса приведет к снижению целостности микрососудов. [16]
Дельта-подобный лиганд 4 (Dll4) — это белок с отрицательным регуляторным эффектом на ангиогенез. [32] [33] Dll4 — это трансмембранный лиганд для семейства рецепторов notch . Было проведено много исследований, которые послужили для определения последствий дельта-подобного лиганда 4. В одном исследовании, в частности, оценивалось влияние Dll4 на васкуляризацию и рост опухоли. [34] Для того чтобы опухоль росла и развивалась, она должна иметь надлежащую сосудистую сеть. Путь VEGF жизненно важен для развития сосудистой сети, которая, в свою очередь, помогает опухолям расти. Комбинированная блокада VEGF и Dll4 приводит к ингибированию прогрессирования опухоли и ангиогенеза по всей опухоли. Это происходит из-за препятствия сигнализации в эндотелиальных клетках, что отсекает пролиферацию и прорастание этих эндотелиальных клеток. При таком ингибировании клетки не растут бесконтрольно, поэтому рак останавливается на этом этапе. Однако если бы блокаду удалось снять, клетки снова начали бы размножаться. [35]
Семафорины класса 3 (SEMA3) регулируют ангиогенез, модулируя адгезию эндотелиальных клеток , миграцию, пролиферацию, выживание и привлечение перицитов . [18] Кроме того, семафорины могут влиять на VEGF-опосредованный ангиогенез, поскольку и SEMA3, и VEGF-A конкурируют за связывание рецептора нейропилина в эндотелиальных клетках. [36] [37] Поэтому относительные уровни экспрессии SEMA3 и VEGF-A могут быть важны для ангиогенеза. [18]
Ингибитор ангиогенеза может быть эндогенным или поступать извне в виде лекарственного препарата или пищевого компонента .
Ангиогенез может быть целью для борьбы с такими заболеваниями, как болезни сердца , характеризующиеся либо плохой васкуляризацией, либо аномальной сосудистой сетью. [38] Применение определенных соединений, которые могут подавлять или вызывать создание новых кровеносных сосудов в организме, может помочь в борьбе с такими заболеваниями. Наличие кровеносных сосудов там, где их не должно быть, может повлиять на механические свойства ткани, увеличивая вероятность отказа. Отсутствие кровеносных сосудов в восстанавливающейся или иным образом метаболически активной ткани может подавлять восстановление или другие важные функции. Несколько заболеваний, таких как ишемические хронические раны , являются результатом отказа или недостаточного образования кровеносных сосудов и могут лечиться путем локального расширения кровеносных сосудов, таким образом принося новые питательные вещества к месту, облегчая восстановление. Другие заболевания, такие как возрастная дегенерация желтого пятна , могут быть вызваны локальным расширением кровеносных сосудов, мешая нормальным физиологическим процессам.
Современное клиническое применение принципа ангиогенеза можно разделить на две основные области: антиангиогенные терапии, с которых начинались ангиогенные исследования, и проангиогенные терапии. В то время как антиангиогенные терапии используются для борьбы с раком и злокачественными новообразованиями, [39] [40] которым требуется обилие кислорода и питательных веществ для пролиферации, проангиогенные терапии изучаются как варианты лечения сердечно-сосудистых заболеваний , основной причины смерти в западном мире . Одним из первых применений проангиогенных методов на людях было немецкое исследование с использованием фактора роста фибробластов 1 (FGF-1) для лечения ишемической болезни сердца. [23] [41] [42] [43]
Что касается механизма действия , проангиогенные методы можно разделить на три основные категории: генная терапия , нацеленная на интересующие гены для амплификации или ингибирования; заместительная протеиновая терапия , которая в первую очередь манипулирует ангиогенными факторами роста, такими как FGF-1 или фактор роста эндотелия сосудов , VEGF; и клеточная терапия, которая включает имплантацию определенных типов клеток.
Все еще существуют серьезные нерешенные проблемы, связанные с генной терапией. Трудности включают эффективную интеграцию терапевтических генов в геном целевых клеток, снижение риска нежелательного иммунного ответа, потенциальную токсичность, иммуногенность , воспалительные реакции и онкогенез , связанный с вирусными векторами, используемыми для имплантации генов, и огромную сложность генетической основы ангиогенеза. Наиболее часто встречающиеся у людей расстройства, такие как болезни сердца, высокое кровяное давление, диабет и болезнь Альцгеймера , скорее всего, вызваны комбинированным эффектом вариаций во многих генах, и, таким образом, инъекция одного гена может не принести значительной пользы при таких заболеваниях. [ необходима цитата ]
Напротив, проангиогенная белковая терапия использует четко определенные, точно структурированные белки с заранее определенными оптимальными дозами отдельного белка для болезненных состояний и с хорошо известными биологическими эффектами. [1] С другой стороны, препятствием для белковой терапии является способ доставки. Пероральные, внутривенные, внутриартериальные или внутримышечные пути введения белка не всегда столь эффективны, поскольку терапевтический белок может метаболизироваться или выводиться до того, как он сможет попасть в целевую ткань. Проангиогенная терапия на основе клеток все еще находится на ранних стадиях исследований, и многие вопросы относительно наилучших типов клеток и дозировок для использования остаются открытыми.
Раковые клетки — это клетки, которые утратили способность к контролируемому делению. Злокачественная опухоль состоит из популяции быстро делящихся и растущих раковых клеток, которые постепенно накапливают мутации . Однако опухолям необходимо специальное кровоснабжение для обеспечения кислородом и другими необходимыми питательными веществами, необходимыми для роста за пределы определенного размера (обычно 1–2 мм 3 ). [44] [45]
Опухоли вызывают рост кровеносных сосудов (ангиогенез) путем секреции различных факторов роста (например, VEGF ) и белков. Факторы роста, такие как bFGF и VEGF, могут вызывать рост капилляров в опухоли, которые, как подозревают некоторые исследователи, поставляют необходимые питательные вещества, что позволяет опухоли расширяться. В отличие от нормальных кровеносных сосудов, кровеносные сосуды опухоли расширены и имеют неправильную форму. [46] Другие клиницисты считают, что ангиогенез на самом деле служит путем отходов, забирая биологические конечные продукты, выделяемые быстро делящимися раковыми клетками. В любом случае ангиогенез является необходимым и требуемым шагом для перехода от небольшого безвредного скопления клеток, часто называемого размером с металлический шарик на конце шариковой ручки, к большой опухоли. Ангиогенез также необходим для распространения опухоли или метастазирования . [9] Отдельные раковые клетки могут оторваться от сформировавшейся солидной опухоли, проникнуть в кровеносный сосуд и быть перенесены в отдаленное место, где они могут имплантироваться и начать рост вторичной опухоли. Теперь данные свидетельствуют о том, что кровеносный сосуд в данной солидной опухоли может быть фактически мозаичным, состоящим из эндотелиальных клеток и опухолевых клеток. [9] Эта мозаичность допускает значительное выпадение опухолевых клеток в сосудистую систему, что, возможно, способствует появлению циркулирующих опухолевых клеток в периферической крови пациентов со злокачественными новообразованиями. [47] Последующий рост таких метастазов также потребует снабжения питательными веществами и кислородом , а также пути утилизации отходов.
Эндотелиальные клетки долгое время считались генетически более стабильными, чем раковые клетки. Эта геномная стабильность дает преимущество при воздействии на эндотелиальные клетки с помощью антиангиогенной терапии по сравнению с химиотерапией , направленной на раковые клетки, которые быстро мутируют и приобретают лекарственную устойчивость к лечению. По этой причине эндотелиальные клетки считаются идеальной мишенью для терапии, направленной против них. [48]
Механизм образования кровеносных сосудов путем ангиогенеза инициируется спонтанным делением опухолевых клеток из-за мутации. Затем опухолевые клетки высвобождают ангиогенные стимуляторы. Затем они перемещаются в уже сформировавшиеся близлежащие кровеносные сосуды и активируют их рецепторы эндотелиальных клеток. Это вызывает высвобождение протеолитических ферментов из сосудистой сети. Эти ферменты нацелены на определенную точку кровеносного сосуда и вызывают образование поры. Это точка, из которой будет расти новый кровеносный сосуд. Причина, по которой опухолевым клеткам необходимо кровоснабжение, заключается в том, что они не могут вырасти более чем на 2-3 миллиметра в диаметре без сформировавшегося кровоснабжения, что эквивалентно примерно 50-100 клеткам. [49] Некоторые исследования показали, что сосуды, образованные внутри опухолевой ткани, имеют более высокую нерегулярность и больший размер, что также связано с худшим прогнозом. [50] [51]
Ангиогенез представляет собой превосходную терапевтическую цель для лечения сердечно-сосудистых заболеваний. Это мощный физиологический процесс, который лежит в основе естественного способа, которым наши тела реагируют на уменьшение кровоснабжения жизненно важных органов, а именно неоангиогенеза : производства новых коллатеральных сосудов для преодоления ишемического инсульта. [23] Было проведено большое количество доклинических исследований с использованием белковой, генной и клеточной терапии на животных моделях сердечной ишемии, а также на моделях заболеваний периферических артерий. Воспроизводимые и достоверные успехи в этих ранних исследованиях на животных привели к большому энтузиазму относительно того, что этот новый терапевтический подход может быть быстро переведен в клиническую пользу для миллионов пациентов в западном мире с этими расстройствами. Однако десятилетие клинических испытаний как генной, так и белковой терапии, предназначенной для стимуляции ангиогенеза в недостаточно перфузируемых тканях и органах, привело от одного разочарования к другому. Хотя все эти доклинические данные, которые давали большие перспективы для переноса терапии ангиогенеза с животных на людей, были в той или иной форме включены в ранние стадии клинических испытаний, FDA до настоящего времени (2007 г.) настаивало на том, что первичной конечной точкой для одобрения ангиогенного агента должно быть улучшение физической работоспособности проходящих лечение пациентов. [52]
Эти неудачи предполагают, что либо это неправильные молекулярные цели для индукции неоваскуляризации, либо их можно эффективно использовать только при правильной формулировке и введении, либо их представление в контексте общей клеточной микросреды может играть жизненно важную роль в их полезности. Может быть необходимо представить эти белки таким образом, чтобы имитировать естественные сигнальные события, включая концентрацию , пространственные и временные профили , а также их одновременное или последовательное представление с другими соответствующими факторами. [53]
Ангиогенез обычно ассоциируется с аэробными упражнениями и упражнениями на выносливость . В то время как артериогенез производит изменения в сети, которые позволяют значительно увеличить объем общего потока в сети, ангиогенез вызывает изменения, которые позволяют увеличить доставку питательных веществ в течение длительного периода времени. Капилляры предназначены для обеспечения максимальной эффективности доставки питательных веществ, поэтому увеличение количества капилляров позволяет сети доставлять больше питательных веществ за то же время. Большее количество капилляров также обеспечивает больший обмен кислорода в сети. Это жизненно важно для тренировки выносливости, поскольку позволяет человеку продолжать тренироваться в течение длительного периода времени. Однако никакие экспериментальные данные не свидетельствуют о том, что увеличение капиллярности требуется при тренировках на выносливость для увеличения максимальной доставки кислорода. [16]
Повышенная экспрессия VEGF вызывает повышенную проницаемость кровеносных сосудов в дополнение к стимуляции ангиогенеза. При влажной макулярной дегенерации VEGF вызывает пролиферацию капилляров в сетчатке. Поскольку увеличение ангиогенеза также вызывает отек , кровь и другие ретинальные жидкости просачиваются в сетчатку , вызывая потерю зрения. Антиангиогенные препараты, нацеленные на пути VEGF, в настоящее время успешно используются для лечения этого типа макулярной дегенерации
Ангиогенез сосудов из тела хозяина в имплантированную конструкцию тканевой инженерии имеет важное значение. Успешная интеграция часто зависит от тщательной васкуляризации конструкции, поскольку она обеспечивает кислород и питательные вещества и предотвращает некроз в центральных областях имплантата. [54] Было показано, что PDGF стабилизирует васкуляризацию в коллаген- гликозаминогликановых каркасах. [55]
Первое сообщение об ангиогенезе можно проследить до книги «Трактат о крови, воспалении и огнестрельных ранениях», опубликованной в 1794 году, где были собраны результаты исследований шотландского анатома Джона Хантера . В своем исследовании Хантер наблюдал процесс роста новых кровеносных сосудов у кроликов. Однако он не придумал термин «ангиогенез», который сейчас широко используется учеными. Хантер также ошибочно приписал процесс роста новых кровеносных сосудов эффекту врожденного жизненного принципа в крови. Считается, что термин «ангиогенез» появился только в 1900-х годах. Начало современных исследований ангиогенеза отмечено докладом Джуды Фолкмана о ключевой роли ангиогенеза в росте опухолей. [10] [56] [57]
Количественная оценка параметров сосудистой сети, таких как плотность микрососудов, имеет различные осложнения из-за предпочтительного окрашивания или ограниченного представления тканей гистологическими срезами. Недавние исследования показали полную трехмерную реконструкцию сосудистой структуры опухоли и количественную оценку структур сосудов в целых опухолях в моделях животных. [58]
{{cite journal}}
: CS1 maint: неподходящий URL ( ссылка ){{cite book}}
: CS1 maint: DOI неактивен по состоянию на сентябрь 2024 г. ( ссылка )