Прямые флуоресцентные антитела ( DFA или dFA ), также известные как « прямая иммунофлуоресценция », [1] представляют собой антитела, помеченные в прямом флуоресцентном тесте антител . Его название происходит от того факта, что он напрямую проверяет наличие антигена с помеченным антителом , в отличие от вестерн-блоттинга , который использует непрямой метод обнаружения, где первичное антитело связывает целевой антиген, со вторичным антителом, направленным против первичного, и меткой, прикрепленной к вторичному антителу.
Доступны коммерческие наборы для тестирования DFA, которые содержат флуоресцентно меченые антитела , разработанные для специфического воздействия на уникальные антигены, присутствующие в бактериях или вирусах, но не присутствующие в млекопитающих ( эукариотах ). Этот метод можно использовать для быстрого определения наличия у субъекта определенной вирусной или бактериальной инфекции.
В случае респираторных вирусов, многие из которых имеют схожие общие симптомы, обнаружение может быть проведено с использованием образцов носового смыва от субъекта с подозрением на инфекцию. Хотя можно получить клетки, выделяющиеся в дыхательных путях, они часто находятся в небольших количествах, и поэтому можно использовать альтернативный метод, при котором совместимая клеточная культура может быть подвергнута воздействию инфицированных образцов носового смыва, так что если вирус присутствует, его можно вырастить до большего количества, что затем может дать более четкие положительные или отрицательные показания.
Как и во всех типах флуоресцентной микроскопии , необходимо определить правильную длину волны поглощения , чтобы возбудить флуорофорную метку, прикрепленную к антителу, и обнаружить испускаемую флуоресценцию, которая указывает на то, какие клетки положительны на присутствие обнаруживаемого вируса или бактерии.
Прямая иммунофлуоресценция может использоваться для обнаружения отложений иммуноглобулинов и комплементарных белков в биоптатах кожи, почек и других органов. Их присутствие указывает на аутоиммунное заболевание . При тестировании кожи, не подвергавшейся воздействию солнца, положительный прямой IF (так называемый тест Lupus band ) является доказательством системной красной волчанки . [2] Прямые флуоресцентные антитела также могут использоваться для обнаружения паразитарных инфекций, как это было впервые предложено Садуном и др. (1960).
