Leptospira interrogans — это вид облигатных аэробных бактерий- спирохет , имеющих форму штопора с крючковатыми и спиральными концами. [1] L. interrogans в основном встречается в более теплых тропических регионах. Бактерии могут жить в течение недель или месяцев в земле или воде. [2] Leptospira — один из родов типа спирохет , вызывающий серьезные инфекции у млекопитающих. [3] Этот вид патогенен для некоторых диких и домашних животных, включая домашних собак. Он также может передаваться людям через ссадины на коже, где инфекция может вызывать гриппоподобные симптомы с поражением почек и печени. [2] Инфекции у людей обычно распространяются при контакте с загрязненной водой или почвой, часто через мочу как диких, так и домашних животных. [2] Некоторые люди более восприимчивы к серьезным инфекциям, включая фермеров и ветеринаров, работающих с животными. [4]
Бактерии вызывают две фазы инфекции: безжелтушную и желтушную. Безжелтушная фаза инфекции обычно известна как первая фаза, в которой у людей наблюдается лихорадка, головная боль и тошнота. Желтушная фаза, или вторая фаза, включает более серьезные симптомы, включая кровотечения и почечную канальцевую недостаточность. [5] Основные способы тестирования на бактерии и диагностики инфекций включают микроскопическую реакцию агглютинации (МАТ) и ПЦР. [6] Лептоспироз у людей лечится антибиотиками пенициллином и доксициклином . [7] [8]
L. interrogans обладает многими свойствами, обеспечивающими его оптимальное выживание в определенных условиях, включая два периплазматических жгутика для движения и мобильности. Эти жгутики позволяют L. interrogans легче получать доступ и инфицировать как человеческие, так и млекопитающие ткани. [9] Вид использует бета-окисление длинноцепочечных жирных кислот для получения энергии, при котором кислород и перекиси используются в качестве основных конечных акцепторов электронов. [10] Геном L. interrogans состоит из двух кольцевых хромосом. [11]
Клетки L. interrogans — грамотрицательные , плотно скрученные, подвижные спирохеты с двумя периплазматическими жгутиками . [1] Один жгутик вставлен в каждый конец бактерии. Клетки тонкие, около 0,15 мкм, и длинные, от 6 до 20 мкм, с телом в форме штопора со спиральными или крючкообразными концами. [1] Крючковатые концы часто напоминают вопросительный знак, отсюда и название «interrogans». [12] Периплазматические жгутики имеют решающее значение для способности бактерий двигаться и выживать в определенных клетках-хозяевах. Лептоспиры демонстрируют две уникальные формы движения: трансляционную и нетрансляционную. [13]
L. interrogans проявляет нейтралофильные свойства, расту в диапазоне pH 7,2 - 7,6, с оптимальным pH 7,4. Бактерии также проявляют мезофильные свойства роста и растут в диапазоне температур от 28 °C до 30 °C. [14] [12] Оптимальный рост облигатного аэроба L. interrogans происходит в простых средах, содержащих витамины, соли и специфические длинноцепочечные жирные кислоты. [13] Лептоспирам требуются соли аммония, а также длинноцепочечные жирные кислоты для метаболизма. [15]
Основным источником энергии и углерода этого организма является бета-окисление длинноцепочечных жирных кислот . Через естественные фазовые интерфейсы или среду роста L. interrogans должен физически получать длинноцепочечные жирные кислоты, чтобы далее метаболизировать их в качестве источника энергии. [16] Уникальные метаболические характеристики L. interrogans , длинноцепочечные ненасыщенные жирные кислоты необходимы для роста бактерии, поскольку насыщенные жирные кислоты могут метаболизироваться только в этих условиях. [16] L. interrogans содержит гены, которые кодируют использование цикла трикарбоновых кислот в его метаболизме. [16] Продукция АТФ L. interrogans происходит посредством окислительного фосфорилирования. [16] Кислород служит конечным акцептором электронов в этом бета-окислении, что еще больше классифицирует эту бактерию как облигатного аэроба. [15] [17] Данные также показали, что пероксиды, такие как H 2 O 2, также могут служить конечным акцептором электронов, с активностью каталазы, необходимой для выживания in vivo. [16] У L. interrogans есть только одна система поглощения глюкозы, известная как глюкозо-натриевый симпортер . [18]
Геном L. interrogans состоит из двух кольцевых хромосом, состоящих в общей сложности из почти 4,7 Мбн. [ 19] Большая хромосома имеет общий геном 4,3 Мбн, а меньшая хромосома имеет размер 350 Кбн. Она имеет содержание G+C 35% и содержит 3400-3700 генов, кодирующих белок, в зависимости от штамма. [11] Гены на большой хромосоме кодируют в основном функции домашнего хозяйства. В отличие от большинства других бактерий, где гены рРНК сгруппированы, у Leptospira гены 16S, 23S и 5S рРНК разбросаны по большой хромосоме. [11] Гены, специально кодирующие использование длинноцепочечных жирных кислот, цикл трикарбоновых кислот и цепь переноса электронов , также были идентифицированы у L. interrogans. Обнаружение таких генов подтверждает использование окислительного фосфорилирования в качестве основного метаболического пути L. interrogans. Было обнаружено большое количество генов, связанных с инвазией эукариотических клеток, прикреплением клеток и подвижностью. L. interrogans также имеет сложный набор генов, связанных с хемотаксисом, в большей степени, чем другие патогенные бактерии, такие как B. burgdorferi и T. palladium. Такие гены позволяют L. interrogans быть таким успешным патогеном. [19]
Чтобы получить энергию, необходимую для роста и взять на себя функции хозяина, бактерия использует такие методы, как окислительный стресс. [20] Реакции на стресс, наблюдаемые у L. interrogans, включают в себя повышение экспрессии генов, кодирующих белки, такие как белки-шапероны, включая clpA, белки теплового шока, включая GroEL, и эндофлагеллярные белки, включая flgA. [21]
Ген loa22 был классифицирован как фактор вирулентности . [22]
LipL32 является наиболее распространенным белком в L. interrogans . Хотя LipL32 связывается с рядом компонентов внеклеточного матрикса в экспериментах в пробирках, есть сомнения относительно того, где находится этот белок. Одно исследование предполагает, что это подповерхностный мембранный липопротеин на внутреннем листке внешней мембраны. [23] [24] Некоторые внешние мембранные белки, такие как OmpL1, помогают в процессе инфицирования L. interrogans , обеспечивая прилипание к поверхностным молекулам клеток-хозяев. [25]
Поскольку L. interrogans является облигатным аэробом, необходимо избегать активных форм кислорода (ROS) во время метаболизма. Гены perRA и perRB кодируют регуляторы, реагирующие на пероксид, и эти регуляторы способствуют адаптации хозяина, поскольку содержат около 17 генов, которые помогают в передаче сигналов. [26] L. interrogans также имеет довольно сложную систему хемотаксиса по сравнению с другими патогенными микробами, что способствует его эффективности в качестве патогена. Вирулентность также связана с лептоспиральным ЛПС , который, как известно, уникальным образом активирует макрофаги в ответ на инфекцию. [19]
Бактериальный шаперон ClpB является основным фактором общей вирулентности L. interrogans, поскольку он способствует выживанию внутри хозяина, контролю реакций на стресс и уникальной роли дезагрегации белков. [20]
L. interrogans являются бактериями, связанными с хозяином, и большинство случаев заражения происходит в тропических регионах. В среде хозяина L. interrogans сначала обнаруживаются в крови, а затем переходят в другие органы , заражая их . В частности, клетки L. interrogans выживают и размножаются с оптимальной скоростью в почках . Возбудитель в основном распространяется через биологические жидкости инфицированных животных. [17] Крысы являются основными переносчиками лептоспироза, но не проявляют никаких симптомов, передавая возбудителя через мочу, которая способна сохраняться в пресной воде. [27] Затем возбудитель может проникнуть в организм нового хозяина через кожу и слизистые оболочки , а также через употребление зараженной воды. [17] Лептоспиры часто попадают в организм через открытые порезы и другие раны, хотя они не могут пройти через неповрежденный кожный барьер. [27] Зараженные дикие и домашние животные могут продолжать выделять бактерии в окружающую среду в течение нескольких лет, а бактерии могут выживать в почве и воде в течение нескольких месяцев. [28]
У людей симптомы, вызванные L. interrogans, бывают двухфазными, желтушными или безжелтушными . Желтушная форма также известна как болезнь Вейля . [29] Исследования показали, что L. interrogans может повреждать эндотелиальную клеточную оболочку различных сосудов и органов, позволяя им просачиваться и далее распространять бактерии в другие части тела. [30] Симптомы могут появиться в любое время между 2 и 4 неделями после заражения. Фаза 1 инфекции является безжелтушной, и симптомы включают лихорадку, озноб, головную боль, мышечные боли, рвоту и диарею. Примерно 90% случаев заражения у людей будут состоять только из этой фазы; однако болезнь может перейти в фазу 2, известную как желтушная фаза. Симптомы желтушной фазы включают петехии , гепатомегалию , желтуху , повреждение почечных канальцев , кровоизлияния и последующую почечную недостаточность. [29] Лептоспироз лечится антибиотиками доксициклином и пенициллином . [28]
Существует более 200 различных патогенных сероваров Leptospira , что затрудняет разработку эффективной вакцины . [31] Однако были разработаны вакцины для сероваров, известных как Hardjo, Pomona, Canicola, Grippotyphosa и icterohaemorrhagiae. К сожалению, эти вакцины демонстрируют неоптимальную защиту, требуют частых ревакцинаций и специфичны для определенных сероваров. [31]
Лептоспироз у собак можно разделить на четыре категории: репродуктивный, желтушный, геморрагический и уремический. Репродуктивный лептоспироз приводит к преждевременному рождению потомства или аборту, а уремический лептоспироз называют болезнью Штутгарта. [32] L. interrogans вызывает сильную воспалительную реакцию у инфицированных собак. Эта воспалительная реакция приводит к высокой экспрессии фактора некроза опухоли альфа , называемого ФНО-α, в тканях матки инфицированных собак. Интерлейкин-1β и интерлейкин-6 также демонстрируют повышенные уровни экспрессии при инфицировании. Кроме того, доказано, что L. interrogans приводит к снижению регуляции мРНК и белков внеклеточного матрикса (ECM). Эти факторы, вероятно, коррелируют с высокой восприимчивостью собак к лептоспирозу. [32]