Paracoccidioides brasiliensis — диморфный гриб и один из двух видов, вызывающих паракокцидиоидомикоз (другой — Paracoccidioides lutzii ). [1] [2] [3] [4] Грибок относят к семейству Ajellomycetaceae (отдел Ascomycota ), хотя половое состояние или телеоморфа у него пока не обнаружено. [5]
Paracoccidioides brasiliensis был впервые обнаружен Адольфо Лутцем в 1908 году в Бразилии. [6] Хотя Лутц не предложил названия для заболевания, вызываемого этим грибком, он отметил структуры, которые он назвал «pseudococcidica» вместе с мицелием в культурах, выращенных при 25 °C. [6] В 1912 году Альфонс Сплендоре [7] предложил название Zymonema brasiliense и описал особенности грибка в культуре. [6] Наконец, в 1930 году Флориано де Алмейда создал род Paracoccidioides , чтобы включить этот вид, отметив его отличие от Coccidioides immitis . [6]
Paracoccidioides brasiliensis — нефотосинтетический эукариот с жесткой клеточной стенкой и органеллами, очень похожими на органеллы высших эукариот. [3] [8] Будучи диморфным грибом , он обладает способностью выращивать овальную дрожжеподобную форму при 37 °C и удлиненную мицелиальную форму, образующуюся при комнатной температуре. [9] Мицелиальная и дрожжевая фазы различаются по своей морфологии, биохимии и ультраструктуре. [8] Дрожжевая форма содержит большое количество α-(1,3)-связанного глюкана. [10] [ нужна страница ] [11] Содержание хитина в мицелиальной форме больше, чем в дрожжевой форме, но содержание липидов в обеих фазах сопоставимо. [10] [ нужна страница ]
Дрожжи размножаются бесполым почкованием , при котором дочерние клетки рождаются асинхронно в нескольких случайных положениях на поверхности клетки. Почки начинаются со слоев клеточной стенки, увеличивающихся в оптической плотности в точке, которая в конечном итоге дает начало дочерней клетке. [3] После того, как почка расширяется, между зарождающейся клеткой и материнской клеткой образуется плоскость расщепления. После расхождения рубец почки исчезает. [8] В ткани почкование происходит внутри гранулематозного центра поражения, что визуализируется при окрашивании гистологических срезов гематоксилином и эозином (H&E). [10] Непочкующиеся клетки имеют диаметр 5–15 мкм, тогда как клетки с несколькими сферическими почками имеют диаметр от 10 до 20 мкм. [10] При электронной микроскопии было обнаружено, что клетки с несколькими почками имеют периферически расположенные ядра и цитоплазму, окружающую большую центральную вакуоль. [12] В тканевой форме P. brasiliensis дрожжевые клетки крупнее, с более тонкими стенками и более узким основанием почки, чем у родственного диморфного гриба Blastomyces dermatitidis . [10] [ нужна страница ] Дрожжеподобная форма P. brasiliensis содержит несколько ядер, пористую двухслойную ядерную мембрану и толстую клеточную стенку, богатую волокнами, тогда как мицелиальная фаза имеет более тонкие клеточные стенки с тонким, электронно-плотным внешним слоем. [8]
Мицелиальная форма P. brasiliensis может быть преобразована в дрожжевую форму in vitro путем выращивания на агаре с сердечно-мозговым экстрактом или кровяно-глюкозно-цистеиновом агаре при инкубации в течение 10–20 дней при температуре 37 °C. [10] В этих условиях гифальные клетки либо погибают, либо преобразуются в переходные формы диаметром 6–30 мкм, которые в конечном итоге отделяются или остаются на гифальных клетках, давая почки. [10] Новые почки развивают мезосомы и становятся многоядерными. [10] Напротив, дрожжеподобные культуры могут быть преобразованы в мицелиальную форму путем снижения температуры инкубации с 37 до 25 °C. [13] Первоначально считалось, что потребности в питании как дрожжевой, так и мицелиальной фаз P. brasiliensis идентичны; [14] Однако более поздние исследования показали, что эта форма дрожжей является ауксотрофной , требующей для роста экзогенных серосодержащих аминокислот, включая цистеин и метионин. [15]
Хотя среда обитания P. brasiliensis остается неизвестной, она обычно связана с почвами, на которых выращивают кофе. [5] [16] [17] Она также связана с девятипоясным броненосцем Dasypus novemcinctus . [18] Заболевание, вызываемое P. brasiliensis, в основном географически ограничено странами Латинской Америки, такими как Бразилия , Колумбия и Венесуэла , при этом наибольшее количество случаев заболевания зафиксировано в Бразилии. [10] Эндемичные районы характеризуются жарким влажным летом, сухой умеренной зимой, среднегодовыми температурами от 17 до 23 °C и годовым количеством осадков от 500 до 800 мм. [19] Однако точные экологические закономерности грибка остаются неясными, и P. brasiliensis редко встречается в природе за пределами человека. [3] Один из таких редких примеров изоляции от окружающей среды был описан в 1971 году Марией Б. де Альборнос и ее коллегами, которые выделили P. brasiliensis из образцов сельской почвы, собранных в Паракотосе в штате Миранда , Венесуэла. [20] В исследованиях in vitro было показано, что грибок растет при инокуляции в почву и стерильные лошадиные или коровьи экскременты. [21] Также было показано, что мицелиальная фаза выживает дольше, чем дрожжевая фаза в кислой почве. [22] Несмотря на то, что половое состояние не было задокументировано, молекулярные исследования предполагают существование рекомбинирующих популяций P. brasiliensis , возможно, посредством необнаруженного полового состояния. [23]
Существование полового цикла у P. brasiliensis подтверждается как молекулярными, так и морфологическими данными. [24] Сравнительный анализ генома с другими хорошо изученными грибами продемонстрировал наличие генов, связанных с полом, как в дрожжевой , так и в мицелиальной фазах P. brasiliensis . [24] Также скрещивание изолятов разных типов спаривания приводило к образованию молодых аскокарпий (половых структур) с суженными спиральными гифами , связанными с начальной стадией спаривания. [24]
Paracoccidioides brasiliensis вызывает заболевание, известное как паракокцидиоидомикоз, характеризующееся медленными прогрессирующими гранулематозными изменениями в слизистой оболочке головы, особенно носа и придаточных пазух носа или кожи. Реже заболевание поражает лимфатическую систему, центральную нервную систему, желудочно-кишечный тракт или скелетную систему. [10] Из-за высокой доли случаев, поражающих слизистую оболочку полости рта, эти ткани изначально считались основным путем проникновения грибка. [3] Однако теперь имеются веские доказательства того, что дыхательные пути являются главной точкой проникновения [10] , а поражения легких P. brasiliensis возникают почти в трети прогрессирующих случаев. [25] Заболевание не заразно. [10] Паракокцидиоидомикоз чаще встречается у взрослых мужчин, чем у женщин. [10] [26] Считается, что гормон эстроген ингибирует трансформацию мицелиальной формы в дрожжевую, что подтверждается экспериментальными данными in vitro , и этот фактор может объяснять относительную устойчивость женщин к инфекции. [27]
Для диагностики паракокцидиоидомикоза использовался ряд серологических тестов . [10] Двойная диффузия в агаровом геле и реакция связывания комплемента являются одними из наиболее часто используемых тестов в серодиагностике. [10] Культуральные экстракты дрожжей или мицелия используются для получения эффективных, быстрых и воспроизводимых антигенов. [10] [28] Исследование показало обнаружение антигена 43 кДа в объединенной сыворотке пораженных лиц, что может послужить основой для разработки диагностического теста. [29] Тесты, нацеленные на наличие сывороточных антител к P. brasiliensis, одновременно обнаруживают как активные, так и исторические инфекции и не могут различить активную инфекцию. Оценка популяций в эндемичных зонах показала примерно равные показатели сероконверсии между мужчинами и женщинами, что предполагает равные показатели воздействия, несмотря на сильное преобладание мужчин, показанное клиническим заболеванием. [10]
Paracoccidioides brasiliensis вызывает изъязвление слизистой оболочки рта и носа с распространением через лимфатическую систему . Предполагаемый путь проникновения грибка в организм — через пародонтальную оболочку . [30] [31] Предполагается, что путь заражения — ингаляционный, после чего инфекционный пропагул дает начало характерным многополярным почкующимся формам дрожжей в легких, напоминающим « штурвал корабля », видимым в гистологических срезах. [9] [32] Риску заражения подвержены как иммунологически нормальные, так и ослабленные люди. [9] Легкие, лимфатические узлы и слизистая оболочка рта являются наиболее часто инфицируемыми тканями. [10] Патологические признаки паракокцидиоидомикоза аналогичны признакам, наблюдаемым при кокцидиоидомикозе и бластомикозе . [33] Однако в первом случае поражения сначала появляются в лимфоидной ткани, а затем распространяются на слизистые оболочки, [33] вызывая локализованный или диффузный некроз тканей лимфатических узлов. [33] Типично обширное поражение лимфоидной ткани и ограниченное распространение на желудочно-кишечный тракт, кости и простату отличают клиническую картину паракокцидиоидомикоза от клинической картины бластомикоза. [10] [33]