окраска по Папаниколау

Метод гистологического окрашивания

Окраска по Папаниколау, показывающая низкосортное плоскоклеточное интраэпителиальное поражение (LSIL) по результатам мазка Папаниколау . Ядра клеток окрашены в синий цвет.

Окраска по Папаниколау (также окраска Папаниколау и окраска по Папаниколау ) — это метод многоцветного цитологического окрашивания , разработанный Джорджем Папаниколау в 1942 году. ^{[1] [2] [3]} Окраска по Папаниколау — одна из наиболее широко используемых в цитологии , ^[1] где она используется для помощи патологам в постановке диагноза. Хотя она наиболее известна своим использованием при обнаружении рака шейки матки в тесте Папаниколау или мазке Папаниколау, она также используется для окрашивания негинекологических образцов из различных телесных выделений и из биопсий органов и тканей с помощью небольшой иглы . ^{[4] [5]} Папаниколау опубликовал три формулы этой окраски в 1942, 1954 и 1960 годах. ^[2]

Использование

Окрашивание по Папаниколау используется для дифференциации клеток в мазках (при которых образцы распределяются или размазываются на предметном стекле микроскопа) ^[6] из различных телесных выделений и игольчатых биопсий ; образцы могут включать гинекологические мазки ( мазки по Папаниколау ), мокроту , соскобы, смывы, мочу , спинномозговую жидкость , ^[4] брюшную жидкость, плевральную жидкость , синовиальную жидкость , семенную жидкость , ^[7] тонкоигольные аспираты , образцы соприкосновения с опухолями или другие материалы, содержащие свободные клетки. ^{[8] [4] [9]}

Окрашивание мазка по Папаниколау не полностью стандартизировано и выпускается в нескольких формулах, отличающихся точными используемыми красителями, их соотношениями и временем проведения процесса. ^{[2] [1]} Окрашивание мазка по Папаниколау обычно связано с цитопатологией , при которой исследуются свободные клетки, но окрашивание также было модифицировано и использовалось на срезах тканей. ^[9]

мазок из шейки матки

Окрашивание по Папаниколау используется в мазке по Папаниколау (или тесте Папаниколау) и является надежным методом скрининга рака шейки матки в гинекологии . ^[10]

Обобщенный метод окрашивания

Классическая форма окраски по Папаниколау включает пять окрасок в трех растворах. ^{[2] [11] [12]}

• Первый красящий раствор содержит гематоксилин , который окрашивает ядра клеток . ^{[10] [2] [12]} Папаниколау использовал гематоксилин Харриса во всех трех формулах красителя, которые он опубликовал. ^[2]
• Второй окрашивающий раствор (обозначенный OG-6) содержит оранжевый G в 95% этиловом спирте с небольшим количеством фосфорновольфрамовой кислоты . ^{[12] [2]} В OG-6 OG обозначает оранжевый G, а «6» обозначает концентрацию добавленной фосфорновольфрамовой кислоты ; другие варианты — OG-5 и OG-8. ^[2]
• Третий окрашивающий раствор состоит из трех красителей: эозина Y , светло-зеленого SF желтоватого и бисмаркового коричневого Y в 95% этиловом спирте с небольшим количеством фосфорновольфрамовой кислоты и карбоната лития . ^{[12] [2]} Этот раствор обозначается как EA, за которым следует число, которое обозначает пропорцию красителей, другие составы включают EA-36, EA-50 и EA-65. ^[2]

Контркрасители растворяются в 95% этиловом спирте, что предотвращает чрезмерное окрашивание клеток, которое может скрыть детали ядра и контуры клеток, особенно в случае, когда клетки накладываются друг на друга на предметном стекле. ^{[3] [2]} Фосфорновольфрамовая кислота добавляется для регулировки pH контркрасителей и помогает оптимизировать интенсивность цвета. ^[2] Контркраситель EA содержит бисмарковый коричневый и фосфорновольфрамовую кислоту, которые при сочетании вызывают выпадение обоих в осадок из раствора, сокращая срок службы смеси. ^[2]

Результаты

Окрашивание должно привести к образованию клеток, которые достаточно прозрачны, чтобы можно было интерпретировать даже более толстые образцы с перекрывающимися клетками. ^[2] Ядра клеток должны быть четкими, от синего до черного цвета ^{[12] [13]} , а хроматиновые узоры ядра должны быть хорошо различимы. Цитоплазма клеток окрашивается в сине-зеленый цвет, а кератин — в оранжевый. ^{[13] [5]}

Эозин Y окрашивает поверхностные эпителиальные плоские клетки , ядрышки , реснички и эритроциты . ^[2] Светло-зеленый SF желтоватый придает синее окрашивание цитоплазме активных клеток, таких как столбчатые клетки, парабазальные плоские клетки и промежуточные плоские клетки. ^[14] Поверхностные клетки имеют оранжевый или розовый цвет, а промежуточные и парабазальные клетки имеют бирюзово-зеленый или синий цвет. ^[12]

Сверхбыстрое окрашивание по Папаниколау

Сверхбыстрый краситель Папаниколау является альтернативой для образцов тонкой игольной аспирации, разработанной для достижения сопоставимой визуальной четкости за значительно более короткое время. Процесс отличается регидратацией высушенного на воздухе мазка с физиологическим раствором , использованием 4% формальдегида в 65% этаноловом фиксаторе и использованием гематоксилина Ричарда-Аллана -2 и цито-красителя , что приводит к 90-секундному процессу, дающему прозрачные полихромные пятна. ^[15]

Примеры окраски по Папаниколау

• 
  Злокачественная меланома , тонкоигольная аспирационная биопсия печени , прямой мазок.
• 
  Плоскоклеточный рак , промывание бронхов.
• 
  Папиллярный рак щитовидной железы , тонкоигольная аспирационная биопсия.
• 
  Доброкачественный образец цитологии мочи.
• 
  Плоскоклеточный рак шейки матки .

Статьи Джорджа Н. Папаниколау, описывающие его пятно

• Папаниколау, Джордж Н. «Новая процедура окрашивания вагинальных мазков». Science 95.2469 (1942): 438–439.

• Папаниколау, Джордж Н. «Метод мазка клеток для диагностики рака». Американский журнал общественного здравоохранения и здоровья нации 38.2 (1948): 202–205.

• Папаниколау, Джордж Н. «Атлас эксфолиативной цитологии». Опубликовано для фонда содружества издательством Гарвардского университета. (1954).

• Папаниколау, Джордж Н. «Меморандум об окрашивании». Атлас эксфолиативной цитологии. Кембридж, Массачусетс: Издательство Гарвардского университета, Приложение II (1960): 12.

Смотрите также

• Diff-Quik — метод окрашивания по Романовскому, широко используемый в цитологии ^[16]

Ссылки

1. Schulte EK (1991). «Стандартизация биологических красителей и пятен: подводные камни и возможности». Гистохимия . 95 (4): 319–328. doi :10.1007/BF00266958. PMID  1708749. S2CID  29628388.
2. Gill, Gary W. (2013). "Окрашивание по Папаниколау". Цитопрепарация . Основы цитопатологии. Том 12. С. 143–189. doi :10.1007/978-1-4614-4933-1_10. ISBN 978-1-4614-4932-4. ISSN  1574-9053.
3. Chantziantoniou N, Donnelly AD, Mukherjee M, Boon ME, Austin RM (2017). «Возникновение и развитие метода окраски Папаниколау». Acta Cytol . 61 (4–5): 266–280. doi : 10.1159/000457827 . PMID  28384641.{{cite journal}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
4. Кумар, Винай; Аббас, Абул К.; Астер, Джон К. (2013). Базовая патология Роббинса (9-е изд.). Elsevier/Saunders. стр. 910. ISBN 978-1-4377-1781-5.
5. Друри, RAB; Уоллингтон, EA (1980). Гистологическая техника Карлтона (5-е изд.). Oxford University Press. стр. 520 стр. ISBN 0-19-261310-3.
6. Медицинский словарь Стедмана (27-е изд.). Lippincott Williams & Wilkins. 2006. ISBN 978-0683400076.
7. Ларс Бьёрндаль; Дэвид Мортимер; Кристофер Л.Р. Барратт (1 апреля 2010 г.). Практическое руководство по базовой лабораторной андрологии. Cambridge University Press. ISBN 978-1-139-48249-3.
8. Хода RS (2007). «Негинекологическая цитология на жидких препаратах: морфологический обзор фактов и артефактов». Диагностическая цитопатология . 35 (10): 621–34. doi :10.1002/dc.20698. PMID  17854077. S2CID  38797168.
9. Preethi, S.; Sivapathasundharam, B. (2014). «Будет ли модифицированное окрашивание по Папаниколау новым окрашиванием для кератина?». Журнал гистотехнологии . 38 (1): 9–13. doi :10.1179/2046023614Y.0000000053. ISSN  0147-8885. S2CID  84486076.
10. Росс, Майкл Х.; Павлина, Войцех (2016). Гистология: текст и атлас: с коррелированной клеточной и молекулярной биологией (7-е изд.). Wolters Kluwer. стр. 984 стр. ISBN 978-1451187427.
11. Карсон, Фрейда Л.; Хладик, Криста (2009). Гистотехнология: Самостоятельный текст (3-е изд.). Гонконг: Издательство Американского общества клинической патологии . С. 361–3363. ISBN 978-0-89189-581-7.
12. Банкрофт, Джон; Стивенс, Алан, ред. (1982). Теория и практика гистологических методов (2-е изд.). Longman Group Limited.
13. Dey, Pranab (2018). «Рутинное окрашивание в цитологической лаборатории». Базовые и продвинутые лабораторные методы в гистопатологии и цитологии . стр. 133–138. doi :10.1007/978-981-10-8252-8_14. ISBN 978-981-10-8251-1.
14. Фейт Мокоби (09.09.2020). «Окрашивание по Папаниколау (мазок по Папаниколау) для мазка по Папаниколау / теста по Папаниколау».
15. Yang GC, Alvarez II (1995). «Сверхбыстрое окрашивание по Папаниколау. Альтернативная подготовка для тонкоигольной аспирационной цитологии». Acta Cytol . 39 (1): 55–60. PMID  7531380.
16. Демей, Ричард (2012). "Глава 26: Пятна". Искусство и наука цитопатологии . Чикаго, Иллинойс: Am Soc Clinical Pathology. стр. 1505. ISBN 978-0-89189-644-9. OCLC  761848930.