U6 snRNA — это некодирующий компонент малой ядерной РНК (snRNA) U6 snRNP ( малый ядерный рибонуклеопротеин ), РНК-белковый комплекс, который объединяется с другими snRNP, немодифицированной пре-мРНК и различными другими белками для сборки сплайсосомы , большого РНК-белкового молекулярного комплекса, который катализирует вырезание интронов из пре-мРНК . Сплайсинг, или удаление интронов , является основным аспектом посттранскрипционной модификации и происходит только в ядре эукариот .
Последовательность РНК U6 является наиболее высококонсервативной среди всех пяти мяРНК, участвующих в сплайсосоме [1], что позволяет предположить, что функция мяРНК U6 оставалась как важной, так и неизменной в ходе эволюции.
В геномах позвоночных часто встречаются многочисленные копии гена мяРНК U6 или псевдогенов , полученных из U6 . [2] Такая распространенность «резервных копий» гена мяРНК U6 у позвоночных дополнительно указывает на его эволюционную важность для жизнеспособности организмов.
Ген мяРНК U6 был выделен во многих организмах, [3] включая C. elegans . [4] Среди них пекарские дрожжи ( Saccharomyces cerevisiae ) являются широко используемым модельным организмом при изучении мяРНК.
Структура и каталитический механизм мяРНК U6 напоминают структуру и каталитический механизм домена V интронов группы II. [5] [6] Считается, что образование тройной спирали в мяРНК U6 играет важную роль в активности сплайсинга, где ее роль заключается в перемещении каталитического сайта к сайту сплайсинга. [6]
Специфичность пар оснований U6 snRNA позволяет U6 snRNP прочно связываться с U4 snRNA и слабо с U5 snRNA тройного snRNP во время начальной фазы реакции сплайсинга. По мере развития реакции U6 snRNA расстегивается от U4 и связывается с U2 snRNA. На каждом этапе этой реакции вторичная структура U6 snRNA претерпевает обширные конформационные изменения. [7]
Ассоциация U6 snRNA с 5'-концом интрона посредством спаривания оснований во время реакции сплайсинга происходит до образования лариатного (или лассообразного ) промежуточного продукта и необходима для продолжения процесса сплайсинга. Ассоциация U6 snRNP с U2 snRNP посредством спаривания оснований образует комплекс U6-U2, структуру, которая включает активный сайт сплайсосомы . [8] : 433–437
В то время как предполагаемая вторичная структура консенсусного спаривания оснований ограничивается короткой 5'- петлей стебля , для определенных организмов, таких как дрожжи, были предложены гораздо более обширные структуры. [9] В дополнение к 5'-петле стебля все подтвержденные U6 snRNA могут образовывать предполагаемую 3'-внутримолекулярную петлю стебля. [10]
Известно, что мяРНК U6 образует обширные парные взаимодействия с мяРНК U4 . [11] Было показано, что это взаимодействие является взаимоисключающим по отношению к взаимодействию внутримолекулярной петли 3'-стебля. [7]
Обнаружено, что свободная U6 snRNA связана с белками Prp24 и LSms . Предполагается, что Prp24 образует промежуточный комплекс с U6 snRNA, чтобы способствовать обширному спариванию оснований между U4 и U6 snRNA, а Lsms могут способствовать связыванию Prp24. Было определено приблизительное расположение этих доменов связывания белка, и белки были позже визуализированы с помощью электронной микроскопии. Это исследование предполагает, что в свободной форме U6 Prp24 связывается с телестеблем, а богатый уридином 3'-хвост U6 snRNA пронизывает кольцо Lsms. Другим важным белком, связанным с NTC, связанным с U6, является Cwc2, который путем взаимодействия с важными элементами каталитической РНК вызывает образование функционального каталитического ядра в сплайсосоме. Cwc2 и U6 достигают образования этого комплекса путем взаимодействия с ISL и областями, расположенными вблизи 5'-сайта сплайсинга. [12]