Молекулярный сенсор или хемосенсор — это молекулярная структура (органические или неорганические комплексы), которая используется для обнаружения аналита с целью получения обнаруживаемого изменения или сигнала . [1] [2] [3] [4] Действие хемосенсора основано на взаимодействии, происходящем на молекулярном уровне, обычно включает в себя непрерывный мониторинг активности химических веществ в заданной матрице, такой как раствор, воздух, кровь, ткань, сточные воды, питьевая вода и т. д. Применение хемосенсоров называется хемосенсорикой, которая является формой молекулярного распознавания . Все хемосенсоры разработаны так, чтобы содержать сигнальную часть и распознающую часть , которые связаны либо напрямую друг с другом, либо через какой-либо соединитель или спейсер. [5] [6] [7] Сигнализация часто представляет собой оптически основанное электромагнитное излучение , вызывающее изменения либо (или обоих) свойств поглощения или испускания ультрафиолетового и видимого излучения датчиков. Хемосенсоры также могут быть основаны на электрохимии. Датчики малых молекул связаны с хемосенсорами. Однако традиционно они считаются структурно простыми молекулами и отражают необходимость формирования хелатирующих молекул для комплексообразования ионов в аналитической химии . Хемосенсоры являются синтетическими аналогами биосенсоров , разница в том, что биосенсоры включают биологические рецепторы, такие как антитела, аптамеры или крупные биополимеры.
Хемосенсоры описывают молекулу синтетического происхождения, которая сигнализирует о наличии вещества или энергии. Хемосенсоры можно рассматривать как тип аналитического устройства. Хемосенсоры используются в повседневной жизни и применяются в различных областях, таких как химия, биохимия, иммунология, физиология и т. д., а также в медицине в целом, например, при анализе образцов крови в условиях интенсивной терапии. Хемосенсоры могут быть разработаны для обнаружения/сигнализации одного аналита или смеси таких видов в растворе. [4] [8] [9] [10] [11] Этого можно достичь либо с помощью одного измерения, либо с помощью использования непрерывного мониторинга. Сигнальная часть действует как преобразователь сигнала , преобразуя информацию (событие распознавания между хемосенсором и аналитом) в оптический ответ четким и воспроизводимым образом.
Чаще всего изменение (сигнал) наблюдается путем измерения различных физических свойств хемосенсора, таких как фотофизические свойства, наблюдаемые при поглощении или испускании , где используются различные длины волн электромагнитного спектра . [12] [13] Следовательно, большинство хемосенсоров описываются как колориметрические ( основное состояние ) или люминесцентные ( возбужденное состояние , флуоресцентные или фосфоресцентные ). Колориметрические хемосенсоры вызывают изменения в своих абсорбционных свойствах (регистрируемых с помощью ультрафиолетово-видимой спектроскопии ), таких как интенсивность поглощения и длина волны или хиральность (с использованием циркулярно поляризованного света и спектроскопии CD ). [14]
Напротив, в случае люминесцентных хемосенсоров обнаружение аналита с использованием флуоресцентной спектроскопии приводит к спектральным изменениям в возбуждении флуоресценции или в спектрах испускания, которые регистрируются с помощью флуориметра . [ 15] Такие изменения могут также происходить в других свойствах возбужденного состояния, таких как время жизни возбужденного состояния, квантовый выход флуоресценции и поляризация и т. д. хемосенсора. Обнаружение флуоресценции может быть достигнуто при низкой концентрации (ниже ~ 10-6 М) с помощью большинства флуоресцентных спектрометров. Это дает преимущество использования датчиков непосредственно в волоконно-оптических системах. Примерами использования хемосенсоров являются мониторинг содержания крови, концентраций лекарств и т. д., а также в образцах окружающей среды. Ионы и молекулы в изобилии встречаются в биологических и экологических системах, где они участвуют/эффективны в биологических и химических процессах. [16] Разработка молекулярных хемосенсоров в качестве зондов для таких аналитов является ежегодным многомиллиардным бизнесом, в котором участвуют как малые и средние предприятия, так и крупные фармацевтические и химические компании.
Хемосенсоры впервые были использованы для описания комбинации молекулярного распознавания с некоторой формой репортера, чтобы можно было наблюдать присутствие гостя (также называемого аналитом, см. выше). [17] Хемосенсоры разработаны так, чтобы содержать сигнальную часть и часть молекулярного распознавания (также называемую сайтом связывания или рецептором). Объединение обоих этих компонентов может быть достигнуто несколькими способами, такими как интегрирование, скручивание или разнесение. Хемосенсоры рассматриваются как основной компонент области молекулярной диагностики в рамках дисциплины супрамолекулярной химии , которая опирается на молекулярное распознавание . С точки зрения супрамолекулярной химии, хемосенсинг является примером химии хозяин-гость , где присутствие гостя (аналита) в месте хозяина (сенсоре) приводит к событию распознавания (например, зондированию), которое можно отслеживать в режиме реального времени. Для этого требуется связывание аналита с рецептором с использованием всех видов связывающих взаимодействий, таких как водородные связи , дипольные и электростатические взаимодействия , сольвофобный эффект, хелатирование металлов и т. д. Распознающий/связывающий фрагмент отвечает за селективность и эффективное связывание гостя/аналита, которые зависят от топологии лиганда, характеристик мишени (ионный радиус, размер молекулы, хиральность, заряд, координационное число и жесткость и т. д.) и природы растворителя (pH, ионная сила, полярность). Хемосенсоры обычно разрабатываются так, чтобы иметь возможность взаимодействовать с целевыми видами обратимым образом, что является предпосылкой для непрерывного мониторинга.
Методы оптической сигнализации (например, флуоресценция ) чувствительны и селективны и обеспечивают платформу для реагирования в реальном времени и локального наблюдения. Поскольку хемосенсоры разработаны как для таргетинга (т. е. могут распознавать и связывать определенный вид), так и для чувствительности к различным диапазонам концентраций, их можно использовать для наблюдения за реальными событиями на клеточном уровне. Поскольку каждая молекула может давать сигнал/считывание, которые можно выборочно измерить, хемосенсоры часто называют неинвазивными и, следовательно, они привлекли значительное внимание для их применения в биологической материи, например, в живых клетках. Было разработано много примеров хемосенсоров для наблюдения за клеточной функцией и свойствами, включая мониторинг концентраций ионных потоков и транспортов внутри клеток, таких как Ca(II), Zn(II), Cu(II) и других физиологически важных катионов [18] и анионов, [19], а также биомолекул. [20] [21]
Разработка лигандов для селективного распознавания подходящих гостей, таких как катионы металлов [22] и анионы [23] [24], была важной целью супрамолекулярной химии. Термин супрамолекулярная аналитическая химия был недавно придуман для описания применения молекулярных сенсоров в аналитической химии. [25] Сенсоры малых молекул связаны с хемосенсорами. Однако их традиционно считают структурно простыми молекулами и отражают необходимость образования хелатирующих молекул для комплексообразования ионов в аналитической химии.
Хотя хемосенсоры были впервые описаны в 1980-х годах, первый пример такого флуоресцентного хемосенсора можно задокументировать как пример Фридриха Гёппельсродера , который в 1867 году разработал метод определения/обнаружения иона алюминия с использованием флуоресцентного лиганда/хелата. Эта и последующие работы других дали начало тому, что считается современной аналитической химией.
В 1980-х годах развитие хемосенсорики было достигнуто Энтони В. Чарником, [26] [27] [28] А. Прасанной де Сильвой [29] [30] [31] и Роджером Циэнем , [32] [33] [34], которые разработали различные типы люминесцентных зондов для ионов и молекул в растворах и внутри биологических клеток для приложений в реальном времени. Циэнь продолжил изучать и развивать эту область исследований, разрабатывая и изучая флуоресцентные белки для приложений в биологии, такие как зеленые флуоресцентные белки (GFP), за которые он был удостоен Нобелевской премии по химии в 2008 году. Работа Линн Соузы в конце 1970-х годов по обнаружению ионов щелочных металлов, возможно, привела к одному из первых примеров использования супрамолекулярной химии в разработке флуоресцентной сенсорики, [35], а также работа Ж.-М. Лен , Х. Буа-Лоран и его коллеги из Университета Бордо I, Франция. [36] Разработка ПЭТ-датчиков ионов переходных металлов была разработана, среди прочих, Л. Фаббрицци. [37]
В хемосенсорике использование флуорофора , связанного с рецептором через ковалентный спейсер, теперь обычно называют принципом флуорофор-спейсер-рецептор. В таких системах событие считывания обычно описывается как вызванное изменениями фотофизических свойств хемосенсорных систем из-за механизмов усиленной флуоресценции, вызванной хелатированием (CHEF), [26] [27] [28] и фотоиндуцированного переноса электронов (PET), [29] [30] [31] . В принципе, оба механизма основаны на одной и той же идее; путь коммуникации представляет собой перенос электронов через пространство от рецепторов, богатых электронами, к флуорофорам с дефицитом электронов (через пространство). Это приводит к тушению флуоресценции (активный перенос электронов), а излучение хемосенсора «выключается» для обоих механизмов в отсутствие аналитов. Однако при формировании комплекса хозяин-гость между аналитом и рецептором коммуникационный путь нарушается, и флуоресцентное излучение флуорофоров усиливается или «включается». Другими словами, интенсивность флуоресценции и квантовый выход усиливаются при распознавании аналита.
Флуорофор-рецептор также может быть интегрирован в хемосенсор. Это приводит к изменению длины волны излучения, что часто приводит к изменению цвета. Когда событие зондирования приводит к формированию сигнала, видимого невооруженным глазом, такие сенсоры обычно называют колориметрическими . Было разработано много примеров колориметрических хемосенсоров для ионов, таких как фторид . [38] Индикатор pH можно рассматривать как колориметрический хемосенсор для протонов. Такие сенсоры были разработаны для других катионов, а также анионов и более крупных органических и биологических молекул, таких как белки и углеводы. [39]
Хемосенсоры представляют собой наноразмерные молекулы и для применения in vivo должны быть нетоксичными. Хемосенсоры должны быть способны давать измеримый сигнал в прямой ответ на распознавание аналита. Следовательно, ответ сигнала напрямую связан с величиной события распознавания (и, в свою очередь, концентрацией аналита). В то время как сигнальная часть действует как преобразователь сигнала, преобразуя событие распознавания в оптический ответ. Распознающая часть отвечает за связывание с аналитом селективным и обратимым образом. Если сайты связывания представляют собой «необратимые химические реакции», индикаторы описываются как флуоресцентные хемодозиметры или флуоресцентные зонды .
Для работы датчика между двумя частями должен быть открыт активный коммуникационный путь. В колориметрических хемосенсорах это обычно зависит от структурной интеграции рецептора и преобразователя. В люминесцентном/флуоресцентном хемосенсоре эти две части могут быть «разнесены» или соединены ковалентным спейсером. Путь коммуникации осуществляется посредством переноса электронов или переноса энергии для таких флуоресцентных хемосенсоров. Эффективность распознавания хозяина-гостя между рецептором и аналитом зависит от нескольких факторов, включая конструкцию рецепторной части, которая призвана максимально соответствовать природе структурной природы целевого аналита, а также природе среды, в которой происходит событие обнаружения (например, тип среды, т. е. кровь, слюна, моча и т. д. в биологических образцах). Расширением этого подхода является разработка молекулярных маяков , представляющих собой олигонуклеотидные гибридизационные зонды, основанные на флуоресцентной сигнализации, где распознавание или событие обнаружения передается посредством усиления или уменьшения люминесценции с использованием механизма резонансного переноса энергии Фёрстера (FRET).
Все хемосенсоры разработаны так, чтобы содержать сигнальную часть и распознающую часть. Они интегрированы напрямую или соединены с коротким ковалентным спейсером в зависимости от механизма, задействованного в сигнальном событии. Хемосенсор может быть основан на самосборке сенсора и аналита. Примером такой конструкции являются анализы смещения (индикатора) IDA. [40] Были разработаны сенсоры IDA для анионов, таких как ионы цитрата или фосфата, посредством которых эти ионы могут вытеснять флуоресцентный индикатор в комплексе индикатор-хозяин. [5] Так называемый чип вкуса UT (Техасский университет) является прототипом электронного языка и сочетает супрамолекулярную химию с зарядово-связанными устройствами на основе кремниевых пластин и иммобилизованных молекул рецепторов.
Большинство примеров хемосенсоров для ионов , таких как ионы щелочных металлов (Li+, Na+, K+ и т. д.) и ионы щелочноземельных металлов (Mg2+, Ca2+ и т. д.), разработаны таким образом, что возбужденное состояние флуорофорного компонента хемосенсора гасится переносом электронов, когда сенсор не комплексуется с этими ионами. Таким образом, не наблюдается никакой эмиссии, и сенсор иногда называют «выключенным». При комплексообразовании сенсора с катионом условия для переноса электронов изменяются таким образом, что процесс гашения блокируется, а флуоресцентное излучение «включается». Вероятность ПЭТ регулируется общей свободной энергией системы ( свободной энергией Гиббса ΔG). Движущая сила для ПЭТ представлена ΔGET, общие изменения свободной энергии для переноса электронов можно оценить с помощью уравнения Рема-Веллера. [41] Перенос электронов зависит от расстояния и уменьшается с увеличением длины спейсера. Гашение переносом электронов между незаряженными видами приводит к образованию пары радикальных ионов. Иногда это называют первичным переносом электронов. Возможный перенос электронов, который происходит после ПЭТ, называют «вторичным переносом электронов». Гашение усилением хелатирования (CHEQ) является противоположным эффектом, наблюдаемым для CHEF. [42] В CHEQ наблюдается снижение флуоресцентной эмиссии хемосенсора по сравнению с тем, что наблюдалось изначально для «свободного» сенсора при образовании хозяина-гостя. Поскольку перенос электронов является направленным, такие системы также были описаны принципом ПЭТ, описываемым как усиление ПЭТ от рецептора к флуорофору с повышенной степенью гашения. Такой эффект был продемонстрирован для обнаружения анионов, таких как карбоксилаты и фториды. [43]
Большое количество примеров хемосенсоров было разработано учеными в области физических, биологических и экологических наук. Преимущества флуоресцентного излучения, «включаемого» из «выключенного» при событии распознавания, позволяют сравнивать хемосенсоры с «маяками в ночи». Поскольку процесс обратим, усиление излучения зависит от концентрации, становясь «насыщенным» только при высоких концентрациях (полностью связанный рецептор). Следовательно, можно установить корреляцию между люминесценцией (интенсивностью, квантовым выходом и в некоторых случаях временем жизни) и концентрацией аналита. Благодаря тщательному проектированию и оценке характера пути связи были разработаны аналогичные датчики, основанные на использовании переключения «вкл-выкл» или «вкл-выкл-вкл» или «выкл-вкл-выкл». Внедрение хемосенсоров на поверхности, такие как квантовые точки , наночастицы или в полимеры , также является быстрорастущей областью исследований. [44] [45] [46] Флуоресцентное зондирование также было объединено с электрохимическими методами, что дало преимущества обоим методам. [47] Другие примеры хемосенсоров, которые работают по принципу включения или выключения флуоресцентного излучения, включают резонансный перенос энергии Фёрстера (FRET), внутренний перенос заряда (ICT), скрученный внутренний перенос заряда (TICT), эмиссию на основе металлов (например, при люминесценции лантаноидов), [48] [49] и эксимерную и эксиплексную эмиссию и эмиссию, вызванную агрегацией (AIE). [50] [51] Хемосенсоры были одними из первых примеров молекул, которые могли приводить к переключению между состояниями «включено» и «выключено» с помощью внешних стимулов и, как таковые, могут быть классифицированы как синтетические молекулярные машины , за которые в 2016 году Жан-Пьер Соваж , Фрейзер Стоддарт и Бернард Л. Феринга были удостоены Нобелевской премии по химии .
Применение этих же принципов проектирования, используемых в хемосенсорике, также проложило путь к разработке имитаторов молекулярных логических вентилей (MLGM), [52] [53] впервые предложенных с использованием флуоресцентных хемосенсоров на основе ПЭТ де Сильвой и его коллегами в 1993 году. [54] Молекулы были созданы для работы в соответствии с булевой алгеброй , которая выполняет логическую операцию на основе одного или нескольких физических или химических входов. Область продвинулась от разработки простых логических систем на основе одного химического входа до молекул, способных выполнять сложные и последовательные операции.
Хемосенсоры были внедрены посредством поверхностной функционализации в частицы и гранулы, такие как наночастицы на основе металлов , квантовые точки , частицы на основе углерода, а также в мягкие материалы, такие как полимеры, для облегчения их различных применений.
Другие рецепторы чувствительны не к конкретной молекуле, а к классу молекулярных соединений, эти хемосенсоры используются в датчиках на основе массива (или микромассива). Датчики на основе массива используют связывание аналита дифференциальными рецепторами. Одним из примеров является групповой анализ нескольких дубильных кислот, которые накапливаются при старении шотландского виски в дубовых бочках. Групповые результаты продемонстрировали корреляцию с возрастом, но индивидуальные компоненты — нет. Похожий рецептор можно использовать для анализа тартратов в вине.
Применение хемосенсоров в клеточной визуализации особенно перспективно, поскольку большинство биологических процессов в настоящее время отслеживаются с использованием таких технологий визуализации, как конфокальная флуоресценция и микроскопия сверхвысокого разрешения , среди прочих.
Соединение сакситоксин является нейротоксином, обнаруженным в моллюсках, и химическим оружием. Экспериментальный датчик для этого соединения снова основан на ПЭТ. Взаимодействие сакситоксина с фрагментом краун-эфира сенсора убивает его процесс ПЭТ по отношению к флуорофору, и флуоресценция переключается с выключенного на включенное состояние. [4] Необычный фрагмент бора обеспечивает возникновение флуоресценции в видимой части электромагнитного спектра.
{{cite journal}}
: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )