В генетике ген слияния — это гибридный ген, образованный из двух ранее независимых генов. Он может возникнуть в результате транслокации , интерстициальной делеции или хромосомной инверсии . Было обнаружено, что гены слияния распространены во всех основных типах неоплазий человека . [1] Идентификация этих генов слияния играет важную роль в качестве диагностического и прогностического маркера . [2]
Первый ген слияния [1] был описан в раковых клетках в начале 1980-х годов. Открытие было основано на открытии в 1960 году Питером Ноуэллом и Дэвидом Хангерфордом в Филадельфии небольшой аномальной маркерной хромосомы у пациентов с хроническим миелоидным лейкозом — первой последовательной хромосомной аномалии, обнаруженной в злокачественной опухоли человека, позже названной Филадельфийской хромосомой . [3] В 1973 году Джанет Роули в Чикаго показала, что Филадельфийская хромосома возникла в результате транслокации между хромосомами 9 и 22 , а не в результате простой делеции хромосомы 22, как считалось ранее. Несколько исследователей в начале 1980-х годов показали, что транслокация хромосомы Филадельфия привела к образованию нового гена слияния BCR::ABL1, состоящего из 3'-части гена ABL1 в точке разрыва на хромосоме 9 и 5'-части гена, называемого BCR, в точке разрыва на хромосоме 22. В 1985 году было четко установлено, что ген слияния на хромосоме 22 продуцировал аномальный химерный белок BCR::ABL1, способный вызывать хронический миелоидный лейкоз.
Уже 30 лет известно, что соответствующее слияние генов играет важную роль в опухолеобразовании. [4] Гены слияния могут способствовать образованию опухолей, поскольку гены слияния могут производить гораздо более активный аномальный белок, чем не слитые гены. Часто гены слияния являются онкогенами , вызывающими рак ; к ним относятся BCR-ABL , [5] TEL-AML1 ( ОЛЛ с t(12; 21)), AML1-ETO ( M2 AML с t(8; 21)) и TMPRSS2 - ERG с интерстициальной делецией на хромосоме 21 , часто встречающейся при раке простаты. [6] В случае TMPRSS2-ERG, нарушая сигнализацию андрогенового рецептора (AR) и ингибируя экспрессию AR онкогенным фактором транскрипции ETS, продукт слияния регулирует рак простаты. [7] Большинство генов слияния обнаруживаются при гематологических раковых заболеваниях , саркомах и раке простаты . [1] [8] BCAM-AKT2 — это ген слияния, который является специфическим и уникальным для серозного рака яичников высокой степени злокачественности . [9]
Онкогенные гены слияния могут привести к генному продукту с новой или отличной функцией от двух партнеров слияния. В качестве альтернативы протоонкоген сливается с сильным промотором , и, таким образом, онкогенная функция устанавливается для функционирования посредством повышения регуляции, вызванного сильным промотором партнера слияния выше по течению. Последнее распространено в лимфомах , где онкогены сопоставляются с промоторами генов иммуноглобулинов . [10] Онкогенные транскрипты слияния могут также быть вызваны транс-сплайсингом или событиями считывания . [11]
Поскольку хромосомные транслокации играют такую важную роль в неоплазии, была создана специализированная база данных хромосомных аберраций и слияний генов при раке. Эта база данных называется Mitelman Database of Chromosome Aberrations and Gene Fusions in Cancer. [12]
Наличие определенных хромосомных аберраций и их результирующих генов слияния обычно используется в диагностике рака для постановки точного диагноза. Анализ хромосомных полос , флуоресцентная гибридизация in situ (FISH) и полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) являются распространенными методами, используемыми в диагностических лабораториях. Все эти методы имеют свои явные недостатки из-за очень сложной природы раковых геномов . Недавние разработки, такие как высокопроизводительное секвенирование [13] и индивидуальные ДНК-микрочипы, обещают внедрение более эффективных методов. [14]
Слияние генов играет ключевую роль в эволюции архитектуры генов. Мы можем наблюдать его эффект, если слияние генов происходит в кодирующих последовательностях. [15] Дупликация, расхождение последовательностей и рекомбинация являются основными факторами, вносящими вклад в эволюцию генов. [16] Эти события, вероятно, могут производить новые гены из уже существующих частей. Когда слияние генов происходит в области некодирующей последовательности, это может привести к неправильной регуляции экспрессии гена, который теперь находится под контролем цис-регуляторной последовательности другого гена. Если это происходит в кодирующих последовательностях, слияние генов вызывает сборку нового гена, затем это позволяет появиться новым функциям путем добавления пептидных модулей в многодоменный белок. [15] Методы обнаружения для инвентаризации событий слияния генов в больших биологических масштабах могут дать представление о многомодульной архитектуре белков. [17] [18] [19]
Пурины аденин и гуанин являются двумя из четырех информационных кодирующих оснований универсального генетического кода . Биосинтез этих пуринов происходит схожими, но не идентичными путями у разных видов трех доменов жизни: архей , бактерий и эукариот . Основной отличительной чертой путей биосинтеза пуринов у бактерий является преобладание слияний генов, когда два или более ферментов биосинтеза пуринов кодируются одним геном. [20] Такие слияния генов происходят почти исключительно между генами, кодирующими ферменты, которые выполняют последовательные этапы в пути биосинтеза. Эукариотические виды обычно демонстрируют наиболее распространенные слияния генов, наблюдаемые у бактерий, но, кроме того, имеют новые слияния, которые потенциально увеличивают метаболический поток.
В последние годы технология секвенирования следующего поколения уже стала доступной для скрининга известных и новых событий слияния генов в масштабе всего генома. Однако предпосылкой для крупномасштабного обнаружения является парное секвенирование транскриптома клетки . Направление обнаружения генов слияния в основном направлено на анализ данных и визуализацию. Некоторые исследователи уже разработали новый инструмент под названием Transcriptome Viewer (TViewer) для прямой визуализации обнаруженных слияний генов на уровне транскрипта. [21]
Биологи также могут намеренно создавать гены слияния для исследовательских целей. Слияние генов-репортеров с регуляторными элементами интересующих генов позволяет исследователям изучать экспрессию генов. Слияния генов-репортеров можно использовать для измерения уровней активности регуляторов генов, определения регуляторных участков генов (включая требуемые сигналы), определения различных генов, которые регулируются в ответ на один и тот же стимул, и искусственного управления экспрессией желаемых генов в определенных клетках. [22] Например, создав ген слияния интересующего белка и зеленого флуоресцентного белка , интересующий белок можно наблюдать в клетках или тканях с помощью флуоресцентной микроскопии . [23] Белок, синтезируемый при экспрессии гена слияния, называется белком слияния .