stringtranslate.com

Гомогенизация (биология)

В гистопатологии патологическая гомогенизация рассматривается как потеря вариаций, например, коллагена при склероатрофическом лихене (на фото).

Гомогенизация в биологии клетки или молекулярной биологии — это процесс, при котором различные фракции биологического образца становятся равными по составу. Это может быть признаком заболевания в гистопатологии или преднамеренным процессом в исследовании: гомогенизированный образец имеет одинаковый состав во всем объеме, так что удаление фракции не изменяет общий молекулярный состав оставшегося образца и идентичен удаленной фракции. Индуцированная гомогенизация в биологии часто сопровождается молекулярной экстракцией и различными аналитическими методами, включая ИФА и вестерн-блот. [1]

Методы

Гомогенизация ткани в растворе часто выполняется одновременно с лизисом клеток . Однако, чтобы предотвратить лизис, ткань (или набор клеток, например, из клеточной культуры ) можно хранить при температуре немного выше нуля, чтобы предотвратить автолиз , и в изотоническом растворе, чтобы предотвратить осмотическое повреждение. [2]

Если замораживание ткани возможно, криогомогенизация может быть выполнена в «сухих» условиях, и часто является методом выбора, когда желательно собрать несколько различных молекулярных классов (например, как белок, так и РНК ) из одного образца или комбинированного набора образцов, или когда желательно долгосрочное хранение части образца. Криогомогенизация может быть выполнена с использованием переохлажденной ступки и пестика (классический подход), или ткань может быть гомогенизирована путем измельчения ее в мелкий порошок внутри чистого пластикового пакета, опирающегося на переохлажденный твердый металлический блок [3] (более недавно разработанная и более эффективная техника).

Гомогенизация под высоким давлением используется для выделения содержимого грамположительных бактерий , поскольку эти клетки исключительно устойчивы к лизису и могут сочетаться со стерилизацией при высокой температуре. [4]

Гомогенизация по Даунсу — это метод, подходящий для мягких тканей млекопитающих, в то время как лизис клеток млекопитающих также был продемонстрирован с помощью центрифугирования. [5]

Ссылки

  1. ^ Шмидт SD, Никсон RA, Мэтьюз PM (2012). «Обработка тканей перед анализом белков и метаболитов, связанных с болезнью Альцгеймера, включая Aβ». Амилоидные белки . Методы в молекулярной биологии. Т. 849. С. 493–506. doi :10.1007/978-1-61779-551-0_33. ISBN 978-1-61779-550-3. PMID  22528111.
  2. ^ Чанг, Та-Юань; Лиманек, Джеймс С.; Чанг, Кэтрин CY (1 сентября 1981 г.). «Простая и эффективная процедура быстрой гомогенизации культивируемых клеток животных, выращенных в монослое». Аналитическая биохимия . 116 (2): 298–302. doi :10.1016/0003-2697(81)90360-2. PMID  6119045.
  3. ^ von Ziegler, Lukas M.; Saab, Bechara J.; Mansuy, Isabelle M. (27 марта 2013 г.). «Простой и быстрый метод криогомогенизации тканей, позволяющий извлекать разнообразные молекулярные молекулы». Journal of Neuroscience Methods . 216 (2): 137–41. doi :10.1016/j.jneumeth.2013.03.005. PMID  23541735. S2CID  34417825.
  4. ^ Wuytack, Elke Y; Diels, Ann MJ; Michiels, Chris W (1 августа 2002 г.). «Бактериальная инактивация с помощью гомогенизации под высоким давлением и высокого гидростатического давления». Международный журнал пищевой микробиологии . 77 (3): 205–212. doi :10.1016/S0168-1605(02)00054-5. PMID  12160080.
  5. ^ Сингх, Каустуб; Гупта, Анкур; Бухнер, Абель Джон; Ибис, Фатма; Пронк, Иоахим В.; Там, Даниэль; Эрал, Хусейн Бурак (1 июля 2019 г.). «Анализ центробежной гомогенизации и ее применение для эмульгирования и механического лизиса клеток». Журнал коллоидной и интерфейсной науки . 547 : 127–135. doi :10.1016/j.jcis.2019.03.036. PMID  30952074. S2CID  96448552.