Фотоактивируемая аденилатциклаза (PAC) — это белок , состоящий из домена фермента аденилатциклазы, напрямую связанного с доменом светочувствительного типа BLUF (синий световой рецептор с использованием FAD). При освещении синим светом домен фермента становится активным и преобразует АТФ в цАМФ , важный вторичный мессенджер во многих клетках. У одноклеточного жгутиконосца Euglena gracilis PACα и PACβ (euPAC) служат фоторецепторным комплексом, который воспринимает свет для фотофобных реакций и фототаксиса . [2] Небольшие, но мощные PAC были идентифицированы в геноме бактерий Beggiatoa (bPAC) и Oscillatoria acuminata (OaPAC). [3] [1] В то время как естественный bPAC обладает некоторой ферментативной активностью в отсутствие света, были созданы варианты без темновой активности (PACmn). [4]
Использование ПАК в качестве оптогенетических инструментов
Поскольку PAC состоят из светового датчика и фермента в одном белке, они могут быть выражены в других видах и типах клеток для манипулирования уровнями цАМФ с помощью света. Когда bPAC экспрессируется в сперме мыши , синее световое освещение ускоряет плавание трансгенных сперматозоидов и способствует оплодотворению . [5] При экспрессии в нейронах освещение изменяет схему ветвления растущих аксонов . [6] PAC использовался на мышах для выяснения функции нейронов в гипоталамусе , которые используют сигнализацию цАМФ для управления поведением спаривания. [7] Экспрессия PAC вместе с ионными каналами, управляемыми циклическими нуклеотидами (CNG), специфичными для K +, использовалась для гиперполяризации нейронов при очень низких уровнях освещенности, что не позволяет им генерировать потенциалы действия. [8] [9]
Родопсин гуанилатциклазы
Фотоактивируемые гуанилилциклазы были обнаружены в водных грибах Blastocladiella emersonii [10] [11] и Catenaria anguillulae . [12] В отличие от PAC, эти светоактивируемые циклазы используют ретиналь в качестве светового сенсора и, следовательно, являются родопсин -гуанилилциклазами (RhGC). При экспрессии в ооцитах Xenopus или нейронах млекопитающих RhGC генерируют цГМФ в ответ на зеленый свет. [12] Поэтому они считаются полезными оптогенетическими инструментами для исследования сигнализации цГМФ . [13]
Ссылки
^ аб Оки, Мио; Сугияма, Канако; Каваи, Фумихиро; Танака, Хитоми; Нихей, Юки; Унзай, Сатору; Такэбе, Масуми; Мацунага, Сигэру; Адачи, Синъити; Сибаяма, Наоя; Чжоу, Чживэнь (31 мая 2016 г.). «Структурное понимание фотоактивации аденилатциклазы фотосинтезирующих цианобактерий». Труды Национальной академии наук . 113 (24): 6659–6664. Бибкод : 2016PNAS..113.6659O. дои : 10.1073/pnas.1517520113 . ISSN 0027-8424. ПМЦ 4914150 . PMID 27247413.