АТФ -чувствительный калиевый канал (или канал K АТФ ) — это тип калиевого канала , который управляется внутриклеточными нуклеотидами , АТФ и АДФ . АТФ-чувствительные калиевые каналы состоят из субъединиц типа K ir 6.x и субъединиц рецептора сульфонилмочевины (SUR), а также дополнительных компонентов. [1] Каналы K АТФ широко распространены в плазматических мембранах ; [2] однако некоторые из них также могут быть обнаружены на субклеточных мембранах. Эти последние классы каналов K АТФ можно классифицировать как сарколеммальные («sarcK АТФ »), митохондриальные («mitoK АТФ ») или ядерные («nucK АТФ »).
Каналы K АТФ были впервые обнаружены в сердечных миоцитах Акинори Номой в Японии. [3] Регулируемая глюкозой активность каналов K АТФ была обнаружена в бета-клетках поджелудочной железы Фрэнсис Эшкрофт в Оксфордском университете . [4] Закрытие каналов K АТФ приводит к увеличению секреции инсулина в бета-клетках и снижению секреции глюкагона в альфа-клетках. [5]
SarcK ATP состоит из восьми белковых субъединиц ( октамер ). Четыре из них являются членами семейства калиевых ионных каналов внутреннего выпрямления K ir 6.x (либо K ir 6.1 , либо K ir 6.2 ), в то время как остальные четыре являются рецепторами сульфонилмочевины ( SUR1 , SUR2A и SUR2B ). [6] Субъединицы K ir имеют два трансмембранных промежутка и образуют пору канала. Субъединицы SUR имеют три дополнительных трансмембранных домена и содержат два нуклеотидсвязывающих домена на цитоплазматической стороне. [7] Они позволяют осуществлять нуклеотид-опосредованную регуляцию калиевого канала и играют решающую роль в его роли датчика метаболического статуса. Эти субъединицы SUR также чувствительны к сульфонилмочевинам, MgATP ( магниевая соль АТФ) и некоторым другим фармакологическим открывателям каналов. Хотя все АТФ sarcK состоят из восьми субъединиц в соотношении 4:4, их точный состав варьируется в зависимости от типа ткани. [8]
MitoK ATP были впервые идентифицированы в 1991 году с помощью одноканальных записей внутренней митохондриальной мембраны. [9] Молекулярная структура mitoK ATP изучена меньше, чем структура sarcK ATP . Некоторые отчеты указывают на то, что сердечный mitoK ATP состоит из субъединиц K ir 6.1 и K ir 6.2, но не содержит ни SUR1, ни SUR2. [10] [11] Совсем недавно было обнаружено, что некоторые мультипротеиновые комплексы, содержащие сукцинатдегидрогеназу, могут обеспечивать активность, аналогичную активности каналов K ATP . [12]
Присутствие nucK АТФ было подтверждено открытием того, что изолированные участки ядерной мембраны обладают свойствами, как кинетическими, так и фармакологическими, аналогичными свойствам каналов K АТФ плазматической мембраны . [13]
Четыре гена были идентифицированы как члены семейства генов K ATP . Гены sur1 и kir6.2 расположены в chr11p15.1, а гены kir6.1 и sur2 находятся в chr12p12.1. Гены kir6.1 и kir6.2 кодируют порообразующие субъединицы канала K ATP , причем субъединицы SUR кодируются геном sur1 (SUR1) или селективным сплайсингом гена sur2 (SUR2A и SUR2B). [14]
Изменения в транскрипции этих генов, и, таким образом, производство каналов K АТФ , напрямую связаны с изменениями в метаболической среде. Высокие уровни глюкозы , например, вызывают значительное снижение уровня мРНК kir6.2 — эффект, который может быть отменен более низкой концентрацией глюкозы. [15] Аналогично, 60 минут ишемии , за которыми следуют 24–72 часа реперфузии, приводят к увеличению транскрипции kir6.2 в миоцитах левого желудочка крысы. [16]
Был предложен механизм реакции клетки K АТФ на гипоксию и ишемию. [17] Низкие внутриклеточные уровни кислорода снижают скорость метаболизма, замедляя цикл TCA в митохондриях. Неспособное эффективно переносить электроны, внутриклеточное соотношение NAD+ / NADH уменьшается, активируя фосфотидилинозитол-3- киназу и внеклеточные сигнал-регулируемые киназы. Это, в свою очередь, повышает регуляцию транскрипции c-jun , создавая белок, который связывается с промотором sur2 . [ необходима цитата ]
Одним из важных следствий связи между клеточным окислительным стрессом и повышенной выработкой K АТФ является то, что общая функция транспорта калия прямо пропорциональна концентрации этих каналов на мембране. В случаях диабета каналы K АТФ не могут функционировать должным образом, а выраженная чувствительность к легкой сердечной ишемии и гипоксии является результатом неспособности клеток адаптироваться к неблагоприятным окислительным условиям. [18]
Степень, в которой конкретные соединения способны регулировать открытие каналов K АТФ, зависит от типа ткани и, в частности, от основного метаболического субстрата ткани.
В бета-клетках поджелудочной железы АТФ является основным источником метаболизма, а соотношение АТФ/ АДФ определяет активность каналов K АТФ . В состоянии покоя слабо выпрямляющие внутрь каналы K АТФ в бета-клетках поджелудочной железы спонтанно активны, позволяя ионам калия вытекать из клетки и поддерживая отрицательный мембранный потенциал покоя (немного более положительный, чем потенциал реверсии K + ). [19] При более высоком метаболизме глюкозы и, следовательно, повышенных относительных уровнях АТФ каналы K АТФ закрываются, вызывая деполяризацию мембранного потенциала клетки , активируя потенциалзависимые кальциевые каналы и, таким образом, способствуя кальций-зависимому высвобождению инсулина . [19] Переход из одного состояния в другое происходит быстро и синхронно из-за мультимеризации С-конца среди ближайших молекул каналов K АТФ . [20]
Кардиомиоциты , с другой стороны, получают большую часть своей энергии из длинноцепочечных жирных кислот и их эквивалентов ацил - КоА . Сердечная ишемия, поскольку она замедляет окисление жирных кислот, вызывает накопление ацил-КоА и индуцирует открытие канала K АТФ, в то время как свободные жирные кислоты стабилизируют его закрытую конформацию. Это изменение было продемонстрировано путем изучения трансгенных мышей, выведенных с нечувствительными к АТФ калиевыми каналами. В поджелудочной железе эти каналы всегда были открыты, но оставались закрытыми в сердечных клетках. [21] [22]
При наступлении энергетического кризиса в клетке функция митохондрий имеет тенденцию к снижению. Это происходит из-за переменного внутреннего мембранного потенциала , несбалансированного трансмембранного транспорта ионов и перепроизводства свободных радикалов , среди прочих факторов. [8] В такой ситуации каналы митоК АТФ открываются и закрываются, чтобы регулировать как внутреннюю концентрацию Ca 2+ , так и степень набухания мембраны. Это помогает восстановить надлежащий мембранный потенциал, обеспечивая дальнейший отток H + , который продолжает обеспечивать протонный градиент, необходимый для синтеза АТФ в митохондриях. Без помощи калиевых каналов истощение высокоэнергетического фосфата опережало бы скорость, с которой АТФ могла бы создаваться против неблагоприятного электрохимического градиента . [23]
Ядерные и сарколеммальные каналы K ATP также способствуют выносливости и восстановлению после метаболического стресса. Для сохранения энергии, sarcK ATP открывается, сокращая продолжительность потенциала действия , в то время как nucK ATP -опосредованные изменения концентрации Ca 2+ в ядре благоприятствуют экспрессии генов защитных белков. [8]
Ишемия сердца, хотя и не всегда приводит к немедленному летальному исходу, часто приводит к отсроченной гибели кардиомиоцитов из-за некроза , вызывая постоянное повреждение сердечной мышцы. Один из методов, впервые описанный Кейтом Реймером в 1986 году, заключается в том, чтобы подвергнуть пораженную ткань коротким, нелетальным периодам ишемии (3–5 минут) перед серьезным ишемическим инсультом. Эта процедура известна как ишемическое прекондиционирование («ИПК») и ее эффективность, по крайней мере частично, обусловлена стимуляцией каналов K АТФ . [ необходима цитата ]
Для максимального эффекта IPC требуются как sarcK ATP , так и mitoK ATP . Селективная блокада mitoK ATP с помощью 5-гидроксидекановой кислоты («5-HD») или MCC-134 [24] полностью подавляет кардиопротекцию, обеспечиваемую IPC, а генетический нокаут генов sarcK ATP [25] у мышей, как было показано, увеличивает базальный уровень повреждения по сравнению с мышами дикого типа. Считается, что эта базовая защита является результатом способности sarcK ATP предотвращать перегрузку клеток Ca 2+ и подавление развития силы во время сокращения мышц, тем самым сохраняя дефицитные энергетические ресурсы. [26]
Отсутствие sarcK ATP , помимо ослабления преимуществ IPC, значительно ухудшает способность миоцитов правильно распределять Ca 2+ , снижая чувствительность к симпатическим нервным сигналам и предрасполагая субъекта к аритмии и внезапной смерти. [27] Аналогичным образом, sarcK ATP регулирует тонус гладких мышц сосудов , а удаление генов kir6.2 или sur2 приводит к спазму коронарных артерий и смерти. [28]
При дальнейшем изучении роли sarcK ATP в регуляции сердечного ритма было обнаружено, что мутантные формы канала, в частности мутации в субъединице SUR2, ответственны за дилатационную кардиомиопатию , особенно после ишемии/реперфузии. [29] До сих пор неясно, оказывает ли открытие каналов K ATP полностью про- или антиаритмические эффекты. Повышенная проводимость калия должна стабилизировать мембранный потенциал во время ишемических инсультов, уменьшая степень инфаркта и эктопическую активность водителя ритма. С другой стороны, открытие калиевого канала ускоряет реполяризацию потенциала действия, возможно, вызывая аритмический повторный вход. [8]