Drosha — это фермент рибонуклеазы III класса 2 [5] , который у людей кодируется геном DROSHA ( ранее RNASEN ) . [6] [7] [8] Это первичная нуклеаза, которая выполняет этап инициации процессинга miRNA в ядре. Она тесно сотрудничает с DGCR8 и коррелирует с Dicer . Было обнаружено, что она имеет важное значение в клинических знаниях для прогнозирования рака. [9] и репликации ВИЧ-1. [10]
История
Человеческий Drosha был клонирован в 2000 году, когда он был идентифицирован как ядерная dsRNA рибонуклеаза, участвующая в обработке рибосомальных РНК- предшественников. [11] Два других человеческих фермента, которые участвуют в обработке и активности miRNA, — это белки Dicer и Argonaute . Недавно было обнаружено, что белки, подобные Drosha, играют важную роль в прогнозировании рака [9] и репликации ВИЧ-1. [10]
Полученные таким образом микроРНК представляют собой короткие молекулы РНК , которые регулируют широкий спектр других генов, взаимодействуя с комплексом подавления, индуцированным РНК (RISC), чтобы вызвать расщепление комплементарной информационной РНК (мРНК) как части пути интерференции РНК . Молекулы микроРНК синтезируются как длинные первичные транскрипты РНК, известные как pri-miRNA , которые расщепляются Drosha, чтобы создать характерную структуру стебель-петля длиной около 70 пар оснований , известную как pre-miRNA. [11] Pre-miRNA, когда связаны с EXP5, стабилизируются из-за удаления 5'-кэпа и 3'-поли(A)-хвоста. [13] </ref> Drosha существует как часть белкового комплекса, называемого комплексом микропроцессора , который также содержит белок связывания двухцепочечной РНК DGCR8 (называемый Pasha у D. melanogaster и C. elegans ). [14] DGCR8 необходим для активности Drosha и способен связывать одноцепочечные фрагменты pri-miRNA, которые необходимы для правильной обработки. [15] Комплекс Drosha также содержит несколько вспомогательных факторов, таких как EWSR1 , FUS, hnRNP , p68 и p72. [16]
Оба белка, Drosha и DGCR8, локализуются в ядре клетки , где происходит процессинг pri-miRNA в pre-miRNA. Эти два белка гомеостатически контролируют биогенез miRNA с помощью петли обратной связи. [16] 2nt 3'-выступ генерируется Drosha в ядре, распознаваемом Dicer в цитоплазме, что связывает события восходящей и нисходящей обработки. Затем pre-miRNA далее обрабатывается РНКазой Dicer в зрелые miRNA в цитоплазме клетки . [11] [16] Также существует изоформа Drosha, которая не содержит сигнала ядерной локализации, что приводит к образованию c-Drosha. [17] [18] Было показано, что этот вариант локализуется в цитоплазме клетки , а не в ядре, но его влияние на процессинг pri-miRNA пока неясно.
Было обнаружено, что некоторые miRNA отклоняются от обычных путей биогенеза и не обязательно требуют Drosha или Dicer , поскольку им не требуется процессинг pri-miRNA в pre-miRNA. [16] Drosha-независимые miRNA происходят от mirtrons , которые являются генами, кодирующими miRNA в своих интронах и использующими сплайсинг для обхода расщепления Drosha. Simtrons подобны mirtron, не зависят от сплайсинга и требуют расщепления, опосредованного Drosha, хотя им не требуется большинство белков в каноническом пути, таких как DGCR8 или Dicer . [10]
Клиническое значение
Drosha и другие ферменты обработки miRNA могут быть важны для прогнозирования рака. [9] И Drosha, и Dicer могут функционировать как главные регуляторы обработки miRNA и, как было замечено, подавляются при некоторых типах рака молочной железы . [20] Альтернативные модели сплайсинга Drosha в The Cancer Genome Atlas также указывают на то, что c-drosha, по-видимому, обогащен при различных типах рака молочной железы, рака толстой кишки и рака пищевода . [18] Однако точная природа связи между обработкой микроРНК и онкогенезом неясна, [21] но его функцию можно эффективно изучить с помощью нокдауна siRNA на основе независимой проверки. [22]
Drosha и другие ферменты обработки miRNA также могут быть важны для репликации ВИЧ-1. miRNA способствуют врожденной противовирусной защите. Это может быть продемонстрировано путем подавления двух важных белков обработки miRNA, Drosha и Dicer, что приводит к значительному усилению вирусной репликации в PBMC пациентов, инфицированных ВИЧ-1. Таким образом, Drosha в сочетании с Dicer, по-видимому, играет роль в контроле репликации ВИЧ-1. [10]
Ссылки
^ abc GRCh38: Ensembl выпуск 89: ENSG00000113360 – Ensembl , май 2017 г.
^ abc GRCm38: Ensembl выпуск 89: ENSMUSG00000022191 – Ensembl , май 2017 г.
^ "Human PubMed Reference:". Национальный центр биотехнологической информации, Национальная медицинская библиотека США .
^ "Mouse PubMed Reference:". Национальный центр биотехнологической информации, Национальная медицинская библиотека США .
^ Филиппов В, Соловьев В , Филиппова М, Гилл СС (март 2000). "Новый тип белков семейства РНКазы III у эукариот". Gene . 245 (1): 213–221. doi :10.1016/s0378-1119(99)00571-5. PMID 10713462.
^ Филиппов В, Соловьев В, Филиппова М, Гилл СС (март 2000). "Новый тип белков семейства РНКазы III у эукариот". Gene . 245 (1): 213–221. doi :10.1016/S0378-1119(99)00571-5. PMID 10713462.
^ Wu H, Xu H, Miraglia LJ, Crooke ST (ноябрь 2000 г.). «Человеческая РНКаза III — это белок массой 160 кДа, участвующий в прерибосомальной обработке РНК». Журнал биологической химии . 275 (47): 36957–36965. doi : 10.1074/jbc.M005494200 . PMID 10948199.
^ ab "Ген Энтреза: рибонуклеаза III РНКАЗЕН, ядерная".
^ abc Slack FJ, Weidhaas JB (декабрь 2008 г.). «МикроРНК в прогнозировании рака». The New England Journal of Medicine . 359 (25): 2720–2722. doi :10.1056/NEJMe0808667. PMC 10035200. PMID 19092157 .
^ abcd Swaminathan G, Navas-Martín S, Martín-García J (март 2014 г.). «МикроРНК и инфекция ВИЧ-1: противовирусная активность и не только». Журнал молекулярной биологии . 426 (6): 1178–97. doi : 10.1016/j.jmb.2013.12.017 . PMID 24370931.
^ abcd Ли Ю, Ан С, Хан Дж, Чой Х, Ким Дж, Йим Дж и др. (сентябрь 2003 г.). «Ядерная РНКаза III Дроша инициирует процессинг микроРНК». Природа . 425 (6956): 415–419. Бибкод : 2003Natur.425..415L. дои : 10.1038/nature01957. PMID 14508493. S2CID 4421030.
^ Fortin KR, Nicholson RH, Nicholson AW (август 2002 г.). "Рибонуклеаза III мыши. Структура кДНК, анализ экспрессии и расположение в хромосоме". BMC Genomics . 3 (1): 26. doi : 10.1186/1471-2164-3-26 . PMC 122089 . PMID 12191433.
^ Sloan KE, Gleizes PE, Bohnsack MT (май 2016). «Нуклеоцитоплазматический транспорт РНК и комплексов РНК-белок». Журнал молекулярной биологии . 428 (10 Pt A): 2040–59. doi :10.1016/j.jmb.2015.09.023. PMID 26434509.
^ Han J, Lee Y, Yeom KH, Nam JW, Heo I, Rhee JK и др. (июнь 2006 г.). «Молекулярная основа распознавания первичных микроРНК комплексом Drosha-DGCR8». Cell . 125 (5): 887–901. doi : 10.1016/j.cell.2006.03.043 . PMID 16751099. S2CID 453021.
^ abcd Suzuki HI, Miyazono K (январь 2011). «Возникающая сложность каскадов генерации микроРНК». Журнал биохимии . 149 (1): 15–25. doi :10.1093/jb/mvq113. PMID 20876186.
^ Link S, Grund SE, Diederichs S (июнь 2016 г.). «Альтернативный сплайсинг влияет на субклеточную локализацию Drosha». Nucleic Acids Research . 44 (11): 5330–5343. doi :10.1093/nar/gkw400. PMC 4914122. PMID 27185895 .
^ ab Dai L, Chen K, Youngren B, Kulina J, Yang A, Guo Z и др. (декабрь 2016 г.). «Цитоплазматическая активность Drosha, генерируемая альтернативным сплайсингом». Nucleic Acids Research . 44 (21): 10454–10466. doi :10.1093/nar/gkw668. PMC 5137420. PMID 27471035 .
^ Francia S, Michelini F, Saxena A, Tang D, de Hoon M, Anelli V и др. (август 2012 г.). «Продукты РНК DICER и DROSHA, специфичные для определенного участка, контролируют реакцию на повреждение ДНК». Nature . 488 (7410): 231–235. Bibcode :2012Natur.488..231F. doi :10.1038/nature11179. PMC 3442236 . PMID 22722852.
^ Томсон Дж. М., Ньюман М., Паркер Дж. С., Морин-Кенсицкий Э. М., Райт Т., Хаммонд СМ. (август 2006 г.). «Обширная посттранскрипционная регуляция микроРНК и ее влияние на рак». Гены и развитие . 20 (16): 2202–2207. doi :10.1101/gad.1444406. PMC 1553203. PMID 16882971 .
^ Iorio MV, Croce CM (июнь 2012 г.). «Участие микроРНК в развитии рака у человека». Канцерогенез . 33 (6): 1126–1133. doi :10.1093/carcin/bgs140. PMC 3514864. PMID 22491715 .
^ Мункачи Г., Штупински З., Герман П., Бан Б., Пенцвалто З., Сарвас Н. и др. (сентябрь 2016 г.). «Проверка эффективности подавления РНКи с использованием данных генного массива показывает 18,5% частоты неудач в 429 независимых экспериментах». Молекулярная терапия. Нуклеиновые кислоты . 5 (9): е366. дои : 10.1038/mtna.2016.66. ПМК 5056990 . ПМИД 27673562.
Дальнейшее чтение
Gunther M, Laithier M, Brison O (июль 2000 г.). «Набор белков, взаимодействующих с фактором транскрипции Sp1, выявленный в двухгибридном скрининге». Молекулярная и клеточная биохимия . 210 (1–2): 131–142. doi :10.1023/A:1007177623283. PMID 10976766. S2CID 1339642.
Fortin KR, Nicholson RH, Nicholson AW (август 2002 г.). "Рибонуклеаза III мыши. Структура кДНК, анализ экспрессии и расположение в хромосоме". BMC Genomics . 3 (1): 26. doi : 10.1186/1471-2164-3-26 . PMC 122089 . PMID 12191433.
Ли Ю., Ан С., Хан Дж., Чой Х., Ким Дж., Йим Дж. и др. (сентябрь 2003 г.). «Ядерная РНКаза III Дроша инициирует процессинг микроРНК». Природа . 425 (6956): 415–419. Бибкод : 2003Natur.425..415L. дои : 10.1038/nature01957. PMID 14508493. S2CID 4421030.
Грегори Р.И., Ян К.П., Амутхан Г., Чендримада Т., Доратотаж Б., Куч Н. и др. (ноябрь 2004 г.). «Микропроцессорный комплекс опосредует генезис микроРНК». Природа . 432 (7014): 235–240. Бибкод : 2004Natur.432..235G. дои : 10.1038/nature03120. PMID 15531877. S2CID 4389261.
Zeng Y, Yi R, Cullen BR (январь 2005 г.). «Распознавание и расщепление первичных предшественников микроРНК ядерным ферментом процессинга Drosha». The EMBO Journal . 24 (1): 138–148. doi :10.1038/sj.emboj.7600491. PMC 544904. PMID 15565168 .
Han J, Lee Y, Yeom KH, Kim YK, Jin H, Kim VN (декабрь 2004 г.). «Комплекс Drosha-DGCR8 в первичной обработке микроРНК». Genes & Development . 18 (24): 3016–3027. doi :10.1101/gad.1262504. PMC 535913. PMID 15574589 .
Landthaler M, Yalcin A, Tuschl T (декабрь 2004 г.). «Ген 8 критической области синдрома ДиДжорджи у человека и его гомолог D. melanogaster необходимы для биогенеза miRNA». Current Biology . 14 (23): 2162–2167. Bibcode :2004CBio...14.2162L. doi :10.1016/j.cub.2004.11.001. hdl : 11858/00-001M-0000-0012-EB83-3 . PMID 15589161. S2CID 13266269.
Zeng Y, Cullen BR (июль 2005 г.). «Эффективная обработка первичных шпилек микроРНК с помощью Drosha требует фланкирующих неструктурированных последовательностей РНК». Журнал биологической химии . 280 (30): 27595–27603. doi : 10.1074/jbc.M504714200 . PMID 15932881.
Irvin-Wilson CV, Chaudhuri G (2006). «Альтернативная инициация и сплайсинг в экспрессии гена Dicer в клетках молочной железы человека». Breast Cancer Research . 7 (4): R563–R569. doi : 10.1186/bcr1043 . PMC 1175071. PMID 15987463.
Kimura K, Wakamatsu A, Suzuki Y, Ota T, Nishikawa T, Yamashita R и др. (январь 2006 г.). «Диверсификация транскрипционной модуляции: крупномасштабная идентификация и характеристика предполагаемых альтернативных промоторов человеческих генов». Genome Research . 16 (1): 55–65. doi :10.1101/gr.4039406. PMC 1356129. PMID 16344560 .
Olsen JV, Blagoev B, Gnad F, Macek B, Kumar C, Mortensen P и др. (Ноябрь 2006 г.). «Глобальная, in vivo и сайт-специфическая динамика фосфорилирования в сигнальных сетях». Cell . 127 (3): 635–648. doi : 10.1016/j.cell.2006.09.026 . PMID 17081983. S2CID 7827573.
Сугито Н., Исигуро Х., Кувабара Ю., Кимура М., Мицуи А., Курехара Х. и др. (декабрь 2006 г.). «RNASEN регулирует пролиферацию клеток и влияет на выживаемость больных раком пищевода». Клинические исследования рака . 12 (24): 7322–7328. дои : 10.1158/1078-0432.CCR-06-0515. PMID 17121874. S2CID 7569257.
Kim YK, Kim VN (февраль 2007 г.). «Обработка интронных микроРНК». The EMBO Journal . 26 (3): 775–783. doi :10.1038/sj.emboj.7601512. PMC 1794378. PMID 17255951 .
Син Л., Киев Э. (сентябрь 2007 г.). «Микро- и стабильные РНК BHRF1 вируса Эпштейна-Барра во время латентного периода III и после индукции репликации». Журнал вирусологии . 81 (18): 9967–9975. дои : 10.1128/JVI.02244-06. ПМК 2045418 . ПМИД 17626073.
Внешние ссылки
Обзор всей структурной информации, доступной в PDB для UniProt : Q9NRR4 (рибонуклеаза 3) на сайте PDBe-KB .