Тиаминаза — это фермент , который метаболизирует или расщепляет тиамин на пиримидин и тиазол. При употреблении является антинутриентом .
Старое название — «аневриназа». [1]
Существует два типа с разными номерами Комиссии по ферментам : [2]
Тиаминаза I расщепляет пиримидиновое кольцо в тиамине от тиазолиевого кольца в метиленовом мостике. Оттуда она добавляет базовое соединение к пиримидину, создавая аналог ингибитора тиамина. Тиаминаза I обладает способностью использовать множество CN-расщепляющих нуклеофильных субстратов, таких как цистеин, пиридин, анилин, вератриламин, дитиотреитол и хинолин. [7]
При анализе структуры тиаминазы I она показывает складку, похожую на складку периплазматических связывающих белков группы II, таких как белок, связывающий мальтозу. [8] Эти периплазматические связывающие белки имеют два домена, каждый из которых содержит складку α/β. Эти два домена объединяются, образуя глубокую щель, которая соединена тремя кроссоверными сегментами. Из-за этой структуры ученые предположили, что тиаминаза I могла произойти от доисторического периплазматического связывающего белка, который отвечал за захват тиамина. [8] Между двумя доменами, в щели, находится активный сайт для тиаминазы I. Вдоль щели находятся четыре кислотных остатка и шесть остатков тирозина. Для того чтобы тиамин взаимодействовал с тиаминазой I, он располагается в активном сайте между пиримидином и Asp272 двумя водородными связями. Glu241 затем активирует Cys113 для атаки C6 пиримидина. Это образует цвиттер-ионный промежуточный продукт. [8] Glu241 вызывает протонирование и нуклеофильную атаку, что приводит к расщеплению связи между пиримидином и тиазолом. При наблюдении за кристаллической структурой, она имеет два домена типа α/β, разделенных большой щелью. При комнатной температуре две молекулы имеют некристаллографическую двойную ось, которая соединена сульфатным ионом. [9]
Тиаминаза II расщепляет, но не добавляет основание. Тиаминаза II может использовать в качестве нуклеофила только воду . [10]
Было обнаружено, что тиаминаза II является TenA. Для того, чтобы расщепить связь CN между тиазолом и пиримидином, тиаминаза использует только воду в качестве нуклеофила. При рассмотрении тиаминазы II обнаруживается, что она имеет кристаллическую структуру, которая имеет 11 спиралей, окружающих глубокий кислотный карман. [8] Для каждого мономера, присутствующего в четвертичной структуре, он взаимодействует с двумя другими мономерами. Существует несколько остатков, таких как Tyr112, Phe208, Tyr47 и Tyr163, которые вносят определенный вклад в π-стекинговую среду, окружающую лиганд HMP. [8] Боковая цепь Glu205 образует водородную связь с азотом N1 в пиримидиновом кольце. Затем боковая цепь Tyr163 и Asp44 объединяются, образуя водородные связи с N3 и N4'. [8] Наконец, каталитический остаток Cys135 располагается вблизи C2 в пиридиновом кольце, завершая расщепление тиамина на его гетероциклы. [8]
Этот фермент можно найти в различных источниках. Его можно найти в морских организмах, растениях и бактериях. Поскольку тиамин (витамин B 1 ) является очень важным веществом, необходимым для метаболических путей почти всех организмов, введение тиаминазы в систему может быть очень пагубным. Часто организм получает этот фермент, поглощая другой организм, который его несет. В большинстве случаев в рыбе-добыче содержится одна из бактерий, которая производит этот фермент. Когда эта рыба-добыча потребляется сырой без обработки, бактерии передаются потребителю. [11] Потребитель в конечном итоге заболевает, даже умирает, от дефицита тиамина . Это было замечено в различных лабораторных исследованиях. Благодаря этим исследованиям фермент был обнаружен у рыбы-зебры, а также у красной корнетовой рыбы. [11] Приготовление пищи, содержащей тиаминазу, обычно инактивирует фермент. [11]
Источники тиаминазы I включают:
Источники тиаминазы II включают:
До сих пор неясно, что делает тиаминаза для рыб, бактериальных клеток или насекомых, которые ее содержат. В папоротниках тиаминаза I, как полагают, обеспечивает защиту от насекомых [18]
Исследования показали, что тиамингидролаза (тиаминаза II), которая, как первоначально считалось, участвует исключительно в деградации тиамина, на самом деле была идентифицирована как играющая роль в деградации тиамина с сохранением пиримидиновой части. Продукт гидролиза тиамина N-формил-4-амино-5-аминометил-2-метилпиримидин транспортируется в клетку и деформилируется амидогидролазой ylmB и гидролизуется до 5-аминоимидазолриботида. [19]
В 1941 году он был описан как причина смертельно опасной атактической невропатии у лисиц, выращиваемых на фермах и питающихся сырым карпом . [20]
Он также известен как причина цереброкортикотического некроза у крупного рогатого скота и полиоэнцефаломалазии у овец, употребляющих в пищу растения, содержащие тиаминазу. [21] [22]
Это когда-то вызывало экономические потери в выращивании рыбы , например, в желтохвосте, питавшемся сырым анчоусом в качестве единственного корма в течение определенного периода, а также в морском леще и радужной форели . Та же проблема изучается в системе естественной пищевой цепи. [23]
Личинки дикого шелкопряда Anaphe venata употребляются в пищу в районе дождевых лесов Нигерии в качестве дополнительного белкового питания, а термоустойчивая тиаминаза в них вызывает острую сезонную мозжечковую атаксию, называемую африканской сезонной атаксией или нигерийской сезонной атаксией . [24]
В 1860–61 годах Берк и Уиллс были первыми европейцами, пересекшими Австралию с юга на север; по возвращении они питались в основном сырым папоротником нарду . Возможно, это привело к их смерти из-за чрезвычайно высокого уровня тиаминазы, содержащейся в нарду. Аборигены готовили нарду, замачивая спорокарпы в воде по крайней мере на день, чтобы избежать последствий дефицита тиамина , которые могли возникнуть при употреблении сырых листьев. В журналах исследователей они отметили множество симптомов дефицита тиамина, поэтому считается, что они не вымачивали нарду достаточно долго. В конечном итоге дефицит тиамина мог привести к их гибели. [2] Стоит отметить, что существует несколько других гипотез относительно того, что могло убить Берка и Уиллса, и это широко обсуждается историками и учеными. [ требуется цитата ]
Ферменты тиаминазы I, присутствующие в культуральных растворах Bacillus thiaminolyticus [3-5] и Clostridium sporogenes [6-8], были высокоочищены и проведены подробные кинетические исследования. Но, несмотря на важность фермента тиаминазы I в отравлении запасов папоротником-орляком [9], имеется ограниченная информация о свойствах этой или других тиаминаз папоротника.
Тиаминаза в буферном экстракте куколок Anaphe была типа I
{{cite journal}}
: CS1 maint: DOI неактивен по состоянию на ноябрь 2024 г. ( ссылка )