Ультрафиолетово-видимая спектроскопия

Диапазон спектроскопического анализа

Спектрофотометр УФ-Вид Beckman DU640

Ультрафиолетово-видимая спектрофотометрия ( УФ-Вид или УФ-ВИД ) ^{[1] [2] [3]} относится к абсорбционной спектроскопии или отражательной спектроскопии в части ультрафиолетовой и полной, смежной видимой областях электромагнитного спектра . ^[2] Будучи относительно недорогой и легко реализуемой, эта методология широко используется в различных прикладных и фундаментальных приложениях. Единственное требование заключается в том, чтобы образец поглощал в области УФ-Вид, т. е. был хромофором . Абсорбционная спектроскопия является дополнительной к флуоресцентной спектроскопии . Интересующими параметрами, помимо длины волны измерения, являются поглощение (A) или пропускание (%T) или отражение (%R), а также их изменение со временем. ^{[4] [5]}

Спектрофотометр UV -Vis — это аналитический прибор, который измеряет количество ультрафиолетового (УФ) и видимого света, поглощаемого образцом. Это широко используемый метод в химии, биохимии и других областях для идентификации и количественного определения соединений в различных образцах. ^[6]

Спектрофотометры UV-Vis работают, пропуская луч света через образец и измеряя количество света, поглощенного на каждой длине волны. Количество поглощенного света пропорционально концентрации поглощающего соединения в образце.

Оптические переходы

Большинство молекул и ионов поглощают энергию в ультрафиолетовом или видимом диапазоне, т. е. являются хромофорами . Поглощенный фотон возбуждает электрон в хромофоре до молекулярных орбиталей с более высокой энергией, что приводит к возбужденному состоянию . ^[7] Для органических хромофоров предполагается четыре возможных типа переходов: π–π*, n–π*, σ–σ* и n–σ*. Комплексы переходных металлов часто окрашены (т. е. поглощают видимый свет) из-за наличия множественных электронных состояний, связанных с неполностью заполненными d-орбиталями. ^[5]

Приложения

Пример показаний УФ-Вид

УФ-видимый диапазон можно использовать для мониторинга структурных изменений в ДНК. ^[8]

Спектроскопия UV-Vis обычно используется в аналитической химии для количественного определения различных аналитов или образцов, таких как ионы переходных металлов , высококонъюгированные органические соединения и биологические макромолекулы. Спектроскопический анализ обычно проводится в растворах, но также могут изучаться твердые тела и газы.

• Органические соединения , особенно с высокой степенью сопряжения , также поглощают свет в УФ или видимой области электромагнитного спектра . Растворителями для этих определений часто являются вода для водорастворимых соединений или этанол для органорастворимых соединений. (Органические растворители могут обладать значительным поглощением УФ; не все растворители подходят для использования в УФ-спектроскопии. Этанол поглощает очень слабо на большинстве длин волн.) Полярность растворителя и pH могут влиять на спектр поглощения органического соединения. Например, тирозин увеличивает максимумы поглощения и молярный коэффициент экстинкции при увеличении pH от 6 до 13 или при уменьшении полярности растворителя.
• Хотя комплексы с переносом заряда также вызывают появление цветов, эти цвета часто слишком интенсивны, чтобы их можно было использовать для количественных измерений.

Закон Бера-Ламберта гласит, что поглощение раствора прямо пропорционально концентрации поглощающего вещества в растворе и длине пути. ^[9] Таким образом, для фиксированной длины пути УФ-видимая спектроскопия может быть использована для определения концентрации поглотителя в растворе. Необходимо знать, как быстро поглощение изменяется с концентрацией. Это можно взять из справочных материалов (таблицы молярных коэффициентов экстинкции ) или, что более точно, определить по калибровочной кривой .

В качестве детектора для ВЭЖХ можно использовать спектрофотометр УФ-Вид . Присутствие аналита дает отклик, который считается пропорциональным концентрации. Для получения точных результатов отклик прибора на аналит в неизвестном растворе следует сравнивать с откликом на стандарт; это очень похоже на использование калибровочных кривых. Отклик (например, высота пика) для определенной концентрации называется коэффициентом отклика .

Длины волн пиков поглощения могут быть соотнесены с типами связей в данной молекуле и являются ценными для определения функциональных групп внутри молекулы. Правила Вудворда-Физера , например, представляют собой набор эмпирических наблюдений, используемых для прогнозирования λ _max , длины волны наиболее интенсивного поглощения в УФ-видимом диапазоне для сопряженных органических соединений, таких как диены и кетоны . Однако спектр сам по себе не является специфическим тестом для любого данного образца. Природа растворителя, pH раствора, температура, высокие концентрации электролитов и присутствие мешающих веществ могут влиять на спектр поглощения. Экспериментальные изменения, такие как ширина щели (эффективная полоса пропускания) спектрофотометра, также изменят спектр. Чтобы применить спектроскопию УФ-видимого диапазона к анализу, эти переменные должны контролироваться или учитываться для идентификации присутствующих веществ. ^[10]

Метод чаще всего используется количественно для определения концентрации поглощающего вещества в растворе, используя закон Бера-Ламберта : ^[11]

${\displaystyle A=\log _{10}(I_{0}/I)=\varepsilon cL}$,

где A — измеренная абсорбция (формально безразмерная, но обычно выражаемая в единицах абсорбции (AU) ^[12] ), — интенсивность падающего света на данной длине волны , — прошедшая интенсивность, L — длина пути через образец, а c — концентрация поглощающего вещества. Для каждого вещества и длины волны ε — константа, известная как молярный коэффициент поглощения или коэффициент экстинкции. Эта константа является фундаментальным молекулярным свойством в данном растворителе при определенной температуре и давлении и имеет единицы измерения . ${\displaystyle I_{0}}$ ${\displaystyle I}$ ${\displaystyle 1/M*cm}$

Поглощение и экстинкцию ε иногда определяют через натуральный логарифм вместо логарифма по основанию 10.

Закон Бера-Ламберта полезен для характеристики многих соединений, но не является универсальным соотношением для концентрации и абсорбции всех веществ. Полиномиальная связь второго порядка между абсорбцией и концентрацией иногда встречается ^[13] для очень больших сложных молекул, таких как органические красители ( например, ксиленоловый оранжевый или нейтральный красный ). ^{[14] [15]}

Спектроскопия UV–Vis также используется в полупроводниковой промышленности для измерения толщины и оптических свойств тонких пленок на пластине. Спектрометры UV–Vis используются для измерения отражательной способности света и могут быть проанализированы с помощью уравнений дисперсии Форухи–Блумера для определения показателя преломления ( ) и коэффициента экстинкции ( ) данной пленки в измеренном спектральном диапазоне. ^[16] ${\displaystyle n}$ ${\displaystyle k}$

Практические соображения

Закон Бера-Ламберта имеет неявные предположения, которые должны быть выполнены экспериментально для его применения; в противном случае существует вероятность отклонений от закона. ^[14] Например, химический состав и физическая среда образца могут изменить его коэффициент экстинкции. Поэтому химические и физические условия тестового образца должны соответствовать эталонным измерениям, чтобы выводы были действительными. Во всем мире фармакопеи, такие как Американская (USP) и Европейская (Ph. Eur.) фармакопеи, требуют, чтобы спектрофотометры работали в соответствии со строгими нормативными требованиями, охватывающими такие факторы, как рассеянный свет ^[17] и точность длины волны. ^[18]

Спектральная полоса пропускания

Спектральная полоса пропускания спектрофотометра — это диапазон длин волн, которые прибор пропускает через образец в данный момент времени. ^[19] Она определяется источником света, монохроматором , его физической шириной щели и оптической дисперсией, а также детектором спектрофотометра. Спектральная полоса пропускания влияет на разрешение и точность измерения. Более узкая спектральная полоса пропускания обеспечивает более высокое разрешение и точность, но также требует больше времени и энергии для сканирования всего спектра. Более широкая спектральная полоса пропускания обеспечивает более быстрое и легкое сканирование, но может привести к более низкому разрешению и точности, особенно для образцов с перекрывающимися пиками поглощения. Поэтому выбор подходящей спектральной полосы пропускания важен для получения надежных и точных результатов.

Важно иметь монохроматический источник излучения для света, падающего на ячейку образца, чтобы повысить линейность отклика. ^[14] Чем ближе полоса пропускания к монохроматичности (передающая единица длины волны), тем более линейным будет отклик. Спектральная полоса пропускания измеряется как число длин волн, переданных при половине максимальной интенсивности света, выходящего из монохроматора.

Наилучшая достижимая спектральная ширина полосы пропускания является спецификацией УФ-спектрофотометра и характеризует, насколько монохроматичным может быть падающий свет. Если эта ширина полосы пропускания сопоставима (или больше) с шириной пика поглощения компонента образца, то измеренный коэффициент экстинкции будет неточным. При эталонных измерениях ширина полосы пропускания прибора (ширина полосы пропускания падающего света) поддерживается ниже ширины спектральных пиков. При измерении тестового материала ширина полосы пропускания падающего света также должна быть достаточно узкой. Уменьшение спектральной ширины полосы пропускания уменьшает энергию, передаваемую детектору, и, следовательно, потребует большего времени измерения для достижения того же отношения сигнал/шум.

Ошибка длины волны

Коэффициент экстинкции аналита в растворе постепенно изменяется с длиной волны. Пик (длина волны, на которой поглощение достигает максимума) на кривой поглощения в зависимости от длины волны, т. е. спектр УФ-ВИД, находится там, где скорость изменения поглощения с длиной волны является самой низкой. ^[14] Поэтому количественные измерения растворенного вещества обычно проводятся с использованием длины волны вблизи пика поглощения, чтобы минимизировать неточности, вызванные ошибками в длине волны из-за изменения коэффициента экстинкции с длиной волны.

Рассеянный свет

Рассеянный свет ^[20] в УФ-спектрофотометре — это любой свет, который достигает его детектора, но не имеет длины волны, выбранной монохроматором. Это может быть вызвано, например, рассеянием света внутри прибора или отражениями от оптических поверхностей.

Рассеянный свет может вызвать значительные ошибки в измерениях поглощения, особенно при высоких поглощениях, поскольку рассеянный свет будет добавлен к сигналу, обнаруженному детектором, даже если он не является частью фактически выбранной длины волны. Результатом является то, что измеренное и сообщенное поглощение будет ниже, чем фактическое поглощение образца.

Рассеянный свет является важным фактором, поскольку он определяет чистоту света, используемого для анализа. Наиболее важным фактором, влияющим на него, является уровень рассеянного света монохроматора . ^[14]

Обычно детектор, используемый в спектрофотометре UV-VIS, является широкополосным; он реагирует на весь свет, который достигает его. Если значительное количество света, прошедшего через образец, содержит длины волн, которые имеют гораздо более низкие коэффициенты экстинкции, чем номинальный, прибор сообщит о неправильно низкой абсорбции. Любой прибор достигнет точки, в которой увеличение концентрации образца не приведет к увеличению сообщаемой абсорбции, поскольку детектор просто реагирует на рассеянный свет. На практике концентрация образца или длина оптического пути должны быть скорректированы, чтобы поместить неизвестное поглощение в диапазон, который действителен для прибора. Иногда разрабатывается эмпирическая калибровочная функция, использующая известные концентрации образца, чтобы позволить проводить измерения в области, где прибор становится нелинейным.

В качестве грубого ориентира, прибор с одним монохроматором обычно будет иметь уровень рассеянного света, соответствующий примерно 3 единицам поглощения (AU), что сделает измерения выше примерно 2 AU проблематичными. Более сложный прибор с двойным монохроматором будет иметь уровень рассеянного света, соответствующий примерно 6 AU, что, следовательно, позволит измерять гораздо более широкий диапазон поглощения.

Отклонения от закона Бера-Ламберта

При достаточно высоких концентрациях полосы поглощения насыщаются и демонстрируют выравнивание поглощения. Пик поглощения, по-видимому, выравнивается, поскольку уже поглощается около 100% света. Концентрация, при которой это происходит, зависит от конкретного измеряемого соединения. Один из тестов, который можно использовать для проверки этого эффекта, — это изменение длины пути измерения. В законе Бера-Ламберта изменение концентрации и длины пути имеет эквивалентный эффект — разбавление раствора в 10 раз имеет тот же эффект, что и сокращение длины пути в 10 раз. Если доступны ячейки с разной длиной пути, проверка того, выполняется ли эта связь, является одним из способов оценки того, происходит ли выравнивание поглощения.

Растворы, которые не являются однородными, могут показывать отклонения от закона Бера-Ламберта из-за явления выравнивания поглощения. Это может произойти, например, когда поглощающее вещество находится внутри взвешенных частиц. ^{[21] [22]} Отклонения будут наиболее заметны в условиях низкой концентрации и высокой абсорбции. В последней ссылке описывается способ исправления этого отклонения.

Некоторые растворы, такие как хлорид меди(II) в воде, визуально изменяются при определенной концентрации из-за измененных условий вокруг окрашенного иона (двухвалентного иона меди). Для хлорида меди(II) это означает сдвиг от синего к зеленому, ^[23] что означало бы, что монохроматические измерения будут отклоняться от закона Бера-Ламберта.

Источники неопределенности измерений

Вышеуказанные факторы вносят вклад в неопределенность измерений результатов, полученных с помощью спектрофотометрии UV-Vis . Если спектрофотометрия UV-Vis используется в количественном химическом анализе, то на результаты дополнительно влияют источники неопределенности, возникающие из природы соединений и/или растворов, которые измеряются. К ним относятся спектральные помехи, вызванные перекрытием полос поглощения, выцветание цвета поглощающих видов (вызванное разложением или реакцией) и возможное несоответствие состава между образцом и калибровочным раствором. ^[24]

Спектрофотометр ультрафиолетово-видимого диапазона

Прибор , используемый в ультрафиолетово-видимой спектроскопии, называется спектрофотометром УФ-Вид. Он измеряет интенсивность света после прохождения через образец ( ) и сравнивает ее с интенсивностью света до прохождения через образец ( ). Отношение называется пропусканием , и обычно выражается в процентах (%T). Поглощение , , основано на пропускании: ${\displaystyle I}$ ${\displaystyle I_{o}}$ ${\displaystyle I/I_{o}}$ ${\displaystyle A}$

${\displaystyle A=-\log(\%T/100\%)}$

Спектрофотометр УФ-видимого диапазона также может быть настроен на измерение отражательной способности. В этом случае спектрофотометр измеряет интенсивность света, отраженного от образца ( ), и сравнивает ее с интенсивностью света, отраженного от эталонного материала ( ) (например, белой плитки). Отношение называется отражательной способностью и обычно выражается в процентах (%R). ${\displaystyle I}$ ${\displaystyle I_{o}}$ ${\displaystyle I/I_{o}}$

Основными частями спектрофотометра являются источник света, держатель для образца, дифракционная решетка или призма в качестве монохроматора для разделения различных длин волн света и детектор. Источником излучения часто является вольфрамовая нить (300–2500 нм), дейтериевая дуговая лампа , которая непрерывна в ультрафиолетовой области (190–400 нм), ксеноновая дуговая лампа , которая непрерывна от 160 до 2000 нм; или, в последнее время, светодиоды (LED) ^[4] для видимых длин волн. Детектором обычно является фотоумножительная трубка , фотодиод , фотодиодная матрица или прибор с зарядовой связью (ПЗС). Отдельные фотодиодные детекторы и фотоумножительные трубки используются со сканирующими монохроматорами, которые фильтруют свет так, что только свет одной длины волны достигает детектора в один момент времени. Сканирующий монохроматор перемещает дифракционную решетку для «прохождения» каждой длины волны, чтобы ее интенсивность можно было измерить как функцию длины волны. Фиксированные монохроматоры используются с ПЗС и фотодиодными матрицами. Поскольку оба эти устройства состоят из множества детекторов, сгруппированных в одно- или двухмерные матрицы, они способны собирать свет разных длин волн на разных пикселях или группах пикселей одновременно.

Упрощенная схема двухлучевого УФ-видимого спектрофотометра

Спектрофотометр может быть как однолучевым, так и двухлучевым . В однолучевом приборе (например, Spectronic 20 ) весь свет проходит через ячейку образца. необходимо измерить, удалив образец. Это была самая ранняя конструкция, которая до сих пор широко используется как в учебных, так и в промышленных лабораториях. ${\displaystyle I_{o}}$

В двухлучевом приборе свет разделяется на два луча, прежде чем он достигнет образца. Один луч используется в качестве опорного; другой луч проходит через образец. Интенсивность опорного луча принимается за 100% пропускания (или 0 поглощения), а отображаемое измерение представляет собой отношение двух интенсивностей лучей. Некоторые двухлучевые приборы имеют два детектора (фотодиода), и образец и опорный луч измеряются одновременно. В других приборах два луча проходят через прерыватель луча , который блокирует один луч за раз. Детектор попеременно измеряет луч образца и опорный луч синхронно с прерывателем. В цикле прерывателя также может быть один или несколько темных интервалов. В этом случае измеренные интенсивности лучей можно скорректировать, вычитая интенсивность, измеренную в темном интервале до измерения отношения.

В однолучевом приборе сначала необходимо измерить кювету, содержащую только растворитель. Mettler Toledo разработала однолучевой спектрофотометр, который позволяет проводить быстрые и точные измерения в диапазоне УФ-Вид. Источник света состоит из ксеноновой лампы-вспышки для ультрафиолетовой (УФ), а также для видимой (VIS) и ближней инфракрасной областей длин волн, охватывающих спектральный диапазон от 190 до 1100 нм. Вспышки лампы фокусируются на стеклянном волокне, которое направляет луч света на кювету, содержащую раствор образца. Луч проходит через образец, и определенные длины волн поглощаются компонентами образца. Оставшийся свет собирается после кюветы стеклянным волокном и направляется в спектрограф. Спектрограф состоит из дифракционной решетки, которая разделяет свет на различные длины волн, и ПЗС-датчика для записи данных соответственно. Таким образом, весь спектр измеряется одновременно, что позволяет производить быструю запись. ^[25]

Образцы для УФ-видимой спектрофотометрии чаще всего представляют собой жидкости, хотя поглощение газов и даже твердых веществ также может быть измерено. Образцы обычно помещаются в прозрачную ячейку, известную как кювета . Кюветы обычно имеют прямоугольную форму, обычно с внутренней шириной 1 см. (Эта ширина становится длиной пути, , в законе Бера-Ламберта.) Пробирки также могут использоваться в качестве кювет в некоторых приборах. Тип используемого контейнера для образцов должен позволять излучению проходить через интересующую спектральную область. Наиболее широко применяемые кюветы изготавливаются из высококачественного плавленого кварца или кварцевого стекла , поскольку они прозрачны в УФ, видимой и ближней инфракрасной областях. Стеклянные и пластиковые кюветы также распространены, хотя стекло и большинство пластиков поглощают УФ, что ограничивает их полезность видимыми длинами волн. ^[4] ${\displaystyle L}$

Также были созданы специализированные приборы. Они включают присоединение спектрофотометров к телескопам для измерения спектров астрономических объектов. Микроспектрофотометры УФ-видимого диапазона состоят из УФ-видимого микроскопа, интегрированного с УФ-видимым спектрофотометром.

Полный спектр поглощения на всех интересующих длинах волн часто может быть получен напрямую с помощью более сложного спектрофотометра. В более простых приборах поглощение определяется по одной длине волны за раз, а затем оператор компилирует его в спектр. Устранив зависимость от концентрации, можно определить коэффициент экстинкции (ε) как функцию длины волны.

Микроспектрофотометрия

УФ-видимая спектроскопия микроскопических образцов выполняется путем интеграции оптического микроскопа с УФ-видимой оптикой, источниками белого света, монохроматором и чувствительным детектором, таким как прибор с зарядовой связью (ПЗС) или фотоумножительная трубка (ФЭУ). Поскольку доступен только один оптический путь, это однолучевые приборы. Современные приборы способны измерять УФ-видимые спектры как в отражательной способности, так и в пропускающей способности областей отбора проб микронного масштаба. Преимущества использования таких приборов заключаются в том, что они способны измерять микроскопические образцы, но также способны измерять спектры более крупных образцов с высоким пространственным разрешением. Как таковые, они используются в судебно-медицинской лаборатории для анализа красителей и пигментов в отдельных текстильных волокнах, ^[26] микроскопических кусочках краски ^[27] и цвета фрагментов стекла. Они также используются в материаловедении и биологических исследованиях, а также для определения энергосодержания угля и нефтематеринской породы путем измерения отражательной способности витринита . Микроспектрофотометры используются в полупроводниковой и микрооптической промышленности для контроля толщины тонких пленок после их осаждения. В полупроводниковой промышленности они используются, поскольку критические размеры схем микроскопичны. Типичное испытание полупроводниковой пластины подразумевает получение спектров из многих точек на узорчатой ​​или неузорчатой ​​пластине. Толщина осажденных пленок может быть рассчитана по интерференционной картине спектров. Кроме того, ультрафиолетово-видимая спектрофотометрия может использоваться для определения толщины, а также показателя преломления и коэффициента экстинкции тонких пленок. ^[16] Затем можно создать карту толщины пленки по всей пластине и использовать ее для контроля качества. ^[28]

Дополнительные приложения

UV-Vis можно применять для характеристики скорости химической реакции . Показательным является преобразование желто-оранжевого и синего изомеров дитизоната ртути. Этот метод анализа основан на том факте, что концентрация линейно пропорциональна концентрации. В том же подходе можно определить равновесия между хромофорами. ^{[29] [30]}

По спектру горящих газов можно определить химический состав топлива, температуру газов и соотношение воздуха и топлива. ^[31]

Смотрите также

• Прикладная спектроскопия
• Метод Бенеши–Хильдебранда
• Цветовая  – видимая спектроскопия с помощью человеческого глаза
• Спектроскопия модуляции заряда
• Спектрофотометр DU – первый прибор УФ-Вид
• Фурье-спектроскопия
• Инфракрасная спектроскопия и Рамановская спектроскопия — другие распространенные спектроскопические методы, обычно используемые для получения информации о структуре соединений или для идентификации соединений. Оба являются формами колебательной спектроскопии .
• Изобестическая точка – длина волны, при которой поглощение не меняется по мере протекания реакции. Важно в кинетических измерениях в качестве контроля.
• Ближняя инфракрасная спектроскопия
• Вращательная спектроскопия
• Спектроскопия наклона
• Ультрафиолетово-видимая спектроскопия стереоизомеров
• Колебательная спектроскопия

Ссылки

1. Коул, Кеннет; Левин, Барри С. (2020), Левин, Барри С.; Керриган, Сара (ред.), «Ультрафиолетово-видимая спектрофотометрия» , Принципы судебной токсикологии , Cham: Springer International Publishing, стр. 127–134, doi :10.1007/978-3-030-42917-1_10, ISBN 978-3-030-42917-1, получено 19 октября 2023 г.
2. Vitha, Mark F. (2018). "Глава 2". Спектроскопия: принципы и приборы . Хобокен, Нью-Джерси: John Wiley & Sons. ISBN 978-1-119-43664-5.{{cite book}}: CS1 maint: дата и год ( ссылка )
3. Эдвардс, Элисон А.; Александр, Брюс Д. (1 января 2017 г.), «Спектроскопия поглощения в УФ-видимом диапазоне, органические приложения» , в Линдон, Джон К.; Трантер, Джордж Э.; Коппенаал, Дэвид У. (ред.), Энциклопедия спектроскопии и спектрометрии (третье издание) , Оксфорд: Academic Press, стр. 511–519, doi :10.1016/b978-0-12-803224-4.00013-3, ISBN 978-0-12-803224-4, получено 19 октября 2023 г.
4. Skoog, Douglas A.; Holler, F. James; Crouch, Stanley R. (2007). Principles of Instrumental Analysis (6-е изд.). Belmont, CA: Thomson Brooks/Cole. стр. 169–173. ISBN 978-0-495-01201-6.^{[ мертвая ссылка ]}
5. RS Drago (1992). Физические методы для химиков, 2-е издание . WB Saunders. ISBN 0030751764.
6. Франка, Адриана С.; Ноллет, Лео М. Л. (2017). Спектроскопические методы в анализе пищевых продуктов . CRC Press. стр. 664.
7. Мета, Акул (13 декабря 2011 г.). "Принцип". PharmaXChange.info .
8. Кэрролл, Грегори Т.; Доулинг, Рид К.; Киршман, Дэвид Л.; Мастей, Марк Б.; Маммана, Анджела (2023). "Внутренняя флуоресценция УФ-облученной ДНК" . Журнал фотохимии и фотобиологии A: Химия . 437 : 114484. doi :10.1016/j.jphotochem.2022.114484. S2CID  254622477.
9. Мета, Акул (22 апреля 2012 г.). «Вывод закона Бера–Ламберта». PharmaXChange.info .
10. Мисра, Прабхакар ; Дубинский, Марк, ред. (2002). Ультрафиолетовая спектроскопия и УФ-лазеры . Нью-Йорк: Марсель Деккер . ISBN 978-0-8247-0668-5.^{[ нужна страница ]}
11. "Закон Бера-Ламберта". Chemistry LibreTexts . 3 октября 2013 г. Получено 19 октября 2023 г.
12. Исторически вместо AU использовался термин «Оптическая плотность» (OD). Но также стоит отметить, что обычно измеряется процент пропускания (%T), линейное отношение, которое преобразуется в логарифм прибором для представления.
13. Bozdoğan, Abdürrezzak E. (1 ноября 2022 г.). «Полиномиальные уравнения на основе законов Бугера–Ламберта и Бера для отклонений от линейности и выравнивания поглощения» . Журнал аналитической химии . 77 (11): 1426–1432. doi :10.1134/S1061934822110028. ISSN  1608-3199. S2CID  253463022.
14. Мета, Акул (14 мая 2012 г.). «Ограничения и отклонения закона Бера–Ламберта». PharmaXChange.info .
15. Чинар, Мехмет; Корух, Али; Карабачак, Мехмет (25 марта 2014 г.). «Сравнительное исследование выбранных дисперсных производных азокрасителя на основе спектроскопического (ИК-Фурье, ЯМР и УФ–Вид) и нелинейного оптического поведения» . Spectrochimica Acta Часть A: Молекулярная и биомолекулярная спектроскопия . 122 : 682–689. Bibcode : 2014AcSpA.122..682C. doi : 10.1016/j.saa.2013.11.106. ISSN  1386-1425. PMID  24345608.
16. Löper, Philipp; Stuckelberger, Michael; Niesen, Bjoern; Werner, Jérémie; Filipič, Miha; Moon, Soo-Jin; Yum, Jun-Ho; Topič, Marko; De Wolf, Stefaan; Ballif, Christophe (2015). "Complex Refractive Index Spectra of CH3NH3PbI3 Perovskite Thin Films Defined by Spectroscopic Ellipsometry and Spectrophotometry" . The Journal of Physical Chemistry Letters . 6 (1): 66–71. doi :10.1021/jz502471h. PMID  26263093 . Получено 16 ноября 2021 г. .
17. «Проверка рассеянного света и производительности».
18. «Точность длины волны в УФ/ВИД спектрофотометрии».
19. "Persee PG Scientific Inc. – Часто задаваемые вопросы о новом УФ-излучении: ширина спектральной полосы". www.perseena.com .
20. «Что такое рассеянный свет и как его контролировать?». 12 июня 2015 г.
21. Берберан-Сантос, MN (сентябрь 1990 г.). «Повторный взгляд на закон Бира». Журнал химического образования . 67 (9): 757. Bibcode : 1990JChEd..67..757B. doi : 10.1021/ed067p757.
22. Виттунг, Пернилла; Каянус, Йохан; Кубиста, Микаэль; Мальмстрём, Бо Г. (19 сентября 1994 г.). «Выравнивание поглощения в оптических спектрах веществ, захваченных липосомами». FEBS Letters . 352 (1): 37–40. doi :10.1016/0014-5793(94)00912-0. PMID  7925937. S2CID  11419856.
23. Ansell, S; Tromp, RH; Neilson, GW (20 февраля 1995 г.). «Структура растворенного вещества и акваиона в концентрированном водном растворе хлорида меди (II)». Journal of Physics: Condensed Matter . 7 (8): 1513–1524. Bibcode : 1995JPCM....7.1513A. doi : 10.1088/0953-8984/7/8/002. S2CID  250898349.
24. Соовяли, Л.; Рыым, Э.-И.; Кютт, А.; и др. (2006). «Источники неопределенности в спектрофотометрических измерениях в УФ-видимом диапазоне». Аккредитация и обеспечение качества . 11 (5): 246–255. doi :10.1007/s00769-006-0124-x. S2CID  94520012.
25. Зарезервировано, все права принадлежат Mettler-Toledo International Inc. "Spectrophotometry Applications and Fundamentals". www.mt.com . Получено 10 июля 2018 г. .
26. Руководство по судебной экспертизе волокон, Материалы научной рабочей группы, 1999, http://www.swgmat.org/fiber.htm
27. Стандартное руководство по микроспектрофотометрии и измерению цвета при судебно-медицинском анализе красок, Научная рабочая группа - Материалы, 1999, http://www.swgmat.org/paint.htm
28. Хори, М.; Фудзивара, Н.; Кокубо, М.; Кондо, Н. (1994). «Спектроскопическая система измерения толщины тонкой пленки для полупроводниковой промышленности». Труды конференции. 10-я годовщина. IMTC/94. Передовые технологии в I & M. Конференция IEEE по приборостроению и измерительным технологиям 1994 года (Кат. № 94CH3424-9) . стр. 677–682. doi :10.1109/IMTC.1994.352008. ISBN 0-7803-1880-3. S2CID  110637259.
29. Сертова, Н.; Петков, И.; Нунци, Ж.-М. (июнь 2000 г.). «Фотохромизм дитизоната ртути(II) в растворе». Журнал фотохимии и фотобиологии A: Химия . 134 (3): 163–168. doi :10.1016/s1010-6030(00)00267-7.
30. UC Davis (2 октября 2013 г.). "The Rate Law". ChemWiki . Получено 11 ноября 2014 г. .
31. Мехренгин, МВ; Мешковский, ИК; Ташкинов, ВА; Гурьев, ВИ; Сухинец, АВ; Смирнов, ДС (июнь 2019). «Мультиспектральный пирометр для высокотемпературных измерений внутри камеры сгорания газотурбинных двигателей». Measurement . 139 : 355–360. Bibcode :2019Meas..139..355M. doi :10.1016/j.measurement.2019.02.084. S2CID  116260472.