stringtranslate.com

Реактив Фолина–Чокальтеу

Реагент Фолина-Чокалтеу (FCR) или фенольный реагент Фолина или реагент Фолина-Дениса представляет собой смесь фосфомолибдата и фосфорновольфрамата , используемую для колориметрического in vitro анализа фенольных и полифенольных антиоксидантов , также называемого методом эквивалентности галловой кислоты (GAE). [1] Он назван в честь Отто Фолина , Винтилэ Чокалтеу и Вилли Гловера Дениса . Реагент Фолина-Дениса получают путем смешивания вольфрамата натрия и фосфорномолибденовой кислоты в фосфорной кислоте . Реагент Фолина-Чокалтеу является всего лишь модификацией реагента Фолина-Дениса. Модификация состояла в добавлении сульфата лития и брома к фосфорновольфрамово-фосфомолибденовому реагенту. [2]

Поглощение различных концентраций тирозина, реагирующего с реагентом Фолина-Чокальтеу, определяется при 660 нм.

Реагент измеряет не только фенолы, но будет реагировать с любым восстанавливающим веществом. Таким образом, он измеряет общую восстанавливающую способность образца, а не только фенольные соединения. Этот реагент является частью анализа белка Лоури и также будет реагировать с некоторыми азотсодержащими соединениями, такими как гидроксиламин и гуанидин . [3] Было также показано, что реагент реагирует с тиолами, многими витаминами, нуклеотидным основанием гуанином , триозами глицеральдегидом и дигидроксиацетоном и некоторыми неорганическими ионами. Комплексообразование меди увеличивает реакционную способность фенолов по отношению к этому реагенту. [4]

Этот реагент отличается от реагента Фолина , который используется для обнаружения аминов и серосодержащих соединений.

Статья 1951 года под названием «Измерение белка с помощью фенольного реагента Фолина» [5] была самой цитируемой статьей в Индексе научного цитирования за 1945–1988 годы , на нее ссылались 187 652 раза. [6]

Физиологическое значение

Поскольку он измеряет антиоксидантную способность in vitro , этот реагент использовался для анализа продуктов питания и добавок в пищевой науке . Емкость поглощения радикалов кислорода (ORAC) раньше была отраслевым стандартом для антиоксидантной силы цельных продуктов питания, соков и пищевых добавок. [7] [8] Более ранние измерения и оценки Министерства сельского хозяйства США были отозваны в 2012 году как биологически не имеющие отношения к здоровью человека, ссылаясь на отсутствие физиологических доказательств того, что полифенолы обладают антиоксидантными свойствами in vivo . [9] Следовательно, метод ORAC, полученный только из экспериментов in vitro , больше не считается актуальным для диеты человека или биологии .

Анализ антиоксидантной способности, эквивалентный Trolox , также основанный на наличии полифенолов, является альтернативным методом измерения антиоксидантной способности in vitro . [10]

Смотрите также

Ссылки

  1. ^ Синглтон, Вернон Л.; Ортофер, Рудольф; Ламуэла-Равентос, Роза М. (1999). "[14] Анализ общих фенолов и других окислительных субстратов и антиоксидантов с помощью реагента фолина-чокальтеу". [14] Анализ общих фенолов и других окислительных субстратов и антиоксидантов с помощью реагента фолина-чокальтеу . Методы в энзимологии. Т. 299. С. 152–178. doi :10.1016/S0076-6879(99)99017-1. ISBN 9780121822002. S2CID  83124453.
  2. ^ Барлохер, Феликс; Граса, Мануэль А.С. (2020), Барлохер, Феликс; Гесснер, Марк О.; Граса, Мануэль А.С. (ред.), «Всего фенолов», « Методы изучения разложения мусора » , Cham: Springer International Publishing, стр. 157–161, doi : 10.1007/978-3-030-30515-4_18, ISBN 978-3-030-30514-7, S2CID  241534328 , получено 29.09.2022
  3. ^ Ikawa M, Schaper TD, Dollard CA, Sasner JJ (2003). «Использование фенольного реагента Фолина–Чокальтеу для обнаружения некоторых соединений азота». J. Agric. Food Chem . 51 (7): 1811–5. doi :10.1021/jf021099r. PMID  12643635.
  4. ^ Эверетт, Джейс Д.; Брайант, Квинтон М.; Грин, Эшли М.; Эбби, Ивонн А.; Вангила, Грант В.; Уокер, Ричард Б. (2010). «Тщательное исследование реакционной способности различных классов соединений по отношению к реагенту Фолина-Чокальтеу». J. Agric. Food Chem. 58 (14): 8139–44. doi :10.1021/jf1005935. PMC 4075968 . PMID  20583841.  
  5. ^ Оливер Х. Лоури; Нира Дж. Роузбро; А. Льюис Фарр; Роуз Дж. Рэндалл (1951). «Измерение белка с помощью реагента Фолина-фенола». J. Biol. Chem. 193 (1): 265–275. doi : 10.1016/S0021-9258(19)52451-6 . PMID  14907713.
  6. ^ "The Most-Cited Papers of All Time" (PDF) . Essays of an Information Scientist . 13 : 45–56. 12 февраля 1990 г. Архивировано из оригинала (PDF) 19 февраля 2018 г. Получено 14 августа 2010 г.
  7. ^ Cao G, Alessio H, Cutler R (1993). "Анализ способности поглощать кислородные радикалы для антиоксидантов" (PDF) . Free Radic Biol Med . 14 (3): 303–11. doi :10.1016/0891-5849(93)90027-R. PMID  8458588. Архивировано из оригинала 24-07-2018 . Получено 12-09-2019 .
  8. ^ Ou B, Hampsch-Woodill M, Prior R (2001). «Разработка и валидация улучшенного анализа способности поглощать радикалы кислорода с использованием флуоресцеина в качестве флуоресцентного зонда». J Agric Food Chem . 49 (10): 4619–26. doi :10.1021/jf010586o. PMID  11599998.
  9. ^ "Изъято: Способность поглощать радикалы кислорода (ORAC) в отдельных продуктах питания, выпуск 2 (2010)". Министерство сельского хозяйства США, Служба сельскохозяйственных исследований. 16 мая 2012 г. Получено 13 июня 2012 г.
  10. ^ Прайор Р., Ву Х., Шайх К. (2005). «Стандартизированные методы определения антиоксидантной способности и фенолов в пищевых продуктах и ​​диетических добавках». J Agric Food Chem . 53 (10): 4290–302. doi :10.1021/jf0502698. PMID  15884874.

Внешние ссылки