Амелогенины — это группа изоформ белков , продуцируемых путем альтернативного сплайсинга или протеолиза из гена AMELX на Х-хромосоме , а также гена AMELY у мужчин на Y-хромосоме . [1] Они участвуют в амелогенезе , развитии эмали . [2] Амелогенины — это тип внеклеточного матричного белка, который вместе с амелобластинами , эналенинами и туфтелинами управляет минерализацией эмали для формирования высокоорганизованной матрицы стержней , межстержневых кристаллов и белков.
Хотя точная роль амелогенина(ов) в регуляции процесса минерализации неизвестна, известно, что амелогенины присутствуют в изобилии во время амелогенеза. Развивающаяся эмаль человека содержит около 70% белка, 90% из которых являются амелогенинами.
Считается, что амелогенины участвуют в организации эмалевых стержней во время развития зубов . Последние исследования показывают, что эти белки регулируют инициацию и рост кристаллов гидроксиапатита во время минерализации эмали. Кроме того, амелогенины, по-видимому, способствуют развитию цемента , направляя цементобласты к поверхности корня зуба.
Ген амелогенина наиболее широко изучался у людей, где он является однокопийным геном, расположенным на X и Y хромосомах в Xp22.1–Xp22.3 и Yp 11.2 [5]. [3] Расположение гена амелогенина на половых хромосомах имеет значение для изменчивости как между формой X хромосомы ( AMELX ), так и формой Y хромосомы ( AMELY ), а также между аллелями AMELY среди разных популяций. Это связано с тем, что AMELY существует в нерекомбинирующей области хромосомы Y, эффективно изолируя ее от нормального давления отбора . Другие источники вариации амелогенина возникают из различных изоформ AMELX, полученных в результате альтернативного сплайсинга транскриптов мРНК. Конкретные роли изоформ еще предстоит установить. Среди других организмов амелогенин хорошо сохраняется среди плацентарных и имеет гомологов у однопроходных , рептилий и амфибий.
Различия между версиями гена амелогенина на X-хромосоме и Y-хромосоме (AMELX и AMELY соответственно) позволяют использовать его для определения пола неизвестных образцов человека. Интрон 1 AMELX содержит делецию из 6 пар оснований относительно интрона 1 AMELY . Это можно обнаружить с небольшими затратами с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) интрона 1 с последующим гель-электрофорезом . Две полосы ДНК, на 555 п.н. и 371 п.н., разрешаются, если присутствуют обе версии гена AMELX и AMELY (т.е. образец от мужчины), или одна полоса ДНК, на 555 п.н., если присутствует только версия AMELX (т.е. образец от женщины). [4]
Однако из-за вариации AMELY среди людей и популяций этот метод определения пола не является точным на 100%. Мутация в областях интрона 1 AMELY, обычно используемых в качестве участков отжига праймера , может отключить амплификацию ПЦР. Вставка 6 пар оснований в интрон 1 AMELY приводит к ампликону, идентичному по длине AMELX. У некоторых мужчин AMELY может быть полностью удален. В любом из этих случаев во время гель-электрофореза продуктов ПЦР визуализируется только одна полоса, что приводит к ошибочной идентификации образца как женского пола. [4] Частота ошибочной идентификации может различаться среди популяций, но в целом, по-видимому, низкая. В одном исследовании в Испании тест на определение пола амелогенина с использованием полос AMELX (977 пар оснований) и AMELY (790 пар оснований) был проведен для 1224 людей известного пола с точностью 99,84% (1222/1224). [5] Однако другое исследование в Индии показало, что 5 из 270 обследованных мужчин (1,85%) обладали делецией AMELY, что дало им название «мужчины с удаленным амелогенином» (DAM). В ответ авторы предположили, что хотя тест на пол с амелогенином может быть в целом точным, другие маркеры хромосомы Y, такие как SRY , STR или 50f2, могут использоваться для менее неоднозначной гендерной идентификации. [6]
В археологии, где ДНК слишком разрушена для анализа методом ПЦР, используется жидкостная хроматография-тандемная масс-спектрометрия (ЖХ-МС/МС) для прямого обнаружения присутствия пептидов, соответствующих любой из версий в образцах зубной эмали. [7] Этот метод использовался на образцах, возраст которых составляет вплоть до граветтского яруса . [8]
Мутации в AMELX могут вызывать несовершенный амелогенез — нарушение развития зубной эмали. [9]