Блокатор каналов — это биологический механизм, в котором определенная молекула используется для предотвращения открытия ионных каналов с целью вызвать физиологическую реакцию в клетке. Блокировка каналов осуществляется различными типами молекул, такими как катионы, анионы, аминокислоты и другие химические вещества. Эти блокаторы действуют как антагонисты ионных каналов , предотвращая реакцию, которая обычно обеспечивается открытием канала.
Ионные каналы обеспечивают селективный проход ионов через клеточные мембраны, используя белки, которые функционируют как поры, что позволяет проходить электрическому заряду в клетку и из нее. [1] Эти ионные каналы чаще всего являются управляемыми, то есть для их открытия и закрытия требуется определенный стимул. Эти типы ионных каналов регулируют поток заряженных ионов через мембрану и, следовательно, опосредуют мембранный потенциал клетки.
Молекулы, которые действуют как блокаторы каналов, важны в области фармакологии, поскольку большая часть разработки лекарств заключается в использовании антагонистов ионных каналов для регулирования физиологического ответа. Специфичность молекул, блокирующих каналы, на определенных каналах делает их ценным инструментом в лечении многочисленных расстройств. [2] [3]
Чтобы понять механизм блокаторов каналов, крайне важно понять состав ионных каналов. Их основная функция — способствовать остаточному мембранному потенциалу клетки посредством потока ионов через клеточную мембрану. Для выполнения этой задачи ионы должны иметь возможность пересекать гидрофобную область липидной бислойной мембраны, что является неблагоприятным процессом. Чтобы способствовать транспорту ионов, ионные каналы образуют гидрофильную пору через мембрану, которая обеспечивает обычно неблагоприятный перенос гидрофильных молекул. [4] Различные ионные каналы имеют различные механизмы функционирования. Они включают:
Молекулы, которые действуют как блокаторы ионных каналов, могут использоваться в отношении любого из этих различных каналов. Например, натриевые каналы, которые необходимы для создания потенциалов действия , подвержены влиянию многих различных токсинов. Тетродотоксин (TTX), токсин, обнаруженный в рыбе-собаке, полностью блокирует транспортировку ионов натрия, блокируя область селективного фильтра канала. [5] Большая часть структуры пор ионных каналов была выяснена в исследованиях, в которых токсины использовались для ингибирования функции канала. [6] [7] [8]
Такие инструменты, как рентгеновская кристаллография и электрофизиология, сыграли важную роль в определении мест связывания молекул открытого блока канала. Изучая биологический и химический состав ионных каналов, исследователи могут определить состав молекул, которые связываются с определенными областями. Рентгеновская кристаллография дает структурное изображение рассматриваемого канала и молекулы. [9] Определение гидрофобности доменов канала с помощью графиков гидрофобности также дает ключи к химическому составу молекулы и тому, почему она связывается с определенной областью. Например, если белок связывается с гидрофобной областью канала (и, следовательно, имеет трансмембранную область), рассматриваемая молекула может состоять из аминокислот аланина , лейцина или фенилаланина , поскольку все они сами по себе гидрофобны. [10] Электрофизиология также является важным инструментом в определении структуры канала, поскольку анализ ионных факторов, которые приводят к активации канала, может иметь решающее значение для понимания ингибирующего действия молекул открытого блока канала. [3] [9]
Блокаторы каналов являются антагонистами соответствующих ионных каналов. Многие каналы имеют точки связывания для регуляторных элементов, которые могут способствовать или подавлять нормальную функцию в зависимости от требований внутри клетки и организма. Нормальная функция связывания агониста — это генерация клеточных изменений, приводящих к различным нисходящим эффектам; эти эффекты варьируются от изменения мембранного потенциала до инициирования сигнальных каскадов . [11] И наоборот, когда блокаторы открытых каналов связываются с клеткой, они предотвращают нормальную функцию связывания агониста. Например, потенциалзависимые каналы открываются и закрываются на основе мембранного потенциала и имеют решающее значение в генерации потенциалов действия, позволяя ионам течь по установленным градиентам. Однако блокаторы открытых каналов могут связываться с этими каналами, чтобы предотвратить поток ионов, тем самым подавляя инициирование потенциала действия. [12]
Многие различные органические соединения могут действовать как блокаторы каналов, несмотря на специфичность канала. Каналы развили структуры, которые из-за их областей, охватывающих мембрану, могут различать различные ионы или соединения. Например, некоторые объекты слишком велики, чтобы поместиться в каналы, которые структурно определены для транспортировки более мелких объектов, таких как ион калия, пытающийся поместиться в натриевый канал. И наоборот, некоторые объекты слишком малы, чтобы быть должным образом стабилизированными определенными порами канала, такими как ион натрия, пытающийся пройти через калиевый канал. [11] [13] В обоих случаях поток канала не допускается. Однако, пока конкретное соединение обладает достаточным химическим сродством к каналу, это соединение может связываться и блокировать пору канала. Например, TTX может связывать и инактивировать потенциалзависимые натриевые каналы, несмотря на то, что TTX намного больше и химически отличается от ионов натрия. Учитывая различия в размерах и химических свойствах между TTX и ионом натрия, это пример структуры, используемой для блокировки обычно определенных каналов. [14]
Блокировка канала может быть вызвана многими различными типами органических соединений, если они могут связываться с некоторой частью поры целевого канала. Кинетика блокаторов каналов в первую очередь понятна через их использование в качестве анестетиков . Местные анестетики работают, вызывая состояние фазовой блокады в целевых нейронах. [13] Первоначально блокаторы открытых каналов неэффективно предотвращают потенциалы действия, так как блокируется мало каналов, а сам блокатор может высвобождаться из канала либо быстро, либо медленно в зависимости от его характеристик. Однако фазовые блоки возникают, поскольку повторная деполяризация увеличивает сродство блокаторов к каналам в нейроне. Сочетание увеличения доступных каналов и изменения конформации канала для увеличения сродства связывания блокатора отвечает за это действие. [13] [15] [16]
Различные нейродегенеративные заболевания были связаны с чрезмерной активацией рецептора NMDA , призванной опосредовать кальций-зависимую нейротоксичность . Исследователи изучили множество различных антагонистов NMDA и их терапевтическую эффективность, ни один из которых не пришел к выводу, что он является одновременно безопасным и эффективным. [17] В течение многих лет исследователи изучали эффекты открытого блокатора каналов, мемантина , как варианта лечения нейротоксичности. Они выдвинули гипотезу, что более быстрая скорость блокировки и разблокировки, а также общая кинетика мемантина могут быть основной причиной клинической толерантности. [17] [3] Как неконкурентный антагонист, мемантин должен приближать уровни NMDA к норме, несмотря на высокую концентрацию глутамата . Основываясь на этой информации, исследователи предположили, что когда-нибудь мемантин можно будет использовать в качестве открытого блокатора каналов для предотвращения повышения уровней глутамата, связанного с нейротоксичностью, с небольшими побочными эффектами или без них по сравнению с другими вариантами лечения. [17]
Болезнь Альцгеймера , специфическое нейродегенеративное расстройство, связано с прерываниями глутаминэргической нейротрансмиссии , которые, как полагают, приводят к основным когнитивным симптомам болезни Альцгеймера. [18] [2] [3] Исследователи предполагают, что неконкурентные агонисты рецепторов NMDA могут использоваться для помощи в лечении этих симптомов без возникновения серьезных побочных эффектов. [18] Было показано, что мемантин, как один из немногих препаратов, одобренных для лечения болезни Альцгеймера, позволяет возбуждающим постсинаптическим токам оставаться незатронутыми, одновременно снижая частоту и амплитуду тормозных постсинаптических токов. [19] Данные подтверждают гипотезу о том, что как сильная зависимость от напряжения, так и быстрая кинетика мемантина могут быть ответственны за снижение побочных эффектов и когнитивный прогресс. [20]
Муковисцидоз — это прогрессирующее генетическое заболевание, связанное с дисфункцией трансмембранного регулятора муковисцидоза ( CFTR ). [21] Блокировка этого канала определенными цитоплазматическими отрицательно заряженными веществами приводит к снижению транспорта ионов хлора и анионов бикарбоната, а также к снижению секреции жидкости и соли. Это приводит к накоплению густой слизи, что характерно для муковисцидоза. [21]
Блокаторы каналов необходимы в области анестезии. Ингибиторы натриевых каналов используются как противоэпилептические и антиаритмические средства , поскольку они могут подавлять гипервозбудимые ткани у пациента. [22] Введение специфических блокаторов натриевых каналов в ткань позволяет блокатору преимущественно связываться с натриевыми каналами, что приводит к окончательному подавлению потока натрия в ткань. Со временем этот механизм приводит к общему снижению возбуждения ткани. Длительная гиперполяризация прерывает нормальное восстановление канала и допускает постоянное подавление, обеспечивая динамический контроль анестетиков в заданной обстановке. [22]
Чрезмерное воздействие глутамата приводит к нейротоксичности у пациентов с болезнью Альцгеймера. В частности, чрезмерная активация рецепторов глутамата NMDA-типа связана с эксайтотоксичностью нейронных клеток и гибелью клеток. [18] [2] Потенциальным решением этой проблемы является снижение активности рецепторов NMDA, не вмешиваясь так радикально, чтобы вызвать клинические побочные эффекты. [23]
В попытке предотвратить дальнейшую нейродегенерацию исследователи использовали мемантин, блокатор открытого канала, в качестве формы лечения. До сих пор использование мемантина у пациентов с болезнью Альцгеймера быстро приводит к клиническому прогрессу по многим различным симптомам. Считается, что мемантин работает эффективно из-за его способности быстро изменять свою кинетику, что предотвращает накопление в канале и обеспечивает нормальную синаптическую передачу. Было обнаружено, что другие блокаторы каналов блокируют всю активность рецепторов NMDA, что приводит к неблагоприятным клиническим побочным эффектам. [3]
Трансмембранные регуляторы кистозного фиброза (CFTR) функционируют в транспорте хлорид-ионов, бикарбонат-анионов и жидкости. [24] Они экспрессируются в первую очередь в апикальных мембранах эпителиальных клеток в дыхательных, панкреатических, желудочно-кишечных и репродуктивных тканях. [21] [24] Аномально повышенная функция CFTR приводит к чрезмерной секреции жидкости. Высокоаффинные ингибиторы CFTR, такие как CFTR inh -172 и GlyH-101, показали свою эффективность при лечении секреторных диареи. [25] [26] Теоретически блокаторы каналов CFTR также могут быть полезны в качестве мужских контрацептивов. Каналы CFTR опосредуют вход бикарбонат-анионов, что необходимо для капацитации сперматозоидов . [27]
Известно, что различные типы веществ блокируют каналы ионов хлора CFTR. Некоторые из наиболее известных и изученных веществ включают сульфонилмочевины, ариламинобензоаты и дисульфоновые стильбены. [28] [29] [30] Эти блокаторы являются зависимыми от стороны, поскольку они входят в пору исключительно с цитоплазматической стороны, зависящими от напряжения, поскольку гиперполяризованные мембранные потенциалы благоприятствуют входу отрицательно заряженных веществ в пору с цитоплазматической стороны, и зависящими от концентрации ионов хлора, поскольку высокие внеклеточные ионы хлора электростатически отталкивают отрицательно заряженные блокаторы обратно в цитоплазму. [31]
Существует несколько основных классов блокаторов каналов, в том числе:
Существуют также следующие типы, которые действуют на лиганд-управляемые ионные каналы (LGIC) посредством связывания с их порами:
Известно также, что блокаторы каналов действуют на рецепторы AMPA , рецепторы глицина , рецепторы каината , рецепторы P2X и каналы, активируемые цинком (Zn 2+ ) . Тип ингибирования, опосредованный блокаторами каналов, можно назвать неконкурентным или бесконкурентным .