Лизогенный бульон ( LB ) — это богатая питательными веществами среда , используемая в основном для роста бактерий. Его создатель, Джузеппе Бертани , предполагал, что LB означает лизогенный бульон , [1] но LB также стало разговорной речью обозначать бульон Лурии , бульон Леннокса , жизненный бульон или среду Лурии -Бертани . [2] Формула среды LB была опубликована в 1951 году в первой статье Бертани о лизогении . В этой статье он описал модифицированный эксперимент с одним всплеском и изоляцию фагов P1 , P2 и P3. Он разработал среду LB для оптимизации роста шигелл и образования бляшек . [1] [3]
Формулы сред LB были отраслевым стандартом для выращивания Escherichia coli еще в 1950-х годах. [4] [5] Эти среды широко использовались в молекулярной микробиологии для получения плазмидной ДНК и рекомбинантных белков. Они продолжают оставаться одной из наиболее распространенных сред, используемых для поддержания и выращивания лабораторных рекомбинантных штаммов Escherichia coli . [5] [4] Однако для физиологических исследований использование среды LB не рекомендуется. [6]
Существует несколько распространенных формул LB. Хотя они и отличаются, они, как правило, имеют довольно схожий состав ингредиентов, используемых для стимуляции роста, включая следующие:
Ионы натрия для транспорта и осмотического баланса поставляются хлоридом натрия . Триптон используется для обеспечения незаменимых аминокислот, таких как пептиды и пептоны, для растущих бактерий, в то время как экстракт дрожжей используется для обеспечения множества органических соединений, полезных для роста бактерий. Эти соединения включают витамины и некоторые микроэлементы.
В своей оригинальной статье 1951 года Бертани использовал 10 граммов NaCl и 1 грамм глюкозы на 1 л раствора; Лурия в своем «L-бульоне» 1957 года в точности скопировал оригинальный рецепт Бертани. [7] Рецепты, опубликованные позже, обычно не включают глюкозу. [ необходима ссылка ]
Формулы, как правило, различаются по количеству хлорида натрия, что обеспечивает выбор соответствующих осмотических условий для конкретного штамма бактерий и желаемых условий культивирования. Формулы с низким содержанием соли, Lennox и Luria, идеально подходят для культур, требующих антибиотиков, чувствительных к соли.
Перед автоклавированием некоторые лаборатории корректируют pH LB до 7,5 или 8 с помощью гидроксида натрия. Однако гидроксид натрия не обеспечивает буферную емкость среды, и это приводит к быстрым изменениям pH во время культивирования бактерий. Чтобы обойти это, некоторые лаборатории предпочитают корректировать pH с помощью 5-10 ммоль/л буфера TRIS , разбавленного из 1 моль/л исходного TRIS до желаемого pH. Однако в большинстве ситуаций корректировать pH не обязательно. Некоторые лаборатории корректируют pH до 7,0 просто в качестве меры предосторожности. [8]